高尔基体蛋白73诊断原发性肝癌的临床评价

袁明生，唐富英，王 影

（广东医学院附属陈星海医院1．检验科；2．消化内科，广东 中山528415）

原发性肝癌（Primary Hepatic Cancer，PHC）是我国常见的恶性肿瘤之一，早期发现、早期治疗是提高疗效的关键。近年来，由于技术飞速发展，发现了一系列新的潜在的肿瘤标志物，高尔基体蛋白73（Golgi protein 73，GP73）被认为是最值得期待的肝癌血清标志物之一［1－3］。本研究通过ELISA检测人血清中GP73浓度，初步探讨其诊断PHC的临床价值，并进行评价。

1 材料与方法

1．1 一般资料 选取我院2010年1月至2012年3月住院病人，排除了其它系统恶性肿瘤和严重疾病后，分成 ①PHC组40例，经住院手术或肝穿病理检查确诊者，其中男30例，女10例，年龄为30－76岁，平均47．2岁；②肝病组40例，其中慢性肝炎20例、肝硬化20例，男28例，女12例，年龄20－60岁，平均33．3岁；③对照组40例，为门诊健康体检者（孕妇除外）。男20例，女20例，年龄19－50岁，平均29．2岁。

1．2 仪器与试剂 安图iWO－960洗板机、安图2010酶标仪，GP73试剂由北京热景生物技术有限公司提供，批号：20120101，测量方法：双抗体夹心ELISA法定量检测血清中GP73含量。

1．3 方法 所有肝癌患者、肝硬化患者和对照组人群于清晨空腹状态下肘正中静脉取血于真空管中，静置30min，在相对离心力3 130×g离心5min后，分离后的血清标本放入－20℃冰箱保存待统一检测GP73浓度（三组存放条件一致）。血清GP73测定严格按试剂说明书操作，安图2010酶标仪比色，并自动绘制标准曲线，计算出样品浓度。试剂盒说明书的参考范围：GP73＜150ng／ml，患肝癌风险率低。

1．4 统计学方法

采用SPSS 13．0统计软件进行统计处理。对三组GP73数据分布进行正态性检验P＜0．05，属于非正态分布，因此以中位数及四分位数表示。各组间比较，采用多个独立样本非参数Kruskal－Wallis检验，两两比较用 Mann－Whitney U 检验，P＜0．05为差异有统计学意义。

2 结果

2．1 40例PHC组、40例肝病组和40例对照组按本试剂盒说明书测定方法进行测定，其GP73水平结果见表1，经统计学分析表明，三组GP73浓度之间的差异具有统计学意义（χ2＝75．5，P＜0．01），根据平均秩次（Mean Rank）进一步推断，PHC组GP73浓度明显高于肝病组和对照组，肝病组也高于对照组。

表1 PHC组、肝病组和对照组血清GP73检测结果

2．2 与“金标准”病理结果比较，GP73诊断PHC的敏感性为90．0%、特异性为70．0%和符合率为76．7%（表2）。

表2 GP73浓度与病理结果比较

3 讨论

长期以来，肝癌无创伤的诊断主要是应用血清肿瘤标志物结合影像学的方法。其中AFP是在世界范围内应用最广的血清肿瘤标志物，但其敏感性为40%－65%，特异性76%－96%［4］，不甚令人满意，GP73是近年来新发现诊断原发性肝癌的肿瘤标志物［5］。

GP73是存在于高尔基体的一种跨膜蛋白，Block等［6］于2005年首先提出，在肝癌患者血清中，GP73水平显著升高。其原因可能与肝癌患者肝细胞损伤有关或是与GP73维持高尔基体结构的完整性有关。细胞器的改变与人类癌的发生联系密切，当细胞核和线粒体正常功能、结构组成被破坏时，反映了癌细胞在基因组和微环境上的改变，以适应癌细胞的代谢需求［7］。

从本次研究结果表1可见，PHC组GP73水平明显高于肝病组和对照组（P均＜0．05），差异有统计学意义，支持上述观点，GP73水平高低，可以用于筛查原发性肝癌，肝病组血清GP73水平较对照组也升高（P均＜0．05），差异有统计学意义，提示GP73同肝细胞受病毒感染有关联，这与 Mao YL［8］等人发现肝细胞受到病毒感染，引起GP73的高表达的结果相一致；然而在肝癌组中，GP73升高的远高于肝炎组。

本次研究120例临床标本测量结果与“金标准”病理结果对比研究发现，由北京热景生物技术有限公司提供的ELISA法检测GP73试剂盒诊断原发性肝癌的敏感性和特异性分别是90．0%、特异性为70．0%和符合率为76．7%。其诊断原发性肝癌的敏感性高于AFP的敏感性，与国内外其它的研究相一致［9，10］，由于它的敏感性高于 AFP，GP73有可能成为临床筛查原发性肝癌的一个新的肿瘤标志物，以达到早期诊断肝癌的目的。

不足之处是本次研究没有把GP73水平在其它系统恶性肿瘤的表达与肝癌的表达比较，从而进一步判断 GP73是否像 PSA（Prostate Specific Antigen，前列腺特异抗原）一样是肝脏的器官特异性肿瘤标志物。

［1］Mao Y，Yang H，Xu H，et al．Golgi protein 73（GOLPH2）is a valuable serum marker for hepatocellular carcinoma［J］．Gut，2010，59（12）：1687．

［2］徐海峰，杨华瑜，毛一雷，等．改变肝癌早期诊断和治疗现状的新肝癌血清标志物［J］．基础医学与临床，2008，28（1）：16．

［3］Willyard C．Researchers look for ‘sweet’method to diagnose cancer［J］．Nat Med，2007，13（11）：1267．

［4］徐海峰，杨华瑜，张宏冰，等．改变肝癌早期诊断和治疗现状新肝癌血清标志物［J］．基础医学与临床，2008，28（1）：104．

［5］Bachert C，Fimmel C，Linstedt AD．Endosomal trafficking and proprotein convertase cleavage of cis Golgi protein GP73produces maker for hepatocellular carcinoma［J］．Traffic，2007，8（10）：1145．

［6］Block TM，Comunale MA，Lowman M，et al．Use of targeted glycoproteomics to identify serum glycoproteins that correlate with liver cancer in woodchucks and humans［J］．procnatl Acad sci USA，2005，102（3）：779．

［7］Wei S，Dunn TA，Isaacs WB，et al．GOLPH2and MYO6：putative prostate cancer markers localized to the Golgi apparatus［J］，Prostate，2008，68（13）：1387．

［8］Mao YL，Yang H，xu HF，et al．significance of GoIgi glycoprotein 73，a new tumor marker in diagnosis of hepatocellular carcinoma：aprimary study［J］．Chin Med J，2008，88（14）：945．

［9］毛一雷，杨华瑜，徐海峰，等．新的肝癌血清标记物GP73在肝癌诊断中的初步研究［J］．中华医学杂志，2008，88（14）：948．

［10］Yanli Gu，Wenli Chen，Yu Zhao，et al．Quantitative analysis of elevated serum Golgi protein－73expression in patients with liver disease［J］．Ann Clin Biochem，2009，46（1）：38．