股骨头坏死愈胶囊对兔激素性股骨头坏死血流变学影响的实验研究＊

段卫峰 高书图 刘又文 杜志军 穆世民 郭绍勇 河南省洛阳正骨医院 （洛阳471002）

随着激素的广泛应用、滥用，长期使用或间断大量使用激素引起的骨缺血性坏死已逐渐为人们所重视。激素性股骨头缺血性坏死（Steroid－induced Aavascular necrosis of Femoral Head，简称SANFH）的发病率逐渐上升，已成为骨科临床上的多发病、常见病。本病早期发现较难，晚期患者致残率较高，病程长，且发病率有逐年增高的趋势，严重影响了患者的生活质量和劳动能力，越来越受到医学界的重视［1］。由于对其病理机制并不十分清楚，现代医学的多种治疗方法均不能令人满意［2－3］。

随着现代中药研究的进展，中药在该病的认识和治疗上展现出其独特的优势［4］。本实验通过观察股骨头坏死愈胶囊对兔激素性股骨头坏死血液流变学的影响，判定其疗效及探讨其治疗SANFH的作用机制，为该药的临床应用提供科学依据。

1 实验材料 1.1 实验动物 健康大白兔38只，雌雄各半，体重为（2.5±0.4）kg，购于河南省实验动物中心，检疫合格备用。所有动物单笼饲养，自由饮水进食，普通条形饲料喂养；选择光线充足，通风良好的实验环境。全部动物均在同等环境和条件下单笼喂养。

1.2 实验试剂及药物 大肠杆菌内毒素，醋酸泼尼松龙（5mL：125mg），青霉素钠针（80万u／支）。

2 实验方法 2.1 动物分组及造模 健康大白兔38只，随机取8只为正常组，参照章建华等［5］和童培建［6］的造模方法进行造模。腹腔内注射大肠杆菌内毒素100μg／kg，1次／d，连续2次。在第2次注射大肠杆菌内毒素后，臀肌注射醋酸强的松龙50mg／kg，1次／d，连续6d。为预防感染，所有造模动物在注射激素后予腹腔注射注青霉素钠针剂4×104U，1次／d。造模5周后，随机取正常组2只、造模组2只影像检查，然后处死取材，做组织病理学光镜观察，证实造模成功（图1～4）。

然后将造模动物随机分为四组，实验共分五组，即正常组、模型组、通络生骨胶囊组、股骨头坏死愈胶囊低剂量组、股骨头坏死愈胶囊高剂量组。

2.2 动物给药与喂养 造模成功后，正常组及模型组每日清晨灌服生理盐水10mL；通络生骨胶囊每粒含生药0.5g，将其干粉溶解于0.5%羧甲基纤维素钠（cmc－Na）中，调制为混悬液，浓度为含生药0.42g／mL，通络生骨胶囊组每只家兔每次抽取2mL灌胃。股骨头坏死愈胶囊含每粒含生药0.3g，将其干粉溶解于0.5%羧甲基纤维素钠（cmc－Na）中，调制为混悬液，浓度为含生药0.32g／mL，低剂量组每只家兔每次抽取2mL灌胃，高剂量组每次抽取4mL灌胃。（根据章氏［7］动物和人剂量折算办法得出本次实验动物正常剂量为人用量的3.27倍，本实验以动物的正常剂量为低剂量，以低剂量的两倍做为高剂量）。

2.3 观测指标及方法 所有实验动物首次给药后第4、6、8周，空腹快速心脏取血，置于含10%ETDANa 0.2mL和抑肤酶40uL的试管中离心、分离血浆，保存待检，用药治疗8周后，采用空气栓塞法处死动物，在无菌条件下取出双侧股骨头，行病理学检查。

2.4 统计学方法 以上各项检测指标均运用均数±标准差（±s）表示，将所有数据输入计算机，用SPSS 13.0For Windows软件进行统计学分析。采用t检验分析。

3 实验结果 3.1 组织病理学观察结果 正常组：股骨头软骨层次正常，软骨细胞正常，骨小梁粗大、密集，排列整齐。髓腔内造血细胞丰富，软骨下血管较丰富，可见少量脂肪细胞，无融合现象（图5）。模型组：股骨头软骨下层次紊乱，骨小梁稀疏、变细、不完整，数量减少，骨细胞空骨陷窝多见。髓腔内脂肪空泡变明显，体积增大，有的融合呈泡状，骨板骨细胞数相对减少（图6～7）。高剂量组：股骨头软骨下层次基本正常，骨小梁较模型组变粗，数量增加，结构基本清晰。骨细胞核清晰可见，空骨陷窝较模型组明显减少。髓腔内造血细胞丰富，脂肪细胞轻度肥大，无明显大的脂肪滴，无融合现象（图8）。低剂量组：股骨头软骨下层次较模型组好转，骨小梁有些断裂，其内正常骨细胞与坏死骨细胞混杂，空骨陷窝较模型组减少。髓腔内脂肪空泡较模型组减少，多核破骨细胞数量较模型组明显减少，软骨下小血管数量、造血细胞数量较模型组增多（图9）。通络生骨胶囊组：股骨头软骨下层次与高剂量组基本相同，骨小梁变粗，数量增加。骨小梁中可见大量正常骨细胞，少量坏死骨细胞，空骨陷窝明显减少。骨髓内见大量造血细胞，脂肪细胞轻度肥大，无融合现象（图10）。

3.2 血流变学测定结果

表1 造模4周后血液流变学指标比较（±s）

表1 造模4周后血液流变学指标比较（±s）

组别 n全血粘度高切 中切 低切血浆粘度 红细胞聚集指数正常值 6 1.91±0.16 2.69±0.25 8.50±0.29 1.08±0.28 3.68±0.35模型组 6 3.50±0.34 5.11±0.33 13.79±0.56 2.68±0.21 5.20±0.55低剂量组 6 2.49±0.15 4.70±0.29 11.12±1.03 1.74±0.62 5.10±0.49高剂量组 6 1.95±0.32 3.12±0.22 9.32±1.12 1.34±0.21 3.82±0.46通络生骨胶囊组 6 1.85±0.69 3.06±0.19 9.21±0.87 1.25±0.26 3.65±0.30

表2 造模6周后血液流变学指标比较（x¯±s）

表3 造模8周后血液流变学指标比较（±s）

表3 造模8周后血液流变学指标比较（±s）

组别 n全血粘度高切 中切 低切血浆粘度 红细胞聚集指数正常值 6 1.94±0.11 2.78±0.33 8.60±0.54 1.16±0.29 3.73±0.59模型组 6 3.77±0.39 5.43±0.67 14.23±1.31 2.70±0.25 5.40±0.41低剂量组 6 2.39±0.17 4.46±0.28 10.25±1.23 1.70±0.67 4.82±0.22高剂量组 6 1.76±0.16 3.16±0.43 9.37±1.09 1.19±0.41 3.67±0.55通络生骨胶囊组 6 1.68±0.49 3.01±0.31 9.25±1.11 1.07±0.33 3.54±0.30

由此可知，正常组与模型组、低剂量组4、6、8周血流变结果比较，全血高切、中切、低切粘度、血浆粘度、红细胞聚集指数等均有极显著性差异（P＜0.01），与高剂量组、通络生骨胶囊组比较无显著性差异（P＞0.05），而低剂量组与高低剂量组、通络生骨胶囊组之间比较有显著性差异（P＜0.05）。高剂量组与通络生骨胶囊组比较无显著性差异（P＞0.05）。

4 讨 论 非创伤性股骨头缺血性坏死的病因主要有以下几种假说，如血管内凝血学说、脂肪栓塞学说、骨内高压及静脉淤滞学说、微血管损伤学说、骨质疏松学说等，原因都是机械性原因、血栓栓塞和血管外压迫等阻断了血管的血流，导致股骨头缺血，最后出现骨细胞的坏死［8］。1985年Jones［9］等首先提出了血管内凝血学说，并把它作为非创伤性骨坏死发病过程中的一个中间环节。短期内大剂量激素可以引起血液流变学明显异常，表现全血粘度、血浆粘度及细胞聚集性明显增高，血液呈高粘滞状态。而血栓形成需具备3个条件：①血流缓慢；②血液凝固性高；③血管内皮细胞受损。郑召民等［5］经实验发现激素助长了高凝和纤溶下降状态，高凝和纤溶下降在激素导致的骨坏死中起重要作用，二者常引起血管内凝血，形成内血栓，引起骨缺血乃至骨坏死。组织学显示骨内血栓存在的可能性，进一步证明血液高凝状态，纤溶活性下降可引起的局部血管内凝血是非创性骨坏死发生的重要病理机制。

总结从古到今众多医家的学术观点及研究进展，笔者认为本病主要由于肝肾不足，风寒湿邪乘虚侵入或气血不足，不能温煦、濡养筋骨，或气血凝滞，不通则痛等而致本病。本病之病因、病机皆因“瘀”，瘀而致痹，气血瘀阻不通，不通则痛。在治疗用药上均不离活血，又因其早、中、晚期各期病有所不同，治之也有所侧重。早期重在活血行气，中期则宜补肝肾而兼活血，晚期在补气血同时不忘活血［10］。三期用药宜治其本，使血行去除死骨而新骨生，“去瘀而生新”之理。股骨头坏死愈胶囊由鹿茸、杜仲、续断、黄芪、丹参、鸡血藤、玄参、连翘、水蛭（制）、乳香（制）、没药（制）等药物组成，具有补益肝肾、活血化瘀的作用。方中重用鹿茸取其甘咸温，温肾壮阳，丹参活血化瘀，二者共为君药。续断甘温，归肝肾经，补肝肾、强筋骨、行血脉，杜仲甘温补肝肾、强筋骨，二者合用助鹿茸补肾壮骨兼活血；黄芪甘温益气行血，鸡血藤甘温，行血补血，水蛭功能化瘀血而不伤新血，四药共为臣药。玄参、连翘合用清外来热邪或瘀久所生邪热，乳香没药加强活血之功，诸药合用使瘀祛而痛止，脉通而骨养，故收良效。本方配伍特点有二：①方中温清补消并用，标本兼治；②大队温补药与少量寒凉药相配，能使全方温而不燥，刚柔相济，以成温通、温养之剂。

本实验中，模型组家兔全血粘度、血浆粘度、红细胞聚集指数显著升高（P＜0.01），揭示血液流变学异常是激素性股骨头坏死的主要发病机制之一。治疗组其血流变指标均较模型组显著降低（P＜0.01），且高剂量组与通络生骨胶囊组比较无显著性差异（P＞0.05）。说明股骨头坏死愈胶囊可明显降低全血粘度、血浆粘度，调节激素后脂肪在体内的转移过程，减少血管壁的受损和减少动脉硬化、抗血栓，降低外周血管阻力，增加血流速度、血流量，能改善微循环，保证组织的有效灌注，给骨细胞代谢提供良好环境，使脂质代谢紊乱及其代谢产物及时得到输送，营养物质及时得到供给。从而使股骨头血液供应有所改善，骨坏死程度减弱，骨修复程度加强，能够促进血管生成，死骨的吸收及新骨的生成，为其能够治疗激素引起的股骨头坏死提供了初步理论依据。

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