罗氏E170检测血清甲胎蛋白的精密度、准确度性能评价

昆明市第三人民医院检验科，云南 昆明 650041

甲胎蛋白(AFP)是原发性肝细胞癌的一个重要标志物[1]，临床主要用于原发性肝癌的辅助诊断及监测治疗效果或者临床变化的一个良好指标。ISO15189作为医学实验室认可标准，要求医疗机构临床实验室应对检测系统、设备或方法的主要分析性能进行验证或确认。 精密度性能是检测系统的主要分析性能之一，更是其他性能评价的基础[2]，如果精密度差，其他性能评价实验则无法进行。目前国内医学实验室对样品只作单次测量便发出报告，这种情况下精密度性能评价更是至关重要[3]。美国国家临床实验室标准化委员会颁布的EP5-A2文件修正法规(CLSI)规定了检测系统性能评估的最基本要求为精密度、准确度、可报告范围和参考区间。我们对罗氏E170免疫分析仪检测AFP的精密度、准确度进行验证。现将验证结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂 罗氏E170全自动电化学发光免疫分析仪。罗氏公司提供原装AFP配套试剂盒，校准品和质控品。

1.2 样本 美国伯乐公司高、低值质控品(BIO-RAD)，批号分别为:BIO-RAD369/BIO-RAD367；2012年卫生部临床检验中心第二次肿瘤标记物室间质控品。

1.3 方法 按照仪器操作说明书要求对仪器进行定期的维护保养，每天进行两个浓度水平常规质控，选择两个高低浓度水平的人混合血清作为实验样品，每天分析1个批次，每个浓度重复测定4次，连续5天，严格按照标准操作规程进行以下实验。

1.3.1 精密度验证实验:通常厂家都会给出两种精密度的声明—批内精密度(S批内)和总的实验室精密度(S总)。按照EP10-A2《临床实验室定量方法的初步评价》对AFP测定的精密度进行验证，因此本方案主要通过实验得到估计的批内标准差(S批内)和总的标准差(S总)并与厂家声明比较[3]。

1.3.2 准确度的验证: 通过对美国伯乐公司高、低浓度的定值质控品进行检测，选择相对应的靶值及允许范围，并分别计算绝对偏差和相对偏差；对2012年卫生部临床检验中心第二次肿瘤标记物室间质控品进行检测，检测值与已知的“靶值”进行比较。

1.4 数据处理 采用EP15-A2提供的统计学方法在EX-CELL表格上处理数据。

1.4.1 批内精密度(S批内)计算

1.4.2 总精密度(S总)计算

2 结果

2.1 精密度实验结果 罗氏公司声明电化学发光法检测AFP的批内精密度为3%，总精密度为6%，S批内<2/3S总，我们每天分析一个批次两个浓度水平的室内质控品，每个浓度重复测定4次，连续5天。数据见表1及表2。

表1 AFP精密度实验数据表(低值)单位：IU/mL

表2 AFP精密度实验数据表(高值)单位：IU/mL

从表1可以看出，低值样本测定均值为11.43 IU/mL，S批内(验证)(0.29IU/mL)

从表2可以看出，高值样本测定均值为237.38 IU/mL，S批内(验证)(1.58IU/mL)

2.2 准确度验证结果

2.2.1 对美国伯乐公司高、低浓度定值质控品进行检测，选择相应的靶值及允许范围，分别计算绝对偏差、相对偏差。结果见表3。

表3 校准品验证结果(IU/mL)

表3结果显示，AFP低浓度质控品测定值与厂家给出靶值的绝对偏差为0.23 IU/mL，相对偏差为2.1%；AFP高浓度质控品测定值与厂家给出靶值的绝对偏差为2.38 IU/mL，相对偏差为1.0%，明显小于根据生物学变异导出的总允许误差5.0%[4]。

2.2.2 对卫生部临床检验中心2012年发放的5份第二次室间质控品进行检测，检测结果与已知的“靶值”和可接受限进行比较，计算偏倚,偏倚为-4.65%～11.2%，均小于质量要求，结果见表4。

表4 室间质评控制品验证结果(单位：ng/mL)

3 讨论

检测系统最主要的性能指标是精密度和准确度[4]。NCCLS出版的EP15-A文件《用户对精密度和准确度性能的核实试验—批准指南》，目的就是使用户通过最小的努力即可以核实厂家声明的精密度和准确度性能。要求临床实验室的验证实验使用操作简单,方便快捷的方法来验证厂家已经声明的性能参数。检测系统的分析性能能够满足临床要求是实验室认可和检验结果互认的根本保证[5]。

精密度是指重复测定值间的一致性[6]。国内临床实验室对样品只作单次测量便发出报告，所以精密度性能更是至关重要。我们使用EP15-A文件批准指南对罗氏E170电化学发光测定AFP的批内不精密度和总不精密度进行验证。 从表1可以看出，低值样本S批内(验证)(0.29IU/mL)

准确度性能指的是一个检测数值偏离标准或真值[7]。是分析测量范围、灵敏度及生物参考期间评价等实验的基础。我们依据EP9-A2方案提供的检测方法，以罗氏E-170电化学发光法检测AFP的实验数据来验证准确度。表3结果显示，低值质控品的AFP测定的相对偏差为2.1%，高值质控品的相对偏差为1.0%，检测结果与“标示值”的偏倚在1.0%～2.1%之间，明显小于生物学变异导出的总允许误差5.0%。表4结果显示，通过对2012年卫生部临床检验中心第二次肿瘤标记物室间质控品进行检测，检测结果与已知的“靶值”和可接受限进行比较，偏倚为-4.65%～11.2%，均小于质量要求。对于准确度，可以通过检测商品化的校准品或定值质控品、具有确定值的能力比对试验调查样本或有参考方法检测结果的患者标本等来评估准确性[8]。上述结果说明，此两种方法对罗氏E-170电化学发光检测AFP的准确度验证是符合要求的。

综上所述，评价罗氏E170全自动免疫分析仪测定血清AFP检测系统有较好的精密度、准确度性能，能满足临床的要求。此验证方案和实验方法简便可行，可用于其它项目的性能验证。

[1] 叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程[[M].南京:东南大学出版社， 2006：689.

[2] 欧阳能良,王伟佳,李飞,等.应用BNP和NT-proBNP测定的精密度性能[J]国际检验医学杂志,2011,32(5):538-540.

[3] 杨有业，张秀明.临床检验方法学评价[M]. 北京：人民卫生出版社，2008:98-140.

[4] 张秀明，庄俊华，郑松柏，等.临床化学发光免疫法检测AFP的分析性能验证方案与实验方法[J].中华检验医学杂志,2007,30(11):1293-1297.

[5] 陶华林，汪碧琼.医疗机构临床实验室间检验结果互任的探讨[J].现代检验医学杂 志,2009,24(1):23-24.

[6] 马红霞，杨蔺.MODULAR ANALYTICS E17O全自动免疫分析仪精密度验证情况分析[J].国际检验医学杂志,2012,33(4):477.

[7] Geovge Rodrigues.准确性和精密度的定义[J].医学检验与临床杂志.2009.20(3):1.

[8].U.S Department of Health and Human Services Medicare,Medicaid and CLIA programs; Regulations implementing the clinical laboratory improvement amendments of 1998(CL IA) [S].