衡山地区土著菌群生态养猪技术的应用效果研究

胡永灵, 钟金凤,许美解

(1.湖南环境生物职业技术学院，湖南 衡阳 421005；2.湖南农业大学 动物科技学院，湖南 长沙 410128)

我国的养猪模式正由过去的散养向规模化、集约化转变，生产率提高了，但猪粪尿集中排放对养殖场及周边环境造成严重污染，极大地影响了附近居民正常生活。发酵床养猪技术是控制畜禽粪便排放与污染的一种全新养殖方式，将自然农业理念和微生物技术有效结合，缓解养猪场的环境污染问题；同时这种养猪模式能使猪肠道疾病的发病率明显降低，减少了体内药物残留和抗药性现象的产生，提高猪肉品质[1-2]。这种环保养猪方式具有良好的生态效益和经济效益，对新农村建设和促进农民增收具有重大意义。湖南省的生猪生产在全国占有重要地位，生猪出栏量居全国第2位，市售发酵床养猪的微生物菌种在湖南地区的潮湿亚热带地区普遍出现性状不稳定的缺陷，限制了发酵床养猪技术的推广和应用。因此，筛选出适合本地气候的优良菌种是目前发酵床养猪体系中急需解决的关键问题。

南岳自然保护区位于湖南省境内, 地理位置为北纬27°12′10″～12′40″，东经112°34′28″～45′36″，最低海拔80 m，最高海拔1300.2 m，属亚热带季风山地湿润气候，具有气候温和，四季分明，雨水集中，植被茂盛，生态环境保护好，原始土著菌群资源丰富。因此，本试验旨在开发以适应湖南地区气候特点、具有较高活性的发酵床养猪用优良菌种，并从猪舍环境、驱臭灭蝇、日增重、肠道疾病等方面来验证南岳山土著菌的使用效果，为适合南方低排放、高效率生态养猪提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 试验动物与试验设计

选择出生时间(45±2)d、体重(31.50±0.75)kg基本相同的健康无病的杜长大三元杂交仔猪100头按单因子完全随机设计平均分为试验组与对照组，每组设5个重复，每个重复10头。分别饲养在同一猪场的2幢猪舍(一幢为试验组发酵床猪舍，另一幢为对照组普通猪舍)。

1.2 南岳衡山土著菌粉制作

1.2.1 南岳衡山土著菌粉(发酵床用) 选择南岳山区植被茂盛、原生态保护较好、落叶聚集较多的山谷树林中，在腐殖质多的有白色菌丝地方采集带菌种的土壤，用干净的麻布袋装好带回实验室。室内与地面先打扫干净并用水冲净，将采集的土壤平铺在洁净的地板上，用煮熟的米饭平铺在土壤上，然后再覆盖一层宣纸，用水喷湿宣纸，经过5～7 d，米饭与宣纸表层生长出各种颜色的菌落。收集白色菌落加入到冷开水中，与生鱼氨基酸营养剂按1∶1比例拌匀装入坛，密封保存放置在18～22 ℃左右地方进行培养，5～7 d后采用双层纱布过滤，取滤液即形成“南岳土著菌群(发酵床用)原液”。 将南岳山土著菌群(发酵床用)原液稀释500倍后，与麦麸(或米糠)混拌，再加入稀释500倍的营养剂，调整水分达65%左右，在室温下发酵扩繁(当物料内温度达到50～60 ℃时，翻堆1次)。5～7 d后分别形成了南岳山土著菌群(发酵床用)原种粉，干燥后保存。

1.2.2 南岳土著菌粉(饲料发酵用) 取上述南岳山土著菌原液进行100倍的无菌稀释，将稀释液接种到乳酸马铃薯葡萄糖培养液获得酵母菌的培养液，然后在固体培养基(马铃薯葡萄糖琼脂培养基)上用划线法分离，挑取单个酵母菌菌落再次划线分离纯化，镜检后接种到乳酸马铃薯葡萄糖培养液，最终获得纯南岳山土著酵母菌培养液(A液)。

取南岳山土著菌原液进行100倍的无菌稀释后，在80 ℃的水浴处理1 h以杀死微生物营养体，残留芽胞，在牛肉汤蛋白胨培养基平板上培养，均匀涂布，于37 ℃恒温培养1～2 d。然后在分离的平板上分别挑取单个菌落中部分菌体，在牛肉膏蛋白胨培养基上划线纯化，经菌落特征的观察和镜检，确定是芽孢杆菌属纯种后，置于普通肉汤培养基中37 ℃培养1～2 d后备用，即南岳山土著枯草芽孢杆菌原液(B液)。

将上述A液、B液和生鱼氨基酸营养剂按1∶1∶2比例混合拌匀、装坛密封，温度控制在18～22 ℃，5～7 d后取出，用四层纱布过滤，滤液即“南岳山土著菌群(饲料用)原液”。 原液稀释500倍后，与麦麸(或米糠)混拌，再加入稀释500倍的生鱼氨基酸营养剂，调整水分达65%左右，在室温下发酵扩繁(当物料内温度达到50～60 ℃时，翻堆1次)。5～7 d后即形成了南岳山土著菌粉(饲料发酵用)，干燥后保存。使用时按上述方法继续扩大菌种，直至达到所需要的菌种数量时为止。 本次试验材料所用的菌种，每g干物质含有益菌36.3×108以上(用血细胞计数器测定法)。

1.2.3 生鱼氨基酸营养剂的制作 将鱼头、骨头、内脏等与等量红糖混匀装入坛中密封，温度控制在15～25 ℃, 2～3 d后开始形成液体，10 d左右可完熟，用纱布过滤提取液体即可(即生鱼氨基酸营养剂)。用时作500倍的稀释，现配现用。

1.3 饲养管理

1.3.1 试验用饲料 试验组与对照组日粮均参照“中国猪饲养标准”(98版)的标准配制全价饲料，结合猪场实际条件设计为玉米63%、豆粕12.3%、麸皮17.3%、稻谷粉3%、骨粉3.1%、食盐0.3%、预混料1%；营养水平为消化能12．83 MJ/kg，粗蛋白13.61%。取上述自配的全价饲料1 000 kg，南岳山土著菌粉(饲料用)20 kg，温水30～40 kg(加入红糖5 kg)。先将土著菌粉与加入红糖的温水混合均匀，抛洒在饲料的表面上，然后搅伴均匀。用温水调整饲料的干湿度，以用手能捏成团，手一松能散开为宜。然后将混合均匀的饲料装入密闭的容器中，让其进行厌气发酵。发酵3～5 d，发酵温度达到26～30 ℃为宜。发酵好的饲料，有浓郁的酒曲香与甜酸味即可。

1.3.2 试验发酵床垫料配比 锯末屑30%、秸秆40%、稻谷壳20%、粪便10%、南岳山土著菌群(发酵床用)原种粉0.2%、水60%～70%(水分合适与否判断：用手抓紧垫料。松开后抖动即撒．指缝间有水但未流出为宜)。

1.3.3 饲养方法 对照组用自配的全价饲料，试验组采用上述南岳山土著菌发酵饲料。各组均注射猪瘟、猪蓝耳、猪伪狂犬疫苗防疫，按常规方法饲养，均采用自动饮水，预饲期9 d进行驱虫、健胃、预防注射。然后随机分组进入正饲期90 d，2次/d次自由采食。每3～5 d对试验组猪舍喷洒南岳山土著菌500倍的稀释液。

1.4 试验方法

1.4.1 舍内氨气与硫化氢气体含量检测方法 用北京日捷仪器仪表设备公司生产的便携式复合气体检测仪，型号RJM/(H2S/NH3)。在试验开始前1 d、试验后30 d、后90 d，在测试日期的14∶00规定时间，在舍内离地0.2 m的同一高度层中进行检测。分别对试验猪舍与对照猪舍的氨气含量、硫化氢含量进行检测。

1.4.2 驱蝇效果检测方法 在试验开始前1 d、试验后30 d、90 d分别在试验猪舍和对照猪舍内任选3个点，每一个点为1 m2，使用“金牌枪手杀虫气雾剂”(山东，生产批号20110618)，将苍蝇杀死后计数统计。

1.4.3 增重效果及饲料报酬计算 每天对试验猪和对照猪所投喂饲料的实际消耗进行记录, 计算各组总消耗饲料量与头均耗料量；试验各组猪在试验开始日、结束日早晨饲喂前空腹称重并逐头记录,计算各组总增重与头均增重。最后分别计算各组猪的料肉比、日增重等指标。

1.4.4 肠道疾病防治效果试验 在试验期对每组猪的药物开支逐头记录，分别计算各组猪的肠道疾病的发病率(以腹泻拉痢为判断依据)、药物费用等指标。

1.5 数据处理

所有的数据均采用SPSS11.5统计软件进行数据统计分析，结果采用“平均数±标准差”表示。

2 结果与分析

2.1 采食情况及营养状态观察

试验组的猪采食较快，发酵饲料适口性好。对照组采食无明显变化。试验组较对照组猪皮肤红

润，毛皮光亮，显示状态良好，与对照组感观明显。

2.2 增重效果及饲料报酬

表1表明，试验组较对照组头均日增重显著提高12.7%(P<0.05)、饲料报酬率显著提高3.5%(P<0.05)。

2.3 试验猪舍与对照舍的NH3和H2S气体含量对比

由表2可知，试验开始前1天各组两气体含量均差异不显著(P>0.05)，试验90 d试验组较对照组猪舍NH3和H2S气体含量均极显著降低68.1%(P<0.01)和54.7%(P<0.01)。

表1 南岳山土著菌对猪增重效果及饲料报酬率的影响Table 1 The effect of Nanyue Mountain indigenous bacteria to weight gain and feed rate of return for pigs

注：同列肩标不同大写字母表示差异极显著(P<0.01)，肩标不同小写字母表示差异显著(P<0.05)。下同。

Note:In the same column,values with diflerent capital letter superscripts mean extreme difference(P<0.01),while those with different small lowercase superscripts differe significamtly(P<0.05).The same below.

表2 南岳山土著菌对降低猪舍内NH3和H2S气体的影响Table 2 The effect of Nanyue Mountain indigenous flora to NH3 and H2S gas of pig(mg/m3)

2.4 驱蝇效果

由表3知，试验开始前1 d各组苍蝇数差异不显著(P>0.05)、试验30 d两组滋生苍蝇数差异显著(P<0.05)、90 d后试验组较对照组苍蝇数极显著减少88.9% (P<0.01)。

2.5 肠道疾病防治效果

试验期内各组猪的肠道疾病的发病率(以腹泻拉痢为判断依据)、治疗肠道疾病的药物费用情况详见表4。由表4知，试验组头较对照组肠道疾病发病率降低25%，防治肠道疾病的药物费用平均降低1.84元/头。

表3 南岳山土著菌对猪舍除臭效果的影响Table 3 The effect of Nanyue Mountain indigenous bacteria deodorizing effect on pig 只/m2

注：以苍蝇滋生数量为例。

Note:Take the number of fly breeding as an example.

3 讨 论

3.1 南岳山土著菌群对猪群生长性能的影响

本研究表明，发酵床养猪可提高饲料转化率，降低料重比，提高猪的生长性能，与郭彤等[4]报道一致。段淇斌等[5]研究发现，杜长大三元商品育肥猪在发酵床上饲养，与常规饲养模式比较，头均日增重提高12.46%，饲料节省5.75%，赵汉硅[6]发现育肥猪养到105 kg体重时，常规饲养需要330 kg饲料，而发酵床养猪仅需230～270 kg，生长育肥期缩短10～15 d。原因如下：第一，猪有拱食特性，在发酵床上饲养，能自由采食发酵床中微生物菌体蛋白，从而改善猪消化系统生理代谢状态，提高饲料利用率。第二，在秋冬季可减少维持体温所需的能量消耗，发酵床温度一般维持在20～25 ℃,相对10 ℃水泥地板而言，生产净能增加，生产性能得以提高。

表4 南岳山土著菌对防治猪肠道腹泻效果的观察Table 4 The effect of Nanyue Mountain indigenous bacteria on prevention and treatment of swine intestinal diarrhea

注：+表示轻度腹泻；++表示中度腹泻。

Note：“+”Mild diarrhea；“++” Moderate diarrhea

3.2 南岳山土著菌对猪舍环境的影响

在试验组猪舍内人的感觉明显，无臭，无刺激气味，少蚊蝇，符合国家无公害产地环境标准。适合猪的自然生活习性，满足了猪的自然行为需要，福利状况明显改观。众多研究表明，发酵床与水泥地面猪舍相比，舍内悬浮颗粒浓度及氨气浓度极显著低于水泥地面猪舍[2,7-8]。同时，南岳山土著菌发酵饲料比常规饲料更易消化，进入消化道后饲料中的蛋白质等营养物质分解消化完全，粪便臭味明显减轻，加之发酵床中含有大量有益土著菌群能使粪便迅速降解，从而使试验猪舍臭气和刺激味气体大为减少，也大大减少了苍蝇滋生。这与段淇斌等[9]研究结果相似。在冬季应特别注意舍内通风在冬季试验组猪舍内虽无明显臭味，但发现试验组猪精神状态不是很好，可能与垫料的发酵分解有关，发酵分解使得其CO2产生量明显高于常规地面猪舍，舍内通风不良会造成CO2浓度升高，这有相关研究结果证实[9,15]，高浓度的CO2可能导致机体缺氧[16]，而影响机体的精神状态。

3.3 南岳山土著菌对猪抗病能力的影响

试验组猪生长均匀度好、体质健壮、肠道发病率很低。由于在饲料中加入有益的优势菌种可抑制有害微生物的繁殖，有利于保持猪肠道健康，猪消化道疾病明显降低[4]；发酵床养殖方式还可提高猪体内血清IgA、IgG含量[2]，不同垫料发酵床对猪的免疫功能及生长性能的影响研究发现，试验组的抗体阳性率显著高于对照组，土著菌发酵床饲养能提高猪体的免疫力[7]。由于发酵床中优势芽孢杆菌大部分对常用抗生素敏感，并且由于其抑菌作用和免用抗生素，可以显著降低发酵床上饲养猪的肠道抗药性及药物残留[10]。

总之南岳山土著菌生态养猪具有一定的经济效益、生态效益与社会效益，该项技术特别适宜在我国南方城郊地区中小型猪场大力推广。

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