注射用甲磺酸培氟沙星制备工艺

卢 苇 邹意琼

（西南药业股份有限公司，中国 重庆 400038）

甲磺酸培氟沙星是一种新型喹诺酮类药物，对肠杆菌科的大部分细菌有良好的抗菌活性，对β－内酰胺酶阳性或阴性的流感嗜血菌和黏膜炎莫拉氏菌及一些非典型病原体也均具有较强的杀伤作用。该药可直接作用于细菌DNA螺旋酶的A亚单位，通过抑制DNA的合成、复制导致其死亡。甲磺酸培氟沙星是一种新型喹诺酮类药物，对肠杆菌科的大部分细菌有良好的抗菌活性，对β－内酰胺酶阳性或阴性的流感嗜血菌和黏膜炎莫拉氏菌及一些非典型病原体也均具有较强的杀伤作用。该药可直接作用于细菌DNA螺旋酶的A亚单位，通过抑制DNA的合成、复制导致其死亡[1-2]。主要用于敏感菌所致的尿路感染，呼吸道感染，耳、鼻、喉感染，妇科、生殖系统感染，腹部和肝、胆系统感染，骨和关节感染等[3-4]。

本文研制注射用甲磺酸培氟沙星，通过正交设计试验，对其处方进行筛选，并对优化处方进行了考察。

1 试验材料

1.1 药品与试剂

甲磺酸培氟沙星对照品（由中国药品生物制品检定所提供）；注射用甲磺酸培氟沙星（自制）；甲磺酸培氟沙星（湖北省人福药业有限责任公司）；甘露醇（山东天力制药有限公司）；焦亚硫酸钠（湖南尔康制药有限公司）；针用活性炭（上海活性炭厂）；醋酸铵（天津市科密欧化学试剂有限公司）；甲醇（阿达玛斯公司）。

1.2 仪器

高效液相色谱仪（安揭伦科技公司）、pH计（上海雷磁仪器厂）、紫外分光光度计（安揭伦科技公司）、不溶性微粒检测仪（北京东方森联自动化技术有限公司）、澄明度检测仪（天津大学精密仪器厂）和电子天平（梅特勒公司）。

2 方法与结果

2.1 注射用甲磺酸培氟沙星的制备

在配制锅中加入配置总量80%的注射用水，将甘露醇和抗氧剂溶解后，再加入甲磺酸培氟沙星搅拌溶解，最后加入活性炭，用氢氧化钠溶液调pH，最后将药液稀释至总量。经灌装，上半塞、冷冻干燥后得注射用甲磺酸培氟沙星成品。

2.2 甲磺酸培氟沙星的含量测定试验

2.2.1 对照品溶液制备

精密称取在105C°干燥至恒重的甲磺酸培氟沙星对照品适量，用流动相溶解并制成每1ml中含20μg的溶液，作为对照品溶液。

2.2.2 样品溶液的制备

精密量取本品适量，用流动相溶解并稀释成每1ml含培氟沙星15μg的溶液，作为供试品溶液。

2.2.3 色谱条件与系统适应性试验

用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；0.2mol/L醋酸铵－甲醇（72：28，用磷酸调pH值至3.0）为流动相，流速为每分钟1ml，检测波长为276nm，理论板数按培氟沙星峰计算应不低于2000。

2.2.4 空白辅料的检测

取本品约12mg（相当于培氟沙星7.5mg）和空白辅料3mg，分别用流动相溶解成50ml，各取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，结果空白辅料不出色谱峰，即空白辅料不干扰主药甲磺酸培氟沙星的测定

2.2.5 线性关系

取在105℃烘至恒重的甲磺酸培氟沙星对照品适量，精密称定，用流动相溶解并制成每1ml含1mg的溶液，作为贮备液。精密量取贮备液 10ml，用流动相稀释成 100ml（溶液Ⅰ），另吸取贮备液 1.4、1.6、1.8、2.0、2.2、2.5ml，分置 10ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀；另精密量溶液Ⅰ1、1.6、1.8、2.0、2.2、2.4、3.4、5.0 和 8.0ml， 分置 10ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，分别进样测定，记录峰面积，测定结果见表1。

表1 线性范围测定结果

对表中数据进行回归分析， 得线性方程为 A=1.08×108C＋2.20×104，r=0.9999，即浓度在 0.01mg/ml～0.25mg/ml范围内，响应值峰面积与浓度呈良好线性关系

2.2.6 重复性试验

取同一批样品，连续进样6次，按照含量测定方法测定，记录色谱图，计算响应值峰面积的相对标准偏差，从测定结果可知，方法重复性良好。测定结果见表2。

表2 重复性试验数据

2.2.7 精密度试验

取一批样品6份，按含量测定方法测定，从测定结果可知，测定方法的精密度符合要求。其结果见表3。

表3 精密度试验结果

2.2.8 稳定性试验

取含量测定项下的供试品溶液，分别在0小时、1小时、2小时、3小时、4小时、5小时和6小时测定7次，记录峰面积，测定结果表明供试品溶液在流动相溶液中6小时内较稳定。结果见表4。

表4 稳定性试验数据

2.2.9 回收率试验

按处方量的80%、90%和120%进行回收试验，取对照品约16mg、20mg和24mg，精密称定，置100ml量瓶中，分别加入空白辅料6mg，加流动相溶解并稀释至刻度，再吸取该溶液1.0ml，置10ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，分别取20μl注入液相色谱仪记录色谱，按外标法以峰面积计算，结果见表5。

表5 回收率实验结果表

测定结果表明，方法的平均回收率为99.97%，相对标准偏差为0.47%，能满足含量测定要求

2.2.10 甲磺酸培氟沙星含量测定法

精密量取本品适量，用流动相溶解并稀释成每1ml含培氟沙星15μg的溶液，作为供试品溶液。另精密称取在105C°干燥至恒重的甲磺酸培氟沙星对照品适量，用流动相溶解并制成每1ml中含20μg的溶液，作为对照品溶液。取供试品溶液和对照品溶液各20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得。

2.3 注射用甲磺酸培氟沙星制备工艺的考察

2.3.1 质量指标

①性状:白色块状物。②pH测定：参照《中国药典》2010版二部附录ⅥH pH测定法，pH范围3.5-4.5。③水分：参照水分测定法（中国药典2010年版二部附录ⅧM第一法）测定，水分不得过1.0%。④有关物质测定：有关物质用高效液相法测定，应不超过1.0%。⑤含量测定：甲磺酸培氟沙星含量用高效液相法测定，甲磺酸培氟沙星含量应在90%～110%范围内。

2.3.2 正交试验结果

根据以上实验设计方案，对注射用甲磺酸培氟沙星工艺影响较大的几个方面如赋形剂、活性炭的量和抗氧剂进行正交设计试验，以筛选最佳处方，如表6。结果见表7。

表6 因素水平表

表7 正交试验结果分析表

由表6可知，对注射用甲磺酸培氟沙星含量的影响因素C>B>A，并得知最佳方案为A3B1C3。

2.4 注射用甲磺酸培氟沙星质量检测

按照A3B1C3方案在公司冻干粉针剂车间中试放大三批注射用甲磺酸培氟沙星，药液经过 0.45μm和0.22μm过滤，灌封后经上半塞，冷冻干燥，全上塞和轧盖后得样品，样品经过质量检测，结果见表8。

表8 三批样品试验结果表

三批中试放大样品经过质量检测，各项指标均符合质量标准，表明采用A3B1C3方案制备的注射用甲磺酸培氟沙星结果较好。

3 讨论

3.1 由于甲磺酸培氟沙星的水溶液冻干后的成型性较差，为了使制剂易于冻干和成型并能保持较好的外型和机械强度，选择合适的赋形剂很重要。常用的赋形剂有乳糖、葡萄糖、甘露醇、水解明胶、甘氨酸、右旋糖苷等。但是乳糖、葡萄糖、水解明胶、甘氨酸、右旋糖苷等有一定的吸湿性。甘露醇为常用的冻干制剂辅料，本品无吸湿性，干燥快，化学稳定性好，易溶于水。因此直接选用甘露醇作为赋形剂，通过对加入不同量的甘露醇考察其成型效果，当甘露醇的用量为每瓶0.1g时，制剂的成型性﹑溶解性和机械强度都较好，因此，选择甘露醇用量为0.1g/瓶。

3.2 活性炭有吸附杂质、去除热原等作用，注射剂中需加入活性炭，其用量通常为0.01%-0.5%。但活性炭同时对主药有吸附作用。为了保证主药含量的准确性，进行了不同浓度活性炭对主药吸附的考察，以确定活性炭的用量。从实验结果表明，活性炭的用量为0.05%，对主药含量影响最小。

3.3 抗氧剂的选择：甲磺酸培氟沙星属于第三代氟喹诺酮类抗菌剂，从甲磺酸培氟沙星结构可知，该药对光不稳定，尤其在有铁、镁等金属离子存在时，更加速降解。因此，在生产过程中需要加入抗氧剂，试验表明同时加入亚硫酸氢钠和依地酸钙钠两种抗氧剂效果最好。

［1］张明明，贾晓梅，谢霞，等.甲磺酸培氟沙星治疗手术后下呼吸道感染老年患者的疗效观察[J].现代中西医结合杂志，2012，21（26）：2903-2904.

［2］孙立伟.甲磺酸培氟沙星治疗泌尿系统感染临床效果观察[J].中国当代医药，2012,19（11）:58-59.

［3］王明乐，刘俊芳.甲磺酸培氟沙星注射液稳定性及有效期预测[J].中国当代医药，2009,12（4）:50-51.

［4］高志恒.甲磺酸培氟沙星注射液治疗40例急性呼吸道感染的临床观察[J].中国现代药物应用，2008，2(8):41-42.