对清胃黄连片薄层色谱法的改进

北京市门头沟区药品检验所（102300）王莉莉 徐黎颖 张帅国 翟阳

清胃黄连片是由黄芩、黄连、黄柏、栀子、石膏、知母等14味药材组成的复方制剂，具有清胃泻火、解毒消肿的功效，临床上常用于口舌生疮、齿龈、咽喉肿痛[1]。国内目前有4个厂家生产该药，执行的质量标准收载于《卫生部药品标准》中药成方制剂第十九册。其中，鉴别项（3）的薄层色谱法使用了毒性较大的试剂苯，对实验人员的危害较大，有必要进行改进。本文通过对比实验，认为用毒性较小的甲苯代替苯是可行的。

1 实验仪器与试药

1.1 仪器 电子恒温水浴锅（天津市泰斯特仪器有限公司）；硅胶G薄层板（青岛海洋化工厂分厂）；双槽层析缸（北京鑫科奥商贸有限公司）。

附图 色谱图

1.2 试药 清胃黄连片（天津中天制药有限公司，批号：ZT104185）；菝葜皂苷元对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110744-200509）；其他化学试剂均为分析纯。

2 实验方法和结果

2.1 方法 按照《卫生部药品标准》中药成方制剂第十九册收载的鉴别（3）项下的方法，取供试品10片，去糖衣，研细，加乙醚40ml，加热回流15min，滤过，弃去滤液，残渣挥尽乙醚，加乙醇40ml。加热回流1h，放冷，滤过，滤液加盐酸2ml，继续回流1h，再置水浴上浓缩至约5ml，加水10ml，用苯20ml振摇提取，分取苯层，用1%氢氧化钠溶液10ml洗涤一次，再用水洗涤3次，每次10ml，分取苯层，蒸干，残渣加苯1ml使溶解，作为供试品溶液。另取菝葜皂甙元对照品，加苯制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录ⅥB）试验，吸取上述两种溶液各4μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以苯-丙酮（9∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰。

供试品溶液、对照品溶液均按照《卫生部药品标准》中药成方制剂第十九册收载的鉴别（3）项下的方法进行制备，其中“用苯20ml振摇提取”改为“用甲苯20ml振摇提取”，“残渣加苯1ml使溶解”改为“残渣加甲苯1ml使溶解”，“另取菝葜皂甙元对照品，加苯制成每1ml含1mg的溶液”改为“另取菝葜皂甙元对照品，加甲苯制成每1ml含1mg的溶液”，展开剂“苯-丙酮（9∶1）”改为“甲苯-丙酮（9∶1）”[2]，在平行的条件下（温度：25℃，湿度：40%），与原方法作比较。

2.2 结果 实验结果见附图，其中A为用甲苯作为溶剂的色谱图，B为用苯作为溶剂的色谱图。附图表明，改进方法后的供试品色谱中，在与菝葜皂苷元对照品色谱相应的位置上显相同颜色的黄色斑点（附图中的灰色），改进后的色谱图达到相同的分离效果，且与文献报道基本一致[3]。

3 讨论

3.1 由上述薄层色谱的实验结果可见，改进后的方法与原方法的色谱结果基本一致。甲苯的极性与苯接近，且毒性相对较小，所以在薄层色谱的展开系统中替换苯是切实可行的。

3.2 苯是一种挥发性很强的有机溶剂，暴露于空气中很容易扩散，人和动物吸入或者皮肤接触大量苯进入体内，会引起急性和慢性苯中毒，苯已被世界卫生组织确认为强致癌物。而《卫生部药品标准》收载的药品中，还有很多使用苯作为溶剂的检验方法，作为应用较普遍的中成药标准，应考虑尽量避免使用毒性较大的试剂苯，以毒性较小的其他试剂代之。建议在今后修订《卫生部药品标准》时逐步取消苯的使用，保障实验室环境，保护检验工作者的安全与健康。