高效液相色谱法测定盐酸沙格雷酯缓释片中盐酸沙格雷酯的含量*

2013-10-23董杰

天津药学 2013年6期

董杰

(天津田边制药有限公司，天津 300385)

盐酸沙格雷酯缓释片为5－HT2受体拮抗剂，临床上主要用于改善慢性动脉闭塞症所引起的溃疡、疼痛以及冷感等缺血性诸症状的治疗。本实验采用高效液相色谱法测定盐酸沙格雷酯缓释片中盐酸沙格雷酯的含量，取得了满意结果。

1 仪器和试药

LC－6A高效液相色谱仪(日本岛津)，SPD－6AV紫外检测器，N－2000型色谱工作站。盐酸沙格雷酯对照品(天津田边制药有限公司提供，纯度99.0%，批号SAR0201)。盐酸沙格雷酯缓释片(自制，批号130711、130712、130713)。乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件色谱柱:Phenomenex C18柱(4.6 mm ×250 mm，5 μm);流动相:乙腈－水－三氟乙酸(48∶52∶0.1);柱温:40 ℃;检测波长:272 nm;流速:1.0 ml/min;进样量:10 μl。

2.2 溶液配制

2.2.1 对照品溶液精密称取盐酸沙格雷酯对照品约50 mg，置50 ml量瓶中，加乙腈，振摇使之充分溶解后稀释至刻度，摇匀，精密量取5 ml，置50 ml量瓶中，用乙腈－水(1∶1)稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。

2.2.2 供试品溶液取盐酸沙格雷酯缓释片20片，称重，研细，精密称取细粉适量(约相当于含盐酸沙格雷酯100 mg)，置100ml量瓶中，加乙腈超声提取，冷却至室温后加乙腈稀释至刻度，摇匀，滤过，续滤液经离心(1500 r/min，5 min)后，精密量取上清液 5 m l，置 50 ml量瓶中，用乙腈－水(1∶1)稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

2.2.3 空白溶液按处方中各辅料的比例配制成不含盐酸沙格雷酯的空白样品，照“2.2.2”项下方法配制溶液，作为空白溶液。

2.3 方法适用性试验依给定的色谱条件，量取盐酸沙格雷酯对照品溶液、供试品溶液和空白溶液各10 μl，分别进样，记录色谱图，见图1。盐酸沙格雷酯的保留时间约为8 min，与其他组分峰的分离度＞1.5，理论板数为5289;空白辅料对盐酸沙格雷酯峰无干扰。

2.4 线性关系分别取盐酸沙格雷酯对照品适量，照“2.2.1”项下方法配制溶液，制成浓度为 20、50、100、150、200和300 μg/ml对照品溶液，按给定的色谱条件进行测定，记录各浓度的色谱峰面积，以峰面积对溶液浓度求得回归方程为 Y=2.3×104X－3876(r=0.9996)。在 20 ～300 μg/ml范围内，峰面积与浓度呈良好的线性关系。

图1 对照品(A)样品(B)空白样品(C)HPLC色谱图

2.5 精密度试验取浓度为100 μg/ml的对照品溶液，连续进样6次，RSD为0.38%。表明所选定的色谱条件系统稳定。

2.6 重现性试验取同一批样品(批号130711)进行5次测定，平均含量为标示量的 100.1%，RSD为0.35%(n=5)，表明该方法重现性良好。

2.7 回收率试验精密称取盐酸沙格雷酯对照品80、100和120 mg各3份，分别加入处方量的辅料，照“2.2.2”项下方法配制溶液，依给定的色谱条件，取10 μl进样，记录色谱图，测得平均回收率为99.9%，RSD为 0.27(n=9)，结果见表 1。

表1 回收率试验测定结果

2.8 稳定性试验取同一供试品溶液在室温条件下放置，依给定的色谱条件，测定 0、1、2、4、6 和 8 h 时的峰面积，RSD为0.55%(n=6)，表明样品溶液在8 h内稳定。

2.9 样品含量测定取不同批号的盐酸沙格雷酯缓释片各20片，称重，研细，照“2.2.2”项下方法配制溶液，依给定的色谱条件，取10 μl进样，各批分别进样3次，记录色谱图。另精密称取盐酸沙格雷酯对照品约50 mg，置 50 ml量瓶中，照“2.2.1”项下方法配制溶液，依给定的色谱条件，取10 μl进样，记录色谱图。按照外标法以峰面积计算3批样品(批号130711、130712、130713)平均标示量的百分含量(n=3)，结果分别为 100.2%、100.4%和 99.8%。