氯沙坦对慢性心力衰竭大鼠血清TNF－а和IL－18变化的影响

欧叶涛，张东东，孙 权，陈乃峰，韩 曦，钟堂武，田国忠

(佳木斯大学基础医学院解剖教研室，黑龙江佳木斯154007)

慢性心力衰竭(CHF)是许多心血管系统疾病发生发展的最终结果，也是导致患者死亡的主要原因。近年来随着对其发病机制研究的逐步深入，越来越多的证据表明，在慢性心衰的发生发展过程中，炎性细胞因子的过度激活在此过程中扮演着关键的角色。肿瘤坏死因子а(TNF－а)和白介素18(IL－18)是引起免疫炎性反应的重要因子，广泛的参与机体各个组织器官的免疫炎性进程，本研究采用酶联免疫法，探讨氯沙坦对CHF大鼠血清中TNF－а和IL－18含量的变化的影响，旨在阐明TNF－а和IL－18活化在CHF时的病理意义及作用机制。

1 材料与方法

1.1 动物模型制作和分组

健康雄性Wistar大鼠，体重(250±20)g(佳木斯大学实验动物中心提供)，乙醚麻醉后于左侧第四肋间隙打开胸腔，暴露心脏，结扎左前降支制成心衰大鼠模型;同时部分大鼠进行假手术，即不结扎左前降支，其余操作同模型组[1]。

待手术动物伤口愈合后，随机将动物分成A组(模型组)、B组(治疗组)、C组(假手术组)和D组(正常组)，每组12只。其中治疗组(B组)给予氯沙坦治疗，其余各组给予生理盐水，2个月后取血检测。

1.2 试验试剂

TNF－а和IL－18 ELISA试剂盒购于武汉博士德生物有限公司，氯沙坦由杭州默沙东制药公司生产。

1.3 检测方法

参照试剂说明书，酶联免疫吸附法(ELISA方法)于450nm波长下检测样品浓度，血清中TNF－а的浓度以ng/L表示，血清IL－18浓度以pg/L表示。

1.4 统计学方法

用SPSS 17.0软件进行统计分析，结果以表示，检验标准а =0.05。

2 结果

各组大鼠血清中TNF－а和IL－18的含量经过ELISA检测，统计学软件分析后可见，模型组与其他三组动物血清中TNF－а和IL－18的含量均存在明显差异，P＜0.05;治疗组与正常组和假手术组之间也存在显著差异，P＜0.05;正常组和假手术组清中TNF－а和IL－18的含量无差异，P ＞0.05。

表1 各试验组大鼠血清样品TNF－а和IL－18检测结果(±s，n=12)

表1 各试验组大鼠血清样品TNF－а和IL－18检测结果(±s，n=12)

注:●与正常组相比P＜0.05;▲与模型组相比P＜0.05。

对象 TNF－а(ng/L) IL－18(pg/L)A 组 14.25±3.51● 361.16±92.53●B 组 10.67±2.52●▲ 265.91±77.07●▲C 组 6.91±1.30▲ 188.43±49.37▲D 组 7.02±1.15▲ 184.59±40.25▲

3 讨论

慢性心力衰竭的发病机制有很多学说，目前备受关注的是免疫炎性反应学说，近年来很多研究结果显示，免疫炎性反应在CHF的发生发展过程中起着重要作用，主要表现为炎性细胞因子的异常表达和炎性细胞浸润。目前比较公认的炎性细胞因子有核因子－ΚB(NF－ΚB)、TNF－а和白细胞家族成员(IL －1、6、10、18)等[2，3]。目前，对于免疫炎性反应在CHF时的具体作用机制尚未十分明了，TNF－а主要由单核/巨噬细胞分泌，今年来研究发现，TNF－а具有抑制心肌细胞收缩，诱发心肌细胞凋亡，参与心脏重塑作用，在CHF的发生发展过程中扮演着重要的角色[4];同时也有研究显示，在CHF过程中，TNF－а能够通过正反馈调节增加自身合成，因而随着CHF的进展，血清中的TNF－а的含量呈逐渐增高的趋势[3]。IL－18是IL－1家族的成员，研究显示，IL－18主要通过诱导IFN－γ、TNF－а等炎性因子的表达，在CHF的发生发展过程中发挥作用[5]，另外也有研究表明，IL－18还可以直接通过受体影响心肌细胞的功能[6]。本研究结果显示，CHF大鼠血清中TNF－а和IL－18的含量均明显高于正常组，说明在CHF发生发展过程中，TNF－а和IL－18所引起的免疫炎性反应起着重要的推动作用。给予氯沙坦治疗后，氯沙坦可以有效阻断NF－ΚB的活化，进而减少免疫炎性因子的释放[7，8]，心衰大鼠的心功能出现明显好转。因此，血清中TNF－а和IL－18含量与模型组相比，出现明显的下降。综上所述，TNF－а和IL－18是CHF表现异常活跃的炎性因子，本实验结果不仅反应二者在CHF的发生发展过程中起着重要的作用，同时随着病情的进展，在血清的中敏感反应，亦可作为评价心功能等级和治疗效果的一个指标。随着对炎性因子在CHF发病机制研究的逐步深入，抗细胞因子治疗将会成为临床治疗CHF的一个崭新的方案。

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