普萘洛尔治疗对增生性血管瘤患儿血清中VEGF、bFGF、MMP-9的影响

吴杉英 王彪 陈丽芬 黄祖根 黄循镭 王美水

·论著·

普萘洛尔治疗对增生性血管瘤患儿血清中VEGF、bFGF、MMP-9的影响

吴杉英 王彪 陈丽芬 黄祖根 黄循镭 王美水

目的观察口服普萘洛尔治疗增生期血管瘤，对患儿血清中VEGF、bFGF、MMP-9的影响。方法选择增生期血管瘤患儿40例，口服普萘洛尔治疗，抽取服药前与服药后8周血液样本，用Elisa方法检测血清中VEGF、bFGF、MMP-9的浓度。结果服药8周后血清中VEGF、bFGF、MMP-9的浓度比服药前明显降低，存在统计学差异。结论普萘洛尔治疗增生期血管瘤，其作用机制可能与下调VEGF、bFGF、MMP-9的表达有关。

普萘洛尔婴幼儿血管瘤血管内皮细胞生长因子碱性成纤维细胞生长因子基质金属蛋白酶-9

血管瘤是婴幼儿时期最常见的良性肿瘤之一，是胚胎期血管形成过程中出现的一种先天性发育不良，新生儿的发病率约为1.1%～2.6%[1]，早产儿中较常见，尤其是女性早产儿，通常发生在患儿的头部或颈部。根据血管瘤内皮细胞的生物学特点及其临床表现，可将血管瘤的自然病程分为增生期、退化期和退化完成期[2-3]。血管瘤内皮细胞的增生是血管瘤增生期的主要特征[4]，血管内皮细胞生长因子（VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）与血管瘤内皮细胞增殖密切相关，可用于血管瘤的分期；而基质金属蛋白酶9（MMP-9）可促进VEGF、bFGF等的释放，促进血管生长。本研究观察普萘洛尔治疗增生期婴幼儿血管瘤后，患儿血清中VEGF、bFGF、MMP-9的表达水平的变化，以初步揭示其可能的机制。

1 资料与方法

1.1 资料

选取2009年9月至2012年12月，我科收治的婴幼儿增生期血管瘤患者40例为研究对象。纳入标准：患儿年龄在1岁以内；出生时或出生后7～10 d出现“蚊咬”状或针尖样红点，或出生时即为片状，之后出现斑片扩大或出现皮下质软肿物；有迅速生长病史；肿物表面呈草莓状或淡蓝色，压之褪色或缩小。患窦性心动过缓、支气管哮喘、心源性休克、心脏传导阻滞（Ⅱ～Ⅲ度房室传导阻滞）、重度或急性心力衰竭等疾病的患儿除外。

1.2 方法

1.2.1 观察疗效

患儿入院后，告知口服普萘洛尔的目的、安全性及相关风险，并获患儿家属书面同意。治疗前完善相关检查，确认无相关禁忌症后开始治疗。剂量为1.5 mg/Kg·d，每天1次，晨起顿服。3 d后如无明显异常反应，出院继续服药至瘤体消退，期间注意测量血管瘤大小，观察血管瘤表面皮肤颜色及张力变化。

1.2.2 收集及检测样本

采集40例患儿服药前及服药8周后的血液样本，每次2 mL（不加抗凝剂），分别装入试管，在室温下静止30 min后，以2 000 r/min离心分离得到血清，吸取血清装入EP管内，-80℃保存待测。待标本收齐后，采用Elisa方法检测血清中VEGF、bFGF、MMP-9的浓度。

1.2.3 实验试剂及耗材

离心机、天平、EP管、-80℃冰箱、高精度加样器及枪头、酶标仪（450 nm）、37℃恒温箱、一次性试管、吸水纸、人VEGF ELISA检测试剂盒、人bFGF ELISA检测试剂盒、人MMP-9 ELISA检测试剂盒。

1.2.4 疗效判定标准

以Achauer等[5]的4级标准进行分析判断（以治疗8周时结果为准）。Ⅰ级（差）：瘤体缩小＜25%；Ⅱ级（中）：瘤体缩小及皮损颜色消退26%～50%；Ⅲ级（好）：瘤体及皮损颜色消退51%～75%；Ⅳ级（优）：皮损消退＞75%，瘤体消失及病损皮肤恢复或接近正常肤色。Ⅱ～Ⅳ为有效，Ⅰ级为无效。

1.3 统计学处理

采用SPSS17.0软件进行数据分析。计数资料采用卡方检验，计量资料采用配对t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

8周治疗后，本组患儿中优11例，好14例，中14例，差1例。服药8周后，患儿血清中VEGF浓度由（264.18±15.33）pg/mL降至（142.70±18.84）pg/mL；bFGF由（59.41±4.02）pg/mL降至（38.85±5.84）pg/mL、MMP-9浓度由（411.21±28.36）pg/mL降至（279.94± 29.80）pg/mL，均较用药前明显下降（P＜0.05）。

3 讨论

血管瘤是一种常见疾病，是以血管内皮细胞异常增殖为基础的良性肿瘤，血管瘤的形成是由血管无节制地生成或血管生成因子和抑制因子不平衡所造成。VEGF、bFGF、MMP-9在血管瘤的形成过程中发挥了重要作用。VEGF是一种糖基化分泌性多肽因子，可使内皮细胞增殖和迁移，提高血管的通透性，促进新生血管和基质细胞生长；bFGF是一种强烈的内皮细胞和管壁结缔组织促生长因子，能够促进内皮细胞迁移进入细胞外基质形成毛细血管组织，而且能诱导VEGF分泌[6]；基质金属蛋白酶（MMP）是一类具有锌离子及钙离子依赖性的细胞外蛋白水解酶，它不仅可促进血管生成因子VEGF、bFGF等的释放，促进血管生成，还可降解细胞外基质，促进内皮细胞迁移及管状结构的形成。

血清中VEGF的浓度与血管瘤内皮细胞增殖的相关性早已被证实[7-8]，即增生期血管瘤患者血清中VEGF的浓度明显高于消退期血管瘤、血管畸形及正常对照组。本研究中，服药8周后血清中VEGF、bFGF、MMP-9的浓度较服药前明显降低，该研究结果与近年来相关文献结果基本相符[9-10]。随着这三个指标浓度的下降，血管瘤停止生长或消退，因此提示普萘洛尔治疗增生期血管瘤，其机制可能与下调VEGF、bFGF、MMP-9的表达有关，但尚待进一步明确。有研究发现，普萘洛尔可能通过抑制cAMP/PKA信号通路对ERK/MAPK信号通路的激活，从而抑制增殖期血管瘤VEGF的分泌[11]。在血管瘤治疗后期，普萘洛尔通过下调Raf/丝裂原激活蛋白激酶（MAPK）通路，减少VEGF和bFGF的表达，从而促使血管瘤进一步消退[12]。相信随着今后研究的深入，其机制将更为明确并获得证实。

[1]Schwartz RA,Sidor MI,Musumeci ML,et al.Infantile hemangiomas: a challenge in pediatric dermatology[J].J Eur Acad Dermatol Venereol,2010,24(6):631-638.

[2]Jinnin M,Ishihara T,Boye E,et al.Recent progress in studies of infantile hemangioma[J].J Dermatol,2010,37(4):283-298.

[3]Boye E,Olsen BR.Signaling mechanisms in infantile hemangioma [J].Curr Opin Hematol,2009,16(3):202-208.

[4]胡琼华,王炜.血管瘤及血管畸形增殖机制及治疗进展[J].实用美容整形外科杂志,2000,11(2):95-98.

[5]Achauer BM,Chang CJ,vander Kam VM.Management of hemangioma of infancy:review of 245 patients[J].Plast Reconstr Surg,1997,99(5):1301-1308.

[6]Folkman J.Clinical application of research on angiogenesis[J].N Engl J Med,1995,333(21):1757-1763.

[7]胡琼华,林晓曦,商庆新,等.血管瘤病人血清中VEGF的定量检测及意义[J].中华整形外科杂志,2002,18(2):98-100.[8]张莉,林晓曦,王炜,等.血清血管内皮细胞生长因子在血管瘤诊断与治疗中的应用[J].中华小儿外科杂志,2004,25(1):11-12.

[9]赵忠芳,吕仁荣,霍然,等.口服普萘洛尔治疗血管瘤患者bFGF的变化[J].中国美容整形外科杂志,2011,22(8):504-507.

[10]赵忠芳,吕仁荣,霍然,等.普萘洛尔治疗增生期血管瘤患儿血清中血管内皮生长因子及基质金属蛋白酶-9的变化[J].中华整形外科杂志,2011,27(5):359-361.

[11]刘大旭.普萘洛尔治疗婴幼儿增殖期血管瘤的实验研究[D].泸州:泸州医学院,2012.

[12]Gelmetti C,Frasin A,Restano L.Innovative therapeutics in pediatric dermatology[J].Dermatol Clin,2010,28(3):619-629.

The Influence of Propranolol on VEGF,bFGF,MMP-9 in Serum Samples in the Treatment Proliferative Hemangioma

ObjectiveTo investigate the influence of propranolol on VEGF,bFGF and MMP-9 in serum samples in the treatment of proliferative hemangioma.MethodsForty children with proliferative hemangioma were enrolled and treated with propranolol.The VEGF,bFGF and MMP-9 in serum samples were detected with ELISA assay before and 8 weeks after propranolol treatment.ResultsAfter 8 weeks of treatment,the concentration levels of VEGF,bFGF and MMP-9 in serum were obviously decreased,and the differences were significant.ConclusionThe decrease on the expression of VEGF,bFGF and MMP-9 may play an important role in the treatment of proliferative hemangioma.

Propranolol;Infantile hemangioma;Vascular endothelial growth factor;Basic fibroblast growth factor; Matrix metalloproteinase-9

R732.2

A

1673－0364（2014）04－0181－03

WU Shanying,WANG Biao,CHEN Lifen,HUANG Zugen,HUANG Xunlei,WANG Meishui.
Department of Plastic Surgery, the First Affiliated Hospital of Fujian Medical University,Fuzhou 350001,China.Corresponding author:Wang Biao(E-mail: wangbiao123@tom.com).

福建省教育厅B类科技计划项目（JB11055）；国家临床重点专科建设项目。

350001福建省福州市福建医科大学附属第一医院整形外科。

王彪（E-mail：wangbiao123@tom.com）。

2014年5月12日；

2014年6月20日）

10.3969/j.issn.1673-0364.2014.04.001