培元解毒法对无症状HIV感染者CD4+计数和血清IL-8、sIL-2R水平的影响*

王丹妮，姜 枫

(1.河南中医学院第一附属医院艾滋病临床研究中心，郑州 450000;2.国家中医药管理局艾滋病重点研究室(扶正排毒)，郑州 450000;3.广西中医药大学附属瑞康医院，广西中医(中西医结合)艾滋病研究中心，南宁 530011)

无症状HIV感染期之“无症状”是指尚未出现艾滋病发病的典型症状。此期正邪相争激烈，一旦邪盛正衰则各种疾病纷至沓来［1］。我们从“十五”科技攻关时便提出将无症状HIV感染期作为中医药治疗艾滋病的黄金切入点［2］，使用扶正排毒片以培元解毒法为治疗艾滋病无症状期的基本法则，以期达到提高患者生存质量、延缓发病甚至终生带毒不发病的全新理念，经临床验证疗效确切［3］。为进一步了解其对无症状HIV感染者免疫功能调节的影响，对32例患者治疗前后CD4+计数和血清白细胞介素8(Interleukin-8，简称IL-8)、可溶性白细胞介素2受体(soluble Interleukin-2 receptor，简称 sIL-2R)水平变化进行检测，并与健康体检者比较，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 研究对象

治疗组为培元解毒法组，32例来源于2009年6月在河南省南阳市宛城区收集的未接受高效抗逆转录病毒疗法的无症状HIV感染者，临床诊断均符合国家卫生部2005年颁布的《艾滋病诊疗指南》无症状HIV感染期诊断标准［4］。培元解毒法治疗组中男性17例，女性15例，年龄分布为32～65岁，平均(43.38±8.89)岁。服用中药扶正排毒片(药品批号L2006Z002)每次5片，每日3次，温开水冲服，共服用6个月。治疗前后分别采集血浆标本。22名健康对照的血浆标本全部来自河南中医学院第一附属医院体检中心，其中男性13例，女性9例，年龄28～57岁，平均年龄(48.95±9.44)岁，无重要脏器疾患及各种病毒感染，肝、肾功能试验正常。2组在性别构成、年龄上基线一致(年龄t=0.441，P=0.661;性别x2=0.188，P=0.665)，具有可比性。

1.2 观察指标及方法

CD4+淋巴细胞水平检测使用美国BD公司生产的FACS Calibur流式细胞仪进行检测。IL-8及sIL-2R水平检测应用热电上海仪器有限公司生产的MK3型酶标仪，于450nm处读取数值，根据标准质量浓度制定标准曲线，在标准曲线上查找相应的值。以上检测由国家中医药管理局艾滋病重点实验室工作人员负责。

1.3 统计学方法

采用SPSS 13.0软件统计分析，所有统计检验均为双侧检验，取α=0.05水准;基础值的均衡性分析采用t检验和χ2检验，对数值变量采用均数±标准差(±s)表示，治疗组疗前疗后比较采用配对t检验，治疗组和对照组比较用独立样本t检验并做相关分析。

2 结果

2.1 培元解毒法治疗组治疗前后CD4+淋巴细胞计数变化比较

表1显示，32例患者治疗后CD4均数由治疗前的(368.63±111.54)个/mm3上升为(412.72±159.63)个/mm3。治疗组32例，有效15例，稳定10例，无效7例，总有效率78.13%。

2.2 治疗前后血清IL-8水平变化比较

表2显示，治疗前治疗组血清IL-8水平明显高于健康对照组(P＜0.05);治疗6个月后与治疗前比较明显下降(P＜0.05)，但仍高于健康对照组;治疗后与健康对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05)。

2.3 治疗前后血清sIL-2R水平变化比较

表2显示，治疗前治疗组血清sIL-2R水平明显高于健康对照组(P＜0.05);治疗6个月后与治疗前比较虽有下降但仍高于健康对照组，无统计学意义(P＞0.05);治疗后与健康对照组比较，差异仍有统计学意义(P＜0.05)。

2.4 直线相关分析

治疗前sIL-2R与CD4+淋巴细胞计数呈负相关，CD4与 sIL-2R疗前相关度(r=－0.461，P=0.008＜0.05)呈负相关关系。

表1 培元解毒组治疗前后CD4+计数水平(个/mm3，±s)及有效率比较

表1 培元解毒组治疗前后CD4+计数水平(个/mm3，±s)及有效率比较

注:培元解毒组治疗后与治疗前CD4+计数平均升高44.09个/mm3，有效率78.13%

例数 治疗前 治疗后 有效 稳定 无效 有效率(%)培元解毒组32 368.63±111.54 412.72±159.63 15 10 7 78.13 t=－1.888 P =0.068

表2 健康对照组与培元解毒组治疗前后IL-8、sIL-2R(±s)(pg/ml)

表2 健康对照组与培元解毒组治疗前后IL-8、sIL-2R(±s)(pg/ml)

注:治疗组治疗后与治疗前比较:*P=0.004＜0.05，＊＊P=0.867＞0.05

IL-8 sIL-2R组 别 例数 治疗前 治疗后 治疗前 治疗后培元解毒组 32 8.61±5.25 6.03±5.05*1267.91±612.28 1257.01±436.31＊＊健康对照组 22 5.50±2.54 839.35±380.97 2组P值比较0.013 0.649 0.003 0.001

3 讨论

培元解毒治则是基于病因病机辨证提出的，是通过国家“973”重点课题资助项目“艾滋病中医病因及发病机制的研究”验证的。艾毒是一种新发疫毒，经血络进入人体，在体内化湿生热，表现为毒、湿、热等病邪特征。艾毒直接损伤并渐进性地消耗人体元气，导致多脏腑之气亏损，进而气化失常，继发痰饮、瘀血、毒聚等实邪。早期即表现为虚实夹杂证候，实质为本虚标实。其虚实交错、互为因果，终致变证丛生，命元诸脏衰竭，阴阳离决而亡。因此，艾毒入络是艾滋病的直接病因，伏而伤元是其核心病机，培元解毒是其基本治则［5、6］。扶正排毒片由黄芪、西洋参、女贞子、山茱萸、白花蛇舌草、连翘、生白术、防风、甘草等组成。黄芪与西洋参合用，在药性上一凉一温，从归经上涵盖心、肺、脾、肝、肾，通过补益五脏之气从而达到“培元”之效果。连翘、白花蛇舌草、山茱萸三药合用，归经既考虑到五脏、三焦，更重要的是三药分别入小肠、大肠、膀胱，使湿热得以从二便排出，从而起到“清热解毒利湿”之功效。现代药理研究显示，西洋参、黄芪、连翘、白花蛇舌草等合用可增强机体免疫功能，抗HIV病毒、抗肿瘤等。在以前的临床研究［3］和本次研究中［7］已观察到，培元解毒中药干预无症状HIV感染者在症状体征、免疫学指标、生存质量等方面的疗效，且临床用药安全，但对该药的作用机理尚未开展深入研究。我们试图从免疫激活角度寻找突破口，因此本研究通过对无症状HIV感染者治疗前后CD4+计数和血清IL-8、sIL-2R水平进行探索。

人体感染HIV后出现的免疫学异常可以概括为［11］:① CD4+T淋巴细胞数量减少;② CD4+T淋巴细胞功能障碍;③异常免疫激活。异常免疫激活可以造成CD4+T细胞的功能丧失和数量耗竭［8］，因此增加CD4+T淋巴细胞数量和功能，抑制异常免疫激活是很有必要的。

HIV主要侵犯人CD4+淋巴细胞，导致其数量上的减少和功能缺陷，CD4+是维护机体免疫功能的重要细胞，是免疫反应的中心细胞，其数量及功能变化是评价疾病发展和药物疗效的重要指标。本研究CD4+计数统计结果显示，治疗后CD4+计数与疗前在α=0.05水准上无统计学意义(P＞0.05)。但治疗6个月后CD4+计数平均升高44.09/mm3，提示扶正排毒片具有稳定或提高感染者CD4+计数的作用。

酶联免疫检测结果显示，治疗前培元解毒治疗组的IL-8、sIL-2R水平显著高于健康对照组(P=0.013或0.003＜0.05)，证实无症状HIV感染者确实存在异常免疫激活现象，这与Sodora DL［9］提出的人体感染HIV后出现重要的免疫学异常改变与异常免疫激活是一致的。IL-8是一种多源性炎性细胞因子，对中性粒细胞、嗜碱性粒细胞和T淋巴细胞有强烈趋化作用，并释放活性物质，加强免疫反应，造成组织损伤。检测结果显示，无症状HIV感染者血清IL-8在疗前与健康对照组在α=0.05的水平上差异有统计学意义(P＜0.05)，且血清IL-8水平明显高于非治疗组，与以往研究报道急性炎症应答一致［10］。其升高的机理可能是无症状HIV感染者本身也可以刺激单核细胞、上皮细胞等分泌IL-8，使血清中IL-8水平升高，是否还有其他原因导致IL-8水平升高尚待进一步的研究与探讨。sIL-2R是1985年发现的重要免疫抑制因子，在许多T细胞介导的免疫反应性疾病中是增加的［11］。检测结果显示，无症状HIV感染者血清sIL-2R在疗前与健康对照组在α=0.05的水平上差异有统计学意义(P＜0.05)，血清sIL-2R水平高于健康对照组，与以往研究报道一致［12］。其升高的机理可能是无症状HIV感染者免疫功能受损时，激活的T淋巴细胞对IL-2Rα 链的表达失去控制［13，14］，活化的 T 淋巴细胞膜mIL-2Rα链成分脱落于血清及其他体液中，造成sIL-2R水平增高。

治疗后数据显示，IL-8水平明显下降与治疗前比较差异有统计学意义(P=0.004＜0.05)，说明培元解毒法对血清IL-8有较好的干预效果。治疗后sIL-2R水平略有下降，与治疗前比较无统计学意义(P=0.867＞0.05)，但仍高于健康对照组(P=0.001＜0.05)，说明异常免疫激活中，sIL-2R与无症状HIV感染者更加密切，与其有关的细胞免疫参与其发病的全过程，可以作为了解无症状HIV感染者体内细胞免疫状态、治疗效果及预后判断的重要指标之一。

CD4与 sIL-2R前相关度(r=－0.461，P=0.008＜0.05)呈负相关关系，这与冯鲜妮等报道［12］sIL-2R随着HIV感染者CD4的下降而进行性增高，CD4与sIL-2R呈负相关(r=－0.656)是一致的。说明细胞因子充分参与了T细胞的活化，并在T细胞激活中发挥着重要作用，且能够彼此提供预后的信息。

据报道，在许多免疫系统被激活的炎症性疾病中有变化，且与机体免疫状态、病情轻重及预后密切相关。本文从免疫激活的角度入手，研究中医药治疗艾滋病疗效机制是一个新的热点。检测无症状HIV感染者血清IL-8、sIL-2R水平变化，对了解病情、指导临床实践和疗效判定均具有重要意义，可以作为了解无症状HIV感染者体内细胞免疫状态、治疗效果及预后判断的参考指标之一，同时说明培元解毒法立论的正确性。

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