补肾益心汤对自发性高血压大鼠血管内皮功能损伤的干预作用

冉 旭 陈 立 吕 波

(1广州中医药大学，广州，510405;2中山市中医院，中山，528400;3贵阳中医学院第一附属医院，贵阳，550001;4贵阳中医学院，贵阳，550002)

高血压是最常见的心血管疾病之一，其引起的血管结构及功能障碍是引起心血管事件发生和发展的主要危险因素，严重影响着人们的生命与健康，成为当前人类主要死亡原因之一，高血压可导致内皮功能受损出现功能失调，而内皮功能失调反过来可以加速高血压的发展进程，因此高血压治疗强调改善血管内皮功能［1］，大量研究表明血管内皮受损和内皮功能减退与高血压的发生及发展密切相关［2］，同时研究证实一氧化氮(NO)，内皮素(ET)等血管内皮因子在维持血管内皮功能中发挥重要作用［3］，对维持和恢复正常血管内皮功能对于防治高血压具有重要意义，因此，本研究应用补肾益心汤干预自发性高血压大鼠(SHR)，旨在探讨补肾益心汤对自发性高血压大鼠血管内皮功能损害的干预情况作用。

1 材料与方法

1.1 材料 健康自发性高血压大鼠40只(雌雄不拘，体重150～200 g)，由广州中医药大学实验动物中心提供;大鼠饲料由广东省医学实验动物中心提供;一氧化氮(NO)测定试剂盒由南京弘阳生物技术有限公司提供;内皮素(ET)测定试剂药盒由解放军总医院东亚免疫技术研究所提供;酶标仪为瑞典linBio128C型。

1.2 方法

1.2.1 分组 健康自发性高血压大鼠40只，实验前适应性饲养10 d，饲养条件:室温(22±4)℃，相对湿度(58% ±6%)，光照与黑暗循环时间为12 h，饮水不限。40只自发性高血压大鼠按随机数字表法分为空白对照组、补肾益心汤大、中、小剂量组共4组，每组10只，各组均喂饲富含多种维生素及微量元素的基本饲料，补肾益心汤组大、中、小剂量组在喂饲基本饲料的基础上每日加喂补肾益心汤15 mL，10 mL，5 mL，(主要由桑寄生30 g、女贞子15 g、墨旱莲15 g、仙茅12 g、淫羊藿15 g、益母草15 g、泽泻15 g、豨莶草15 g、地骨皮30 g、杜仲15 g组成)，各组动物每日进食总量相等，限制为100 g，分2次，1次/12 h。动物分笼饲养，自由饮水，实验周期为8周。

1.2.2 NO、ET水平测定 于试验前、8周末大鼠鼠尾动脉采血5 mL，注入含有2 g/L EDTA－Na2 30 μL和抑肽酶40 μL试管中混匀，40℃ 3 kr/min离心10 min，分离血浆，立即冻存于－70℃低温冰箱中备测，测量前将样本置室温下复融，再次40℃，3 kr/min离心5 min，取上清液，NO测定采用硝酸还原酶法;ET－1测定采用放射免疫法;具体方法严格按说明书进行，所有操作均由专人严格按规程进行。

1.2.3 鼠尾血压测定 分别于实验前后测定各组大鼠血压，将大鼠置于大鼠血压计的保温箱内加温10 min(37℃)左右，待尾动脉充分扩张，鼠尾套入套袖，动物安静后充气，测定血压，重复3次，取其均值。

1.2.4 统计学处理 使用SPSS 16.0统计软件进行分析，连续变量用(s)表示。组间连续变量之间的比较采用方差分析;组内连续性变量之间的比较采用配对t检验;所有分析都采用双侧检验法，检验水平α取0.05，P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 4组实验前后鼠尾收缩压比较 表1示，实验前4组组间比较差异无统计学意义(P＞0.05)，实验后4组组间比较差异有统计学意义(P＜0.05)，且大剂量组血压降低更明显，与其他3组比较差异有统计学意义(P＜0.05)。

表14 组实验前后收缩压水平比较(s，mmHg)

表14 组实验前后收缩压水平比较(s，mmHg)

注:与同期其他各组比较，*P＞0.05，#P＜0.05。

实验分组 实验前 实验后 P值0.666小剂量组 205.1±18.4 189.8±12.0 0.007中剂量组 203.0±16.2 181.1±11.39 0.002大剂量组对照组 208.6±21.2* 205.5±7.56#200.3±21.8 177.0±10.59 0.001

2.2 4组实验前后NO、ET水平比较 表2示，4组实验前NO、ET水平差异无统计学意义(P＞0.05)，实验后，药物大、中、小剂量组NO水平显著增高，ET水平显著降低，而大剂量组更为明显，差异有统计学意义(P＜0.05)，而对照组NO、ET水平前后无明显变化。

表24 组NO、ET水平变化情况比较(s)

表24 组NO、ET水平变化情况比较(s)

注:组内前后比较，*P＜0.05;组间同期比较，#P＜0.05。

对照组 41.73±3.91 68.08±3.29 40.86±3.8*#63.88±8.16*#小剂量组 42.88±1.48 67.61±8.04 63.41±14.8 54.51±4.85中剂量组 42.13±4.59 69.37±12.29 66.46±13.5 54.80±5.33大剂量组 43.23±3.36 66.27±5.56 79.4±14.41 42.22±4.62

3 讨论

随着人民生活水平的提高和生活节奏的加快，心血管疾病的发病率不断升高，已经严重威胁了人类的生活和健康，高血压引起的心脏和血管结构及功能障碍是引起心血管事件发生和的主要危险因素，严重影响着人们的生命与健康，成为当前人类主要死亡原因之一，文献表明［4］，血压的增高与心血管事件的发生呈正向关系，血管内皮功能与高血压的相关性研究已成为心血管领域研究的热点，血管内皮细胞功能紊乱被认为是高血压患者的一个重要病理生理特征［5］，而完整的内皮系统在维持血管张力调节方面发挥重要作用，研究证实血管内皮细胞是沿着血管内面呈单层排列的组织细胞，它不仅具有分隔血液与间质组织的屏障功能，还通过分泌多种血管活性物质调节血管张力、维持凝血与纤溶的平衡以及防止血小板黏附及血栓形成，调节血管平滑肌细胞的增殖及迁移［6］，在调节心血管功能、维持心血管稳态中发挥重要作用［7］。有研究显示NO和ET－1的分泌失衡是导致高血压的重要影响因素［8］。NO为主要的扩血管物质，有强大的舒张血管的作用，抑制NO的基础释放，可引起外周血管收缩，导致血压升高［9］，研究表明，内皮来源的血管活性物质在血压调节中起着重要作用，其中一氧化氮(NO)和内皮素－1(ET－1)在血压调节中的作用尤为重要［10］，因此，监测这些内皮标志物能够有效的评价血管内皮功能，与此同时，在高血压、冠心病等疾病的治疗中发现，针对改善内皮功能的治疗往往能够取得显著的治疗效果［11］，改善血管内皮功能对高血压的早期诊疗及预后估计等都具有重要意义。

中医药防治内皮细胞损伤是目前较为关注的领域，许多研究证实，中医药对血管内皮细胞有着较为理想的调控作用，研究证实黄芪多糖能够干预内皮细胞炎症黏附作用，保护内皮功能［12］、黄芪多糖对血管内皮细胞有明显保护作用，呈剂量依赖性增强内皮细胞活性、增加NO释放、抑制细胞ET释放、增加胞内游离钙浓度［13］。中医学没有高血压病名，对此类病症大多属于中医学“眩晕、头痛”范畴，高血压病位以肝、肾，始终都有肝肾阴虚，水不涵木，随着中医药对高血压病研究的不断深入，肯定了高血压病的病位主要为肝、肾两脏，根源在肾，且涉及心、脾，其病机为本虚标实、肾气亏虚、精髓不足、水不涵木、肝阳上亢，阳化风动，气血上升［14］，进而导致五脏功能失调［15］，所以多数情况下，肾虚是高血压病的始动因素。补肾益心汤由广州中医药大学第一附属医院吴伟教授根据多年诊治高血压病的临床经验，结合现代中药药理研制而成的，临床上对于高血压病有很好的疗效，主要由桑寄生、女贞子、泽泻、杜仲等药物组成，按照补肾、益心、清肝、利尿的治则制定的，全方组方严谨，选药精当，作用肯定，且简单、安全、无毒副反应，研究发现补肾益心汤所包含的单味中药桑寄生通过调节血清激素水平、血管活性物质的释放及碱性成纤维细胞生长因子的含量，达到保护中小动脉内皮细胞，逆转平滑肌细胞增殖，对抗动脉粥样硬化的效果，对高血压所致的心、脑、肾病变有积极的治疗和预防作用［16］。研究表明杜仲糖苷能明显降低血压，具有抗氧化和自由基清除作用，能保护细胞膜不受氧化，其作用机制可能是降低血浆ET水平，升高血浆NO水平，调整体内ET与NO平衡状态，减轻血管内皮损伤，松弛血管平滑肌，从而达到降低血压保护内皮细胞和心、脑、肾等靶器官损害的作用［17］;同时现代药理研究证实，泽泻有降压、缓和血管硬化，利尿功用，减少血容量，进而减弱RAAS活性，使循环AngⅡ含量下降而实现降压效应，种种迹象表明补肾益心汤可能对高血压损伤的血管内皮功能存在某种程度的干预作用，从而在冠心病防治中发挥一定效应，本研究结果显示补肾益心汤大、中、小剂量组与对照组比较，能够显著增加血一氧化氮水平，而降低血中内皮素水平，改善自发性高血压大鼠内皮功能，降低自发性高血压大鼠血压，而这种降压作用可能与其改善血管内皮舒缩功能有关，改善高血压的预后，对高血压的治疗大有裨益。

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