儿科金黄色葡萄球菌感染的药敏实验与耐药性分析

孙瑞花，常林惠，魏晓红，杨 锐

(1.甘肃省武威市中医院，武威 733000; 2.甘肃省嘉峪关市人民医院，嘉峪关 735100; 3.甘肃省张掖市甘州区人民医院，张掖 734000)

金黄色葡萄球菌(staphylococcus aureus，SA)为儿科临床感染常见病原菌，几乎可累及所有的组织和器官，严重危害儿童健康。尤其是被称为“超级细菌”的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant staphy lococcus aureus,MRSA)呈高致病性和多重耐药,在世界范围流行,给临床抗感染治疗带来极大困难。本文收集2009年1月至2012年12月河西地区3家医院分离的82株SA，进行菌株的重新鉴定、药敏实验与耐药性分析,现报道如下。

1 资料和方法

1.1 一般资料 收集2009年1月至2012年12月甘州区人民医院、武威市中医院、嘉峪关市人民医院儿科和产科送检各类标本中分离的82株SA。标本主要以皮肤、伤口分泌物，以及痰、咽拭子为主。

1.2 菌株鉴定 菌株复核鉴定参照《全国临床检验操作规程》(第3版)执行。试验ID32 Staph板条，触酶和血浆凝固酶试剂均购自法国生物梅里埃公司，其他试剂购自杭州天和微生物公司。仪器为法国生物梅里埃ATB Expression自动微生物仪。质控菌株金黄色葡萄球菌(ATCC25923)购自甘肃省临床检验中心。82株SA经复核鉴定均符合SA的生物学特性。

1.3 药敏试验 K-B法选择了针对葡萄球菌临床常用及部分可外用抗菌药物15种，操作方法及判读标准参照美国临床实验室标准化协会(CLSI)2009年文件M100-S19标准执行。实验用M-H培养基和药敏纸片购自英国OXOID公司，β-内酰胺酶检测纸片购自法国生物梅里埃公司,质控菌株金黄色葡萄球菌(ATCC25923)。

2 结 果

82株SA检出MRSA6株，检出率7.3 %，6株MRSA β-内酰胺酶均阳性，阳性率100%；MSSA76株，检出率为92.7 %，76株MSSAβ-内酰胺酶阳性68株，阳性率为89.5 %。82株SA药敏结果见表1。

3 讨 论

SA在自然界广泛分布,是人体皮肤黏膜上定居的主要正常菌群。主要定植于鼻前庭黏膜、新生儿脐带残端等处，偶也可寄生于口咽部、皮肤、肠道、会阴部等处。约50 %的人群间歇带菌，30 %为持续带菌。医护人员的带菌率更高，达50 %～90 %，成为院内SA感染的重要传染源[1]。儿童尤其是新生儿、早产儿、免疫功能低下患儿、流感或麻疹、百日咳患儿等为SA感染的易感人群。可引起皮肤软组织感染、肺炎、菌血症、深部组织感染、肠胃炎等。SA根据其耐药性，分为MRSA株和MSSA株。MRSA株和MSSA株相比较，MRSA感染可导致更高的病死率，更长的住院时间以及更高的治疗失败率。MRSA感染有社区相关和医院相关之分[2]，社区获得MRSA(CA-MRSA)菌株常感染一些相对轻症的患者，多见于儿童及青壮年，临床表现多样，以皮肤软组织感染为突出，在儿童可造成皮肤坏死性损害，如蜂窝织炎及脓肿等，很多都需要外科干预，也可引起致死性肺炎和败血症等重症感染。由CA-MRSA引起的坏死性肺炎是儿童CA-MRSA感染死亡的主要原因。近年发现[3]，CA-MRSA对非β-内酰胺类抗生素耐药较少，常携带一种能编码杀白细胞素(PLV)的基因，PLV与严重皮肤软组织感染及坏死性肺炎有关。而医院获得MRS(HA-MRSA)感染多见于长期住院者、糖尿病患者、透析患者及ICU患者，其感染更具侵袭性，可有血流感染、呼吸道感染及泌尿系感染等，以呼吸道感染最多，败血症也很常见。MRSA对所有β-内酰胺类抗生素均可能耐药，且对其他类抗菌药物(大环内酯类、四环素类、氨基糖苷类、氟喹诺酮类等)也可呈多重耐药，给临床治疗带来困难。一旦实验室明确为MRSA感染，应提示该菌对所有青霉素类、头孢菌素类、以及β-内酰胺/β-内酰胺抑制剂复合药物、头霉菌类、碳青霉烯类、单环类抗生素和氧头孢烯类等均可能耐药，这些药物即使体外显示为敏感，实验室报告也修正耐药报告。因此，及时、准确的细菌学检测及药敏试验显得很重要。临床微生物学实验室在尽早确定SA感染的同时，必须确定是MRSA株或MSSA株，以便临床更好的循证用药治疗。

本次调查收集82株SA中检出MRSA6株，检出率7.3 %，低于首都儿科研究所报道[4]10.37 %的检出率，可能与地域和标本来源有关。另外6株MRSAβ-内酰胺酶均阳性，阳性率100 %；76株MSSAβ-内酰胺酶阳性68株，阳性率为89.5 %。药敏结果显示, MRSA株对抗菌药物的耐药性远高于 MSSA株 ，对青霉素和红霉素耐药率达100 %，克林霉素耐药率83.3 %，庆大霉素耐药率达100 %，对四环素、强力霉素、环丙沙星耐药率接近70 %，其他抗菌药物耐药率在50 %以下。MSSA株对青霉素耐药率高达89.5%, 提示目前该抗菌药物已不适于治疗由SA引起的儿童感染。红霉素和克林霉素作为青霉素过敏患者的首选药物，耐药率分65.8 %和51.3 %,说明临床医生在应用此类抗菌药物时应参照药敏试验结果，不可经验用药。对磷霉素、四环素、强力霉素、利福平、复方新诺明、环丙沙星、奈替米星、庆大霉素等耐药率5.2 %～32.9 %，提示MSSA感染时，这些抗菌药物在药敏试验结果还未出来之前可以考虑选用, 待药敏试验结果出来之后再作调整。本研究结果还显示,82株SA未发现对万古霉素、利奈唑胺、呋喃妥因的耐药株。说明对于SA引起的儿童感染, 无论MRSA株或MSSA株这些抗药物是有效的。虽然四环素、强力霉素、庆大霉素、奈替米星、环丙沙星、利福平的耐药率较低,但考虑到不良反应的原因, 建议儿童一般不选用。

MRSA耐药机制复杂，临床在确诊SA感染时,应区别对待MRSA株和MSSA株,根据药物敏感结果及时、合理使用抗生素预防和控制感染。尤其在儿科，对于MRSA定植者和感染者，应该采取有效的隔离和预防措施，医护人员应勤洗手防止MRSA的院内传播。

参考文献

[1]陆 权.儿童耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染的治疗对策[J].中国实用儿科杂志，2010，25(1)：10-13.

[2]吴 霞，俞 蕙.儿童耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染临床研究进展[J].中国实用儿科杂志,2012 ，27(4)：312-315.

[3]Stephanie A F，Jane G，Alexis E，etal.Prevalence of and risk factors for community-acquired methicillin-resistant and methicillin-sensitive Staphylococcus aureus colonization inchildren seen in a practice-based research network[J].Pediatrics，2008，121(6)：1090-1098.

[4]马晓红，徐文建，王会萍，等，儿科金黄色葡萄球菌感染现况及耐药谱分析[J].中国实用儿科杂志，2010，25(5)：391-393.