不同中药组方对高尿酸血症大鼠的影响

严群超，罗淑文，王帅帅

(1.暨南大学 医学院，广州 510632;2.广州蓝韵医药研究有限公司，广州 510663)

高尿酸血症(HUA)是一种嘌呤代谢性疾病，是血液中尿酸浓度超出一定范围的一种机体状态(一般认为血尿酸＞420 μmol/L 即7 μg/mL 时为高尿酸血症)［1］;其临床特点为HUA 以及由此引起的痛风性急性关节炎反复发作、痛风石沉积、痛风石性慢性关节炎和关节畸形，常累及肾脏引起慢性间质性肾炎和尿酸肾结石形成［2］.临床研究发现HUA 与高血压、心血管疾病、代谢综合征以及肾脏疾病关系密切，是这些疾病的危险因素.本实验利用氧嗪酸钾构建大鼠高尿酸血症模型，研究不同中药组方对高尿酸血症大鼠血尿酸及相关代谢指标水平的影响.

1 实验材料

1.1 实验动物

SPF 级SD 大鼠，购自广州中医药大学实验动物中心，动物许可证号为:SCXK(粤)2008－0020.常规饲养，自由饮水.动物房室温20～25 ℃，湿度50%～70%，实验环境设施许可证号:SYXK(粤)2008－0092.

1.2 试剂及仪器

AU5421 全自动生化分析仪(OLYMPUS)、Medisense Optium 血糖仪(美国)、AE－200 型电子分析天平(瑞士)、DT3000 电子天平(常熟市金羊法码仪器有限公司)、氧嗪酸钾(山东济南诚汇双达化工有限公司(进口分装)批号:12042001)、甘油三酯(中生北控生物科技股份有限公司，批号:120581)、总胆固醇(中生北控生物科技股份有限公司，批号110841)、尿素(上海科华生物工程股份有限公司，批号:20120312)、尿酸(上海科华生物工程股份有限公司，批号:20120432)、肌酐(日本积水医疗株式会社，批号:802RLI).

2 实验方法

2.1 受试药物

1)受试样品

A(土茯苓、车前子、益母草、薏苡仁、泽泻)、B(土茯苓、车前草、益母草、菊苣、薏苡仁、泽泻)、C(土茯苓、车前草、菊苣、薏苡仁、泽泻、葛根)、D(茯苓、菊苣、薏苡仁、葛根、决明子、山楂)共4种，药材加水煎煮2 次，第1 次加12 倍水，煮1.5 h;第2次加10 倍水，煮1 h.合并2 次滤液，分别浓缩至生药材质量浓度A:0.8 g/mL、B:0.5 g/mL、C:0.34 g/mL、D:0.24 g/mL.人服用剂量均为50 mL/d.

2)阳性对照药

别嘌醇片，广东彼迪药业有限公司，批号:20111101.

3)生理盐水

四川科伦药业股份有限公司，批号:T1008021.

2.2 分组及给药

1)分组

SD 雄性大鼠100 只，随机分10 组，每组10只.受试药(不同中药组方A、B、C、D)分别设高(15 mL/(kg·d)、低(5 mL/(kg·d))剂量组，模型对照组、阳性对照组.

2)给药

每组大鼠每天上午灌胃给予氧嗪酸钾1.5 g/(kg·d)，给予3 d 后，开始每天上午灌胃给予氧嗪酸钾、下午分别给予各组样品［3－4］，模型对照组给予等体积生理盐水，阳性对照组给予别嘌醇56 mg/(kg·d)，共给药30 d［5－8］.

3)检测指标

给药27 d 后测定部分大鼠血清尿酸，以确定造模成功与否及样品是否有疗效.给药后观察大鼠一般状况，每周称量大鼠体重，根据体重调整给药量(15 mL/kg).给药30 d 后，空腹取血测定血糖(GLU)、总胆固醇(CHOL)、甘油三酯(TG)、尿素(UREA)、肌酐(CREA)、尿酸(UA)浓度.大鼠称重，取肾并称重，计算肾脏指数(肾脏指数(g/100 gbw)=肾脏质量(g)/体重(g)×100).

2.3 统计处理

3 实验结果

3.1 一般状况

给药后，各组大鼠外观观察未见异常，正常活动，饮水、进食正常，毛发顺滑有光泽，眼未见分泌物，其他未见明显异常.各组大鼠在给药的初期，存在粪便变软的现象，分析与给予造模剂氧嗪酸钾有关，可能氧嗪酸钾影响动物的消化系统，实验中后期情况好转.不同组的动物粪便和尿液颜色不同，药物颜色深的组别，粪便和尿液颜色也深，粪便和尿液颜色与药物颜色有关，并非异常.给药30 d 后各组大鼠体重正常增加，结果见表1.

3.2 相关代谢指标

1)给药27 d和给药30 d 后各组样品对高尿酸血症模型大鼠血清UA 的影响

给药27 d 时取部分动物血清测量大鼠UA，与模型组相比，各组动物UA 浓度均有降低(P ＜0.05，P ＜0.01);给药30 d 后，A、B、C 各样品高、低剂量组UA 浓度均有降低(P ＜0.05，P ＜0.001)，D 高、低剂量样品组对大鼠血清UA 浓度只有降低趋势，未达到统计学意义，给药27 d和给药30 d 后样品降低尿酸的趋势是一致的.阳性组无论是给药27 d 还是给药30 d 后，均能降低UA 浓度，与模型对照组比较有显著性差异(P ＜0.01，P ＜0.001)，结果见表2.

表1 给药30 d 后各组大鼠体重变化(n=10)

表2 给药27 d、30 d 后各组样品对大鼠血清UA 的影响(n=10)

2)给药30 d 后各组样品对高尿酸血症模型大鼠血清UREA、CREA 的影响

与模型组相比，各组样品对大鼠血清UREA和CREA 的浓度影响不大，结果见表3.

表3 各组样品对大鼠血清UREA、CREA 的影响(n=10)

3)给药30 d 后各组样品对高尿酸血症模型大鼠血清CHOL、TG 的影响

与模型组相比，各组样品对大鼠血清CHOL和TG 的浓度影响不大，结果见表4.

表4 各组样品对大鼠血清CHOL、TG 的影响(n=10)

4)给药30 d 后各组样品对高尿酸血症模型大鼠GLU、肾脏指数的影响

与模型组相比，各组样品对模型大鼠GLU 影响不大;A、B、C 各样品高剂量组能降低模型大鼠肾脏指数，与模型对照组比较有显著性差异(P ＜0.05)，结果见表5.

表5 各组样品对大鼠血清GLU、肾脏指数的影响(n=10)

4 讨论

动物模型是研制新型治疗药物的重要工具，目前高尿酸血症动物模型的造模剂主要分为3种:促进尿酸生成，如腺嘌呤、黄嘌呤、尿酸、酵母等;抑制尿酸排泄，如吡嗪酰胺、乙胺丁醇等;以及尿酸酶抑制剂，如氧嗪酸盐［9］.本实验采用氧嗪酸钾构建大鼠高尿酸血症模型，氧嗪酸钾能有效抑制尿酸的分解，从而使尿酸在大鼠体内大量积聚.

近年来，国内外流行病学研究显示HUA 发病率呈逐年上升趋势［10］.目前，西药治疗高尿酸血症主要分为抑制尿酸生成和促进尿酸排泄两类，前者主要是别嘌呤醇，后者多用苯溴马龙，但是这些药物毒副作用大，长期治疗将对患者机体造成较大的伤害，而且停药后易反复.中药具有毒副作用小、多靶点、多层面治疗的特点.本实验结果表明，A、B、C、D 组样品给药27 d 后均能降低高尿酸血症大鼠血尿酸水平;给药30 d 后A、B、C 组样品能降低高尿酸血症大鼠血尿酸水平，而D 组样品(高、低剂量组)与模型组比较，没有显著性差异，可能是由于动物出现耐受作用;A、B、C 高剂量样品组均降低高尿酸血症模型大鼠的肾脏指数，说明A、B、C各样品有一定的抗炎消肿作用.

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