饲粮中添加黄腐酸对肉仔鸡生产性能和血液生化指标的影响

王 晶 张海军 武书庚 岳洪源 齐广海* 魏传玉 于长青 仝宝生

(1.中国农业科学院饲料研究所，农业部饲料生物技术重点开放试验室，北京 100081;2.内蒙古永业农丰生物科技有限责任公司北京分公司，北京 100083)

黄腐酸(fulvic acid，FA)为腐殖酸组分之一，系植物遗骸经微生物分解和转化而来[1]，主要存在于低热值的煤炭，如泥炭、褐煤中。在腐殖酸的各组分中，FA分子质量较小，可溶于水，生物活性较高，不含重金属及其他有害金属离子。FA无完整结构和固定化学构型，被认为是土壤特殊微区系里瞬时可得到的酚类单元随即聚集的多缩物质，带有羧基、醌基等多个活性基团[2]，可参与氧化还原反应，保持机体旺盛的新陈代谢[3]。FA可促进植物种子萌发和幼苗生长，提高植物的免疫和抗逆性能，改善土地盐碱化程度等[4-6]。因其绿色、安全、有效等特点，FA被认为是可开发的抗生素替代品[7]，目前逐渐被开发用于畜牧生产。FA等能维持肠道菌群稳定，促进营养物质的分解、吸收和转化，改善饲料效率和日增重[8];作为一种含芳香结构的有机弱酸，FA可维持肠道适宜pH，有利于营养物质的吸收利用[8];从风化煤中提取的FA，还具有抗炎、止痛、脱敏、去腐生肌和调节免疫功能等医学作用[9];生物发酵 FA能改善蛋鸡[10]、肉鸡[11]的生产性能，提高奶牛免疫力、防治急性乳房炎[12]，提高对虾成活率[13]等。近年来，由风化煤和褐煤中提取的天然FA，具有调节畜禽免疫机能、促进生长的作用，逐渐引起了畜牧工作者的兴趣。但是作为新型添加剂产品，关于天然FA对靶动物有效剂量的研究较少。本试验以快速生长的肉仔鸡为对象，旨在研究实际生产条件下，不同剂量FA和金霉素对肉仔鸡生产性能、血液生化指标和抗氧化指标的影响，以期为FA在肉仔鸡生产中的应用提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

天然FA由内蒙古永业农丰生物科技有限责任公司提供，提取自风化煤和褐煤，含量12.05%。金霉素(chlortetracyclin，CTC)购自金河生物科技股份有限公司，有效含量15%。

1.2 试验设计与试验饲粮

试验选用840只1日龄健康爱拔益加(AA)雏鸡(公母各占1/2)，随机分为7组，每组设6个重复，每个重复20只。经统计，各组间试鸡体重无显著差异(P＞0.05)。试验期42 d，分为前期(1～21日龄)和后期(22～42日龄)2个阶段。

在参照 NRC(1994)和 NY/T 33—2004的基础上，结合AA肉仔鸡饲养手册配制玉米-豆粕型基础饲粮，其组成及营养水平见表1。设计添加0、0.012%、0.024%、0.048%、0.120%、0.240%FA及50 mg/kg CTC的7种饲粮。

1.3 饲养管理

4层笼养，自然光照加人工补光，光照强度为30 lx，1～7日龄每天光照24 h，8日龄后光照制度为23 h∶1 h(L∶D)。鸡舍温度第1周33～35℃，之后每周下降2℃。饲养管理按《AA肉鸡饲养管理手册》进行，自由采食和饮水，常规免疫。

1.4 指标测定与方法

生产性能:每天观察鸡的生长发育、发病及死亡情况，记录死淘数。分别于20日龄和41日龄的22:00禁食，次日08:00称重，期间自由饮水，准确记录各重复采食量，计算平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和饲料/增重。

血液生化指标:分别于21日龄和42日龄，以重复为单位随机选择公母各1只肉仔鸡，翅静脉采血3 mL，抗凝管存放，3 000 r/min离心10 min，取上清液分装，置-20℃冰箱保存待用。血浆谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)活性和总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、总胆红素(TBIL)、肌酐(CRE)、尿酸(UA)含量采用全自动生化分析仪测定，试剂盒购自上海科华生物工程股份有限公司。

抗氧化指标:血浆超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物活性(GSH-Px)和丙二醛(MDA)含量采用南京建成生物工程研究所的试剂盒测定。

1.5 数据处理

采用SPSS 16.0软件的one-way ANOVA程序进行统计分析，Duncan氏法进行差异显著性检验，以P＜0.05为差异显著性标准。测定结果以“平均值±标准差”表示。

表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础)Table1 Composition and nutrient levels of basal diets(air-dry basis) %

2 结果

2.1 饲粮中添加FA对肉仔鸡生产性能的影响

由表2可知，1～21日龄，0.240%FA组较对照组和0.012%FA组显著增加了肉仔鸡ADG(P＜0.05);22～42日龄，各组间ADG无显著差异(P＞0.05);从全期(1～42日龄)看，0.024%和0.240%FA组ADG显著高于0.012%FA组(P＜0.05)，CTC组与 FA各组无显著性差别(P＞0.05)。1～21日龄，0.048%FA组ADFI最低，显著低于其他各组(P＜0.05)，CTC组ADFI最高，显著高于0.012% ～0.120%FA组(P＜0.05);22～42日龄和1～42日龄，各组间ADFI无显著差异(P＞0.05)。关于饲料/增重，1～21日龄，对照组最高，显著高于0.048%和0.240%FA组(P＜0.05)，0.048%FA组最低，显著低于对照组、CTC组和0.012%FA组(P＜0.05);22～42日龄，各组间无显著差异(P＞0.05);从全期看，对照组和0.012%组最高，显著高于0.024%和0.240%FA组(P＜0.05)。可知，FA对1～21日龄肉仔鸡作用更加明显，0.024% ～0.240%FA可在一定程度上增加1～21日龄肉仔鸡ADG、降低ADFI和饲料/增重。

表2 饲粮中添加FA对肉仔鸡生产性能的影响Table2 Effects of dietary fulvic acid on performance of broilers

2.2 饲粮中添加FA对肉仔鸡血液抗氧化指标的影响

由表3可知，21日龄，各组血浆SOD活性差异不显著(P＞0.05);42日龄，0.048%FA组血浆SOD活性最高，显著高于对照组和CTC组(P＜0.05)。关于血浆MDA含量，42日龄，0.048%和0.120%FA组较对照组显著降低(P＜0.05)。关于血浆GSH-Px活性，21日龄和42日龄，各FA组有增加的趋势，但各组之间无显著差异(P＞0.05)。可知，0.048%FA组的血液抗氧化指标较好。

表3 饲粮中添加FA对肉仔鸡血浆抗氧化酶活性和丙二醛含量的影响Table3 Effects of dietary fulvic acid on plasma antioxidant enzyme activities and MDA content in broilers

2.3 饲粮中添加FA对肉仔鸡血液生化指标的影响

饲粮中添加FA对肉仔鸡血浆肝脏功能指标的影响见表4。各组21日龄和42日龄肉仔鸡血浆AST活性差异均不显著(P＞0.05)。21日龄，所有FA组肉仔鸡血浆ALT活性均低于对照组和金霉素组(P＜0.05)，0.240%FA组ALP活性显著低于0.048%FA组(P＜0.05);42日龄，各组血浆ALT和ALP活性差异不显著(P＞0.05)。42日龄，0.240%FA组血浆LDH活性显著高于其他各组(P＜0.05);0.120%FA组显著高于0.012%、0.024%、0.048%FA组和CTC组(P＜0.05)。21日龄，与对照组和0.120%FA组相比，0.240%FA升高了肉仔鸡血浆ALB含量(P＜0.05);42日龄，0.120%FA组显著高于0.012%FA组(P＜0.05)。21日龄，0.240%FA组血浆TBIL含量最高，显著高于对照组和CTC组(P＜0.05);42日龄，各组无显著差异(P＞0.05)。可知，饲粮添加0.240%FA对21日龄和42日龄肉仔鸡肝脏功能指标均有不良影响。

饲粮中添加FA对肉仔鸡血浆肾脏功能指标的影响见表5。21日龄，各组肉仔鸡血浆CRE含量差异不显著(P＞0.05);42日龄，0.240%FA组血浆CRE含量显著高于CTC组(P＜0.05)。FA对血浆UA含量无显著性影响(P＞0.05)。

3 讨论

3.1 饲粮中添加FA对肉仔鸡生产性能的影响

研究表明，腐殖酸可促进肉鸡[11，14]和肉鸭[15]增重、提高肉仔鸡弱雏成活率[11]、减少产蛋鸡死亡率[10，16]，改善肉鸡[17]和蛋鸡[10]的饲料效率。本试验中，FA的促生长作用主要体现在肉仔鸡生长前期，0.024% ～0.240%FA可在一定程度上增加ADG、降低ADFI和饲料/增重。饲料/增重随FA添加量增加而降低，与Yoruk等[16]在蛋鸡上的试验结果相类似。有研究报道认为，产蛋鸡饲粮中FA最佳添加剂量为2‰[18]，从本试验生产性能结果看，肉仔鸡饲粮中FA的适宜剂量在0.024%～0.240%。

3.2 饲粮中添加FA对肉仔鸡血液抗氧化指标的影响

正常机体的氧化损伤和抗氧化体系处于动态平衡，机体代谢产生的活性氧能不断地被抗氧化体系清除，以维持细胞氧化和还原稳态。研究表明，在低温胁迫或干旱条件下，FA能提高油菜或冬小麦SOD等抗氧化酶活性，促进植物生长，提高植物抗逆能力[19-20]。本试验结果表明，饲粮添加0.012%～0.048%FA在一定程度上提高了肉仔鸡血浆SOD和GSH-Px活性，其中0.048%FA组显著增加了42日龄肉仔鸡血浆SOD活性，显著降低了MDA含量。因FA结构复杂，其提高抗氧 化作用的分子机理尚待进一步研究。

表4 饲粮中添加FA对肉仔鸡血浆肝脏功能指标的影响Table4 Effects of dietary fulvic acid on plasma hepatic function parameters in broilers

3.3 饲粮中添加FA对肉仔鸡血液生化指标的影响

3.3.1 饲粮中添加FA对肉仔鸡血浆肝脏功能指标的影响

肝脏和肾脏分别是异源物质在机体进行转化和代谢的主要场所。血浆AST、ALT、ALP和LDH等酶类活性能反映肝脏细胞受损情况及严重程度。ALT和AST主要位于肝细胞胞浆水溶性部分或线粒体中，活性增高常提示肝细胞破坏、细胞膜通透性增强或线粒体损伤。本试验中，21日龄所有FA组肉仔鸡血浆ALT活性均显著降低，但AST活性无相同变化趋势，说明FA并非通过降低肝细胞膜的通透性减少ALT的漏出，而可能是通过加速血浆ALT的清除或抑制肝脏ALT活性和合成，降低血浆ALT活性，具体原因还有待进一步研究。LDH是一种糖酵解酶，广泛分布于机体各组织，肝脏中活性最大。本试验表明，0.240%FA显著升高了42日龄肉仔鸡血浆LDH活性，说明该剂量对42日龄肉仔鸡肝脏功能产生了不良影响。血浆ALB和TBIL含量分别是反映肝脏合成及排泄功能的指标，本试验中，0.240%FA组，21日龄肉仔鸡血浆ALB和TBIL含量显著升高，提示肝脏蛋白质合成能力及排泄功能受到影响。

表5 饲粮中添加FA对肉仔鸡血浆肾脏功能指标的影响Table5 Effects of dietary fulvic acid on plasma kidney function parameters in broilers

3.3.2 饲粮中添加FA对肉仔鸡血浆肾脏功能指标的影响

CRE是肌肉中磷酸肌酸的终末代谢产物，不能被重吸收，经肾小球过滤后排出体外。血浆CRE的浓度变化反映了肾小球的滤过能力。尿酸是嘌呤代谢的终产物，主要通过肾脏排出。本试验中，与对照组相比，FA对肉仔鸡血浆CRE和UA含量无显著影响，说明饲粮添加0.012%～0.240%的FA对肉仔鸡肾脏功能无显著影响。与CTC组相比，0.240%FA显著升高了42日龄肉仔鸡血浆CRE含量，但UA含量无显著差异，说明二者可能对内源CRE生成的影响不同，具体机制有待进一步研究。

4 结论

① FA对1～21日龄肉仔鸡作用较明显;0.024%～0.240%FA可在一定程度上增加ADG、降低ADFI和饲料/增重。

②0.048%FA能显著增强42日龄肉仔鸡血浆SOD活性，降低MDA含量;0.240%FA添加剂量会对肝脏功能有不良影响，但生产性能和抗氧化指标无显著变化。

③综上，建议FA在肉仔鸡饲粮中添加量低于0.240%。

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