丹栀逍遥散对大肠杆菌感染致漫性盆腔炎大鼠模型治疗作用的实验研究

程乐，曹耀丹，陈慧

（1.成都军区77126部队医院，重庆 402760；2.成都军区空军95696部队医院，重庆 402260；3.重庆市中药研究院，重庆 400065）

丹栀逍遥散对大肠杆菌感染致漫性盆腔炎大鼠模型治疗作用的实验研究

程乐1*，曹耀丹2，陈慧3

（1.成都军区77126部队医院，重庆 402760；2.成都军区空军95696部队医院，重庆 402260；3.重庆市中药研究院，重庆 400065）

目的：探讨丹栀逍遥散对大肠杆菌感染致慢性盆腔炎大鼠模型治疗作用及其作用机理。方法：采用大肠杆菌感染致慢性盆腔炎大鼠模型。手术10d后灌胃给药，丹栀逍遥散给药剂量分别为40，20，10g生药·kg-1，正常组和模型组每天灌服等容量的蒸馏水，20d后处死动物，取出两侧子宫称重，计算炎症肿胀度、肿胀率、抑制率，并取子宫进行宫腔狭窄、闭锁或扩张、炎细胞浸润和上皮细胞坏死脱落等病理组织学指标评分；另外取血进行血液流变学相关指标检测。结果：丹栀逍遥散高剂量和低剂量组能明显减轻大肠杆菌致子宫内膜损伤所致大鼠子宫炎症，降低其肿胀度与肿胀率；高剂量组能明显降低大肠杆菌感染所致大鼠慢性盆腔炎模型白细胞含量；高、中剂量组大鼠病变程度较模型组有明显改善，宫腔狭窄、闭锁或扩张、炎细胞浸润和上皮细胞坏死脱落等指标评分均有显著降低。各剂量组能明显降低大肠杆菌感染所致慢性盆腔炎模型大鼠的全血黏度（高切、低切）、血浆黏度、变形指数、刚性指数、还原黏度（高切、低切）。结论：丹栀逍遥散对大肠杆菌引起子宫内膜损伤所致慢性盆腔炎大鼠模型具有明显抗炎作用和活血化瘀作用。

丹栀逍遥散；盆腔炎；抗炎作用；活血化瘀

盆腔炎是指女性内生殖器及其周围结缔组织、盆腔腹膜发生的炎性疾病，包括子宫内膜炎、输卵管卵巢炎、盆腔结缔组织炎和盆腔腹膜炎等，临床症状有白带过多、经量增多、月经不调、腰痛、下腹坠胀等，甚至导致输卵管脓肿、阻塞，异位妊娠或不孕症等，本病属中医“下腹痛”“月经不调”“带下”等范畴［1］。中医学认为是正不胜邪，余邪未尽，湿热之毒瘀积胞宫，乃致脏腑功能失调，肝气不舒，气血瘀滞，冲任失调，经行不畅。丹栀逍遥散出自《内科摘要》，是在《太平惠民和剂局方》所载“逍遥散”基础上加丹皮、栀子二药组成，具有清热养血、疏肝健脾的作用，现临床上采用丹栀逍遥散加减治疗慢性盆腔炎获得满意疗效，但未见相关实验研究的报道，故本研究旨在探讨丹栀逍遥散对大肠杆菌感染致慢性盆腔炎大鼠模型治疗作用的影响，为临床研究提供实验依据。

1 材料

1.1 药物和试剂

将丹栀逍遥散药材粗粉按处方比例混合，加水煎煮3次，每次2h，合并煎液，放置过滤使沉淀，取上清液浓缩至稠膏状，即得。妇炎康片（昆明云健制药有限公司，批号：201002113）。

乙醚（上海马陆制药厂，批号：20020111）；营养肉汤（北京陆桥技术有限责任公司，批号：040203）；大肠杆菌（Escherichia，E.coli）（重庆医科大学微生物临床诊断中心，编号：ATCC20019）；肝素钠（中国医药集团上海化学试剂公司，1.0g/支，批号：F000128）。

1.2 动物

SD大鼠：60只，雌性，SPF级动物，合格证号：SCXK（渝）20070006号，重庆市中药研究院实验动物实验室提供。

1.3 主要仪器

AW220型电子天平（日本 SHIMADZU公司）；YXQ.SG41-280型电热手提压力蒸汽消毒器（上海医用核子仪器厂）；HH.B11型电热恒温培养箱（上海跃进医疗器械一厂）；离心机（北京医用离心机厂，型号：LG5-2A）；全自动血液流变快测仪（重庆大学维多生物工程研究所，型号：FASCO-3010B）；YJ-1450型医用净化工作台（苏州净化设备公司）。

2 方法［4-5］

2.1 实验方法

取200g左右雌性大鼠60只，随机分为6组，每组10只，除正常组外其余各组大鼠乙醚麻醉后，碘酒消毒于下腹部正中剪一约1cm小口，暴露并固定子宫，抽取制备好的大肠杆菌悬液（浓度约为6×106）0.2mL，于子宫分叉处进针插入右侧子宫，用注射器针尖机械性损伤子宫内膜组织，然后注入菌液，缝合伤口，正常喂养。手术10d后灌胃给药，每日1次，连续20d，正常组和模型组给予同等体积蒸馏水。

末次给药后1h处死动物，取出两侧子宫称重，计算炎症肿胀度＝右侧致炎子宫－左侧正常子宫，肿胀率 ＝（肿胀度/左侧子宫）×100％，抑制率＝（模型组子宫肿胀率－给药组子宫肿胀率）/模型组子宫肿胀率。另外取血测定红细胞压积，腹主动脉取血4mL注入肝素抗凝试管中，用全自动血液流变快测仪自动测定全血黏度，再将全血离心，自动测定血浆黏度，并自动计算出聚集指数、刚性指数、变形指数。

取子宫进行宫腔狭窄、闭锁或扩张、炎细胞浸润和上皮细胞坏死脱落等病理组织学指标评分。宫腔狭窄、闭锁或扩张评分标准为：无明显病变记为0分；病变小于1/3记为1分；1/3～2/3病变记为2分；2/3以上病变记为3分。炎细胞浸润评分标准为：无炎细胞浸润记为0分；少数散在或灶性且仅在黏膜层记为1分；散在或灶性但深入肌层记为2分；多数散在或灶性并累及全层记为3分。黏膜层及腺体萎缩评分标准为：各层次清晰记为0分；黏膜固有层腺体结构消失记为1分；肌层与黏膜层分界不清记为2分；全层结构不清记为3分。上皮细胞坏死脱落评分标准为：单层柱状上皮记为0分；上皮细胞扁平或脱落小于1/3记为1分；上皮细胞扁平或脱落1/3～2/3记为2分；全层上皮细胞变性坏死记为3分。

2.2 统计方法

3 结果

3.1 对慢性盆腔炎大鼠模型子宫和白细胞的影响

由表1和表2可见，与正常组相比，模型组大鼠子宫肿胀度、肿胀率明显增大、白细胞计数（WBC）明显升高，表明造模成功；丹栀逍遥散高剂量和低剂量组能明显减轻大肠杆菌致子宫内膜损伤所致大鼠子宫炎症，降低其肿胀度与肿胀率；丹栀逍遥散高剂量组能明显降低大肠杆菌感染所致大鼠慢性盆腔炎模型白细胞数量。结果表明，丹栀逍遥散对大肠杆菌引起子宫内膜损伤所致慢性盆腔炎大鼠模型具有明显抗炎作用。

表1 对大肠杆菌感染所致大鼠慢性盆腔炎模型子宫肿胀的影响（±s）

表1 对大肠杆菌感染所致大鼠慢性盆腔炎模型子宫肿胀的影响（±s）

注：（1）n＝10，（2）与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01

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表2 对大肠杆菌感染所致大鼠慢性盆腔炎模型白细胞的影响（±s）

表2 对大肠杆菌感染所致大鼠慢性盆腔炎模型白细胞的影响（±s）

注：（1）n＝10，（2）与模型组比较，*P＜0.05

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3.2 对慢性盆腔炎大鼠模型血液流变学的影响

由表3可见，与模型组相比，丹栀逍遥散各剂量组能明显降低大肠杆菌感染所致慢性盆腔炎模型大鼠的全血黏度（高切、低切）、血浆黏度、变形指数、刚性指数、还原黏度（高切、低切）。表3结果表明，丹栀逍遥散对大肠杆菌引起子宫内膜损伤所致慢性盆腔炎大鼠模型有明显的活血化瘀作用。

3.3 对慢性盆腔炎大鼠模型子宫病理组织学的影响

镜下观察显示正常组动物大鼠子宫黏膜上皮呈低柱状，完整无损，黏膜层内间质细胞分布均匀，黏膜层、环纵肌层、浆膜层完整，界限清晰；子宫腺体结构正常，无增生或萎缩现象。模型组大鼠子宫具有宫腔狭窄、闭锁或扩张、黏膜层及腺体萎缩、上皮细胞坏死脱落、炎细胞浸润等病变，基本符合临床慢性盆腔炎的病理特点，说明造模成功。

由表4和图1可见，与正常组相比，模型组大鼠子宫各种病理改变各项指标评分均有明显升高；丹栀逍遥散高、中剂量组大鼠病变程度较模型组有明显改善，宫腔狭窄、闭锁或扩张、炎细胞浸润和上皮细胞坏死脱落等指标评分均有显著降低（P＜0.01～0.05）。结果表明，丹栀逍遥散对大肠杆菌感染所致慢性盆腔炎大鼠模型有一定的治疗作用。

表3 对大肠杆菌感染所致大鼠慢性盆腔炎模型血液流变学指标的影响（±s）

表3 对大肠杆菌感染所致大鼠慢性盆腔炎模型血液流变学指标的影响（±s）

注：（1）n＝10，（2）与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01

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表4 对大肠杆菌感染所致大鼠慢性盆腔炎模型子宫病理变化评分的影响（±s）

表4 对大肠杆菌感染所致大鼠慢性盆腔炎模型子宫病理变化评分的影响（±s）

注：（1）n＝10，（2）与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01

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图1 对大肠杆菌感染所致大鼠慢性盆腔炎模型子宫病理变化的影响（×100）

4 讨论

近年来临床上盆腔炎发病率逐年上升，慢性盆腔炎常为急性盆腔炎未能彻底治疗，或患者体质较差，病程迁延所致，但亦可无急性炎症病史。常见致病体有链球菌、葡萄球菌、大肠杆菌、厌氧菌、淋球菌、支原体、衣原体等，慢性炎症形成的瘢痕粘连以及盆腔充血，可引起下腹部坠胀、疼痛及腰骶部酸痛。丹栀逍遥散为疏肝健脾，理气活血之要方。方中柴胡、香附疏肝理气；当归、赤芍、丹皮、莪术活血化瘀；茯苓、白术健脾化湿；配甘草培补脾土，扶正以祛邪；黄芩清热凉血，败酱草、蒲公英、忍冬藤、白花蛇舌草清热解毒。诸药合用，共奏行气活血、清热解毒、化瘀止痛之功［6］。在本实验室条件下，丹栀逍遥散对大肠杆菌感染致慢性盆腔炎大鼠模型有较好的抗炎作用和有明显的活血化瘀作用，这种抗炎和活血化瘀作用为丹栀逍遥散能在慢性盆腔炎的治疗中发挥显著作用提供了实验依据。

［1］陈奇.中药药效研究思路与方法［M］.北京：人民卫生出版社，2005：854.

［2］马诸荣，苏德模.药品微生物学检验手册［M］.北京：科学出版社，2000：197-210.

［3］陈天寿.微生物培养基的制造与应用［M］.北京：中国农业出版社，1995：183.

［4］魏云，吴爱萍，杨世平.妇炎康治疗慢性盆腔炎的实验研究［J］.中国医药科学，2012，2（2）：9-11.

［5］李文红，太鸿彬，杨建宏.盆腔消癥灌肠液对慢性盆腔炎大鼠血液流变学的影响［J］.河北中医，2011，33（1）：112-114.

［6］王乔，曾安贵.丹栀逍遥散加减在慢性盆腔炎治疗中的应用效果观察［J］.内蒙古中医药，2011，8（4）：52-53.

The Experimental Study of Danzhi Xiaoyao Power on the Therapeutic Effect of Chronic Pelvic Inflammatory Disease Rat M odel Reduced by E.coli Infection

CHENG Le1*，CAO Yao-dan2，CHEN Hui3
（1.77，126 Troops Hospital of the Chengdu Military Region，Chongqing 402260，China；2.95，696 Troops Hospital of Chengdu Military Region Air Force，Chongqing 402260，China；3.Chongqing Academy of Chinese Materia Medica；Chongqing 400065，China）

Objective：To study the therapy effect on chronic pelvic inflammatory disease ratmodel induced by E.coli infection by Danzhi Xiaoyao Power（DZXYP）and its mechanism of action.M ethods：Using chronic pelvic inflammatory disease ratmodel induced by E.coli infection.After 10 days surgery for drug lavage，DZXY Pdrug dose respectively 40，20 and 10g crude drug·kg－1，normal grou Pand model grou Ptaking the capacity of distilled water every day.After twenty days，putting to death animals，taking out on both sides of the uterus weighing，calculating inflammation swelling degree，swelling rate and inhibition rate，and taking the uterus in uterine cavity stenosis，blocking or expansion，inflammatory cells infiltration and epithelial cell necrosis off and pathological histology index score，taking blood and blood rheology test related indicators.Results：DZXY Phigh dose and low dose grou Pcan obviously reduce the inflammation of rat uterine；reduce the swelling degree and swelling rate.High dose grou Pcan obviously reduce leukocyte contents of the chronic pelvic inflammation model rats.Compared with model group，high and middle dose grou Pof rats lesion degree were obviously improved，uterine narrow，blocking or expansion，inflammatory cells infiltration and epithelial cell necrosis come index score were significantly reduced.Each dose grou Pcan obviously reduce the chronic pelvic inflammation model rats of whole blood viscosity，plasma viscosity，deformation index，rigid index，reducing viscosity.Conclusion：DZXY Phas significant anti-inflammatory effects and promote blood circulation to remove blood stasis role in the chronic pelvic inflammationmodel rats caused by the E.coli infection.

Danzhi Xiaoyao Power（DZXYP）；Pelvic inflammatory disease；Anti-inflammatory effects，Promoting blood circulation to dissipate blood stasis

2012-08-24）

*［通讯作者］程乐，E-mail：48857657＠qq.com