微波消解石墨炉法检测龟甲胶中铬元素含量*

王 蓉,施志顺, 史学礼,周至美 ,耿武松,益 磊, 李志华

(1.亳州职业技术学院药学院，安徽 亳州 236800；2.亳州市食品药品检验所，安徽 亳州 236800；3.岛津企业管理(中国)有限公司，广东 广州 510000)

微波消解石墨炉法检测龟甲胶中铬元素含量*

王 蓉1,施志顺2, 史学礼2,周至美2,耿武松2,益 磊2, 李志华3

(1.亳州职业技术学院药学院，安徽 亳州 236800；2.亳州市食品药品检验所，安徽 亳州 236800；3.岛津企业管理(中国)有限公司，广东 广州 510000)

通过以下方法对龟甲胶中的铬进行检测：龟甲胶样品经微波消解后，采用石墨炉原子吸收分光光度法测定铬含量.结果表明，铬在0～12.5 μg/L范围内与吸光度呈良好线性关系，相关系数r=0.998 6，检出限为1.58 ng/mL，平均加标回收率为94.8%.因此，认为这种方法可满足龟甲胶中微量铬含量的测定.

龟甲胶；铬；检测；微波消解；石墨炉

引言

近年来，全国多家企业被查出铬元素超标的药品，各地的抽检结果显示，明胶胶囊剂均具有很高的不合格率，其原因是这些药品胶囊壳的加工采用了废品皮革(皮革生产企业的废料) . 经鞣制后的皮革水解成明胶，其中含有大量的六价铬[1,2]，六价铬离子是铬离子中毒性最大的一种，容易进入细胞，产生五价铬和活性自由基，对DNA 造成损伤，对呼吸道、消化道有刺激性；对肝肾有明显的损伤，损伤程度与铬离子含量有关；有显著的致癌、致畸、生殖毒性.胶类中药材为天然产品，由于资源的紧缺，价格上涨，加上中药生产经营秩序尚不规范，不法商家掺假、造假的现象时有发生，因此必须严格控制药品中的铬含量.2010 版《中国药典(二部)》规定，明胶空心胶囊中的铬含量应低于2 mg/kg[3]，目前国内铬含量的检测研究主要在明胶、明胶空心胶囊及阿胶方面[4,5]，而其他胶类中药中铬含量的检测研究则相对较少.因此，建立胶类中药中铬含量的检测方法对保证用药安全以及胶类中药的发展具有十分重要的意义.

1 实验部分

1.1仪器与试剂

1.1.1 主要仪器

AA-7000原子吸收分光光度计,配石墨炉原子化器和自动进样系统，热解石墨管， 铬空心阴极灯,AC-2600制冷循环机，XT-9912型智能微波消解仪，聚四氟乙烯消解罐，XT-9700型冷却机，XT-9800型多用预处理加热仪，FA314型电子分析天平.

1.1.2 试剂试药

1 000 μg/mL铬单元素标准溶液(国家标准物质)，购自中国计量科学研究院；硝酸(优级纯)，购自国药集团；实验用水为娃哈哈纯净水；龟甲胶样品为市场所购.

1.2仪器工作条件

石墨炉原子化器程序升温参数见表1，AA-7000原子吸收分光光度计工作参数见表2.

表 1 石墨炉程序升温参数

表2 仪器工作参数

1.3供试品溶液的配制

准确称取约 0.5 g龟甲胶样品置于微波消解罐中，加入5 mLHNO3浸泡过夜，于微波消解仪中设置消解条件(见表3).消解完成后取出置冷却机上冷却，待消解罐冷却后打开盖，置于电热消解器上于140 ℃赶酸至近干，用水转移并定容至50 mL聚乙烯容量瓶中，同时做试剂消解空白，进行测定 .

表3 微波消解条件

1.4对照品溶液的配制

精密量取1 000 μg/mL铬单元素标准溶液0.5 mL，用质量分数2%硝酸溶液定容至100 mL，摇匀，再精密量取0.5 mL，用质量分数2%硝酸溶液定容至100 mL，作标准储备液.

1.5标准曲线的绘制

在给定仪器工作条件下，由仪器软件自动稀释(稀释剂为质量分数2%硝酸溶液)功能稀释成不同质量浓度的铬元素标准溶液，分别测定质量浓度为2.5，5.0，7.5，10.0，12.5 ng/mL铬溶液的吸光度，因稀释剂本身有吸收值，所以利用软件的BLK(扣空白)功能扣除水与酸的吸收[4].

铬的质量浓度与对应的吸光度，见表4.

表4 铬的质量浓度与对应的吸光度

根据表4数值绘制铬的质量浓度与吸光度之间关系的标准曲线，见图1.

图1 铬溶液吸光度标准曲线

由图1及表4得到回归方程A=0.066 2ρ+0.051 2，相关系数r=0.998 6，表明在0～12.5 ng/mL质量浓度范围内，铬的质量浓度与吸光度有着良好的线性关系.

1.6检出限

用本法对样品空白溶液连续测定14次，测定结果见表5.按3倍空白偏差计算检出限为1.58 ng/mL，样品按 0.5 g 计算，得到上述方法的检出限为 0.16 mg/kg.

表5 空白对照测定结果

1.7精密度实验

对同一批龟甲胶胶样品，在相同条件下连续 5 次重复测定，测定结果见表6，以样品质量浓度计算相对标准偏差(RSD)为1.56%.

表6 精密度试验测定结果

1.8回收率试验

分别在4批龟甲胶样品中分别同时加入一定量的铬进行加标回收试验，测得铬的平均回收率为94.8%， RSD为5.6%，结果见表7.

表7 回收率实验测定结果

1.9样品测定

用上述方法分别对4批龟甲胶样品进行处理，测定其铬含量，样品测定结果见表8.

表8 样品测定结果

2 讨论

本实验建立了原子吸收分光光度法测定龟甲胶中铬元素含量的方法，该方法在铬质量浓度0～12.5 ng/mL范围内有着良好的线性关系，相关系数为r=0.998 6，检出限为1.58 ng/mL，平均回收率94.8%.该方法在未加基体改进剂的条件下操作简便，准确性高、重复性强，适用于龟甲胶中铬元素的定量检测.微波消解加热程序中升温不能太高太快，以防止发生爆罐，影响试验结果，实验中最好使用聚乙烯材质的器皿，防止铬元素在玻璃器皿中有吸附而影响实验结果.

实验所检测4批龟甲胶样品中，有两批铬含量超标，可见将皮革明胶掺入胶类中药的现象确实存在.因此，建立龟甲胶中铬含量的检测方法对保证用药安全以及胶类中药的发展具有十分重要的意义.

[1]刘刚．明胶在医药、食品行业中的广泛应用及其安全性问题[J]．明胶科学与技术，2002，22(4)：169-171．

[2]刘峥颢，赵志磊，夏立娅，等．市场中食品添加剂明胶及添加明胶的食品中铬含量本底调查[J]．食品科技，2010，26 (2)：224-227．

[3]国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部)[M].北京:化学工业出版社,2010:460-461.

[4]李志娟,宋春伟,王金星.消解-石墨炉原子吸收法测定明胶中铬[J].医学动物防制,2011,27(10):972-973.

[5]孙洁,薛飒,张丽娜.石墨炉原子吸收法测定药用空心胶囊中的微量铬[J].现代中西医结合杂志，2011,20(16):2023-2024.

DeterminationofChromiuminTortoise-shellGluebyGraphiteFurnacewithMicrowavedigestion

WANG Rong1, SHI Zhi-shun2, SHI Xue-li2, ZHOU Zhi-mei2,GENG Wu-song2, YI Lei2, LI Zhi-hua3

(1. College of Pharmacy, Bozhou Vocational and technical College， Bozhou Anhui 236800,China;2.Bozhou Institute for Food And Drug Contro，Bozhou Anhui 236800,China;3.SHIMADZU Enterprise Management (China) Co., Ltd. ，Guangzhou Guangdong 510000,China)

To detect the chromium in the tortoise-shell glue through the following methods: tortoise-shell glue samples by microwave digestion, spectrophotometry for determination of chromium content by graphite furnace atomic absorption. The results show that, chromium in 0 ～ 12.5 μ g/L showed a good linear relationship with the absorbance range, the correlation coefficientr=0.998 6, the detection limit is 1.58 ng/mL, the average recovery is 94.8%. Therefore, this method can meet the determination of chromium content in the tortoise-shell glue.

tortoise-shell glue; chromium; test；microwave digestion; graphite furnace

1673-2103(2013)05-0060-04

2013-09-22

王蓉(1982-)，女，安徽巢湖人,助教,硕士,研究方向：天然药物合成与结构改造.

史学礼(1980-)，男，安徽涡阳人, 主管药师，研究方向：药品质量分析.

R115

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