乳腺肿瘤超声弹性成像与肌成纤维细胞分布的相关性及临床意义

金孟英 殷咏梅

1.浙江省青田县人民医院，浙江青田 323900；2.南京医科大学，江苏南京 210029

乳腺癌在妇科中属于常见疾病，在临床中具有较高的发病率，严重的影响女性的身体健康，尽早的诊断和治疗，对提高乳腺肿瘤患者的生活质量具有较大的意义[1]。本研究对乳腺肿瘤的超声弹性成像和肌成纤维细胞的分布情况进行深入的探究，判断其是否能够准确的乳腺肿瘤，从而为临床尽早诊断乳腺肿瘤和治疗提供参考，具体分析如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取浙江省青田县人民医院（以下简称“我院”）2010年1月～2011年6月治疗的乳腺肿块患者200例。乳腺良性病变 98 例为良性组，年龄 30～68 岁，平均（54.3±2.4）岁，其中纤维腺瘤患者60例，硬化性腺病患者20例，导管内乳头状瘤患者18例；乳腺癌病变102例为恶性组，年龄为34～79岁，平均（53.8±2.6）岁。两组患者一般资料比较差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 超声检查方法 本次研究选取EUB-8500型彩色多普勒超声诊断仪，且配备彩色超声弹性成像技术，探头的频率7.5～13.0 MHz。本研究所有患者均在术前给予常规超声诊断和超声弹性成像检查，其中主要包括肿瘤的置和大小以及纵横比与形态、边界等，对超声弹性成像检查情况进行评分，并将检查的图片进行保存，由2名至少工作10年以上且经验丰富的医师进行观察与判断[2]。

1.2.2 免疫组织化学法 本次研究对于乳腺间质CD34和平滑肌肌动蛋白（SMA）表达采取免疫组织化学进行检测[3]。首先，将选取的新鲜活检组织给予10.0%甲醛进行固定，并采取梯度酒精进行脱水处理，采取二甲苯透明和石蜡的包埋处理。然后，将石蜡切片进行HE染色，并且在每张切片滴加相应对应的一抗CD34和SMA。最后，进行DAB显色和苏木精复染处理，并在显微镜下进行观察与判断。

1.3 评定标准

1.3.1 弹性成像评分 本次研究对于弹性成像评分主要采取7分法进行评估[4]：①1分：肿块的整体显示为绿色；②2分：肿块显示为绿色与蓝色相间，且呈现马赛克的形状，主要以绿色为主；③3分：肿块的中心显示蓝色，而周边显示为绿色；④4分：肿块显示为绿色与蓝色相间，且呈现马赛克的形状，主要以蓝色为主；⑤5分：肿块完全呈现蓝色；⑥6分：肿块的周边和肿块的内部均呈现蓝色，只有肿块内部出现小区域的绿色；⑦7分：肿块的周边均呈现为蓝色。恶性：弹性成像评分＞5分；良性：弹性成像评分≤5分。

1.3.2 CD34和α-SMA光镜观察方法 在高倍的光学显微镜下进行随机的选取10个视野（400×）进行观察，并且每个视野选取计数100个细胞，并采取双盲法进行观察[5]。①0分：染色细胞计数＜5.0%；②1分：染色细胞计数5.0%～＜25.0%；③2分：染色细胞计数 25.0%～＜75.0%；④3分：染色细胞计数≥75.0%。而阳性细胞染色的强度：①0分：细胞不显色或者显色不清；②1分：细胞显示为浅黄色；②2分：细胞显示为棕黄色；③3分：细胞显示为深棕色。总积分=（染色细胞计数的评分+染色强度的评分）/2。（-）：积分＜0.5分；（+）：积分在 0.5～1.5 分之间；（++）：积分＞1.5 分。

1.4 统计学方法

采用统计软件SPSS 19.0对数据进行分析，正态分布计量资料以均数±标准差（±s）表示，两独立样本的计量资料采用u检验；计数资料以率表示，采用χ2检验。相关性采取Spearman分析。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 弹性成像评分

恶性组的弹性成像中观察肿块均显示为蓝色，评分为（7.0±0.3）分，而良性组的弹性成像中观察肿块大部分显示为绿色，肿块内部显示极少的蓝色，评分为（2.2±0.4）分，两组比较差异有统计学意义（u=11.2013，P＜0.05）。

2.2 CD34和α-SMA定位

良性组中CD34蛋白主要定位于细胞质中，α-SMA蛋白主要定位于导管肌的上皮细胞中；在恶性组中CD34蛋白主要定位于血管中，α-SMA蛋白主要定位于细胞质中。

2.3 CD34和α-SMA表达

恶性组CD34表达水平低于良性组，而α-SMA表达水平明显高于良性组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 两组患者CD34和α-SMA表达水平对比分析（例）

2.4 CD34和α-SMA表达与弹性成像相关性分析

CD34表达和弹性成像呈负相关性（r=-0.124，P＜0.05）；α-SMA表达和弹性成像呈正相关性（r=0.132，P＜0.05）。

3 讨论

超声弹性成像是一种新型的超声诊断技术，这种诊断技术比传统的超声诊断更加全面，能够对肿瘤和扩散疾病进行成像观察[6]。在临床中已经应用到乳腺和甲状腺以及前列腺等疾病的诊断中，而且具有较好的诊断效果[7]。临床中采取这种诊断方法中形成的弹性成像主要是因肿瘤的硬度不同而产生的一种差异，继而显示不同的图像[8]。这种诊断方法主要是依据不同组织间的弹性系数和组织发生变形的程度进行超声探测，并将其转变为实时的彩色图像[9]。一般弹性系数越小，受压程度大则显示为红色；而弹性系数越大，受压程度小则显示为蓝色；弹性系数处于中等水平，一般显示为绿色。因此，临床中常常采取图像的色彩进行判断组织的硬度情况。这种诊断方法有效的拓宽了传统超声诊断的不足，并更形象和生动的显示病变。

随着人们对乳腺肿瘤的不断研究，发现癌间质中的肌成纤维细胞是决定整个肿瘤硬度的重要因素[10]。而且其生物的学特性也不同于正常乳腺组织中的间质成纤维细胞。因此，临床中可以依据α-SMA的表达情况进行判断肌成纤维细胞是否在肿瘤中，从而判断其在肿瘤中的分布特征[11]。因此，临床中分析α-SMA的表达与超声弹性成像的相关性，即可了解肌成纤维细胞和超声弹性成像之间的关系。由于在α-SMA也有可能在其他的组织中得到表达，因此需要进一步的采取辅助指标进行观察，从而更好的定位。而CD34属于一种穿膜的糖蛋白，一般主要出现造血前驱细胞和内皮细胞等[12]。临床中有资料显示，在乳腺癌间质细胞中CD34将失去表达，而α-SMA将得到大量的表达，并且向肌纤维细胞进行分化。同时也有资料显示，在硬化性乳腺疾病中，CD34蛋白将得到大量的表达，且分布在纤维细胞中。因此，本次的临床研究选取CD34和α-SMA进行综合评估，从而避免干扰[13]。

通过本次的临床研究分析，在良性组中CD34蛋白主要定位于细胞质中，α-SMA蛋白主要定位于导管肌的上皮细胞中；在恶性组中CD34蛋白主要定位于血管中，α-SMA蛋白主要定位于细胞质中。由此分析，在乳腺恶性肿瘤中α-SMA蛋白得到大量的表达，进一步的分析出肌成纤维细胞在乳腺恶性肿瘤中得到大量的表达。并且本组的资料还显示，CD34的表达和弹性成像呈现负相关性（r=-0.124，P<0.05）；α-SMA的表达和弹性成像呈现正相关性（r=0.132，P<0.05）。由此分析，在乳腺肿瘤中超声弹性成像的评分越高，则表示α-SMA蛋白在乳腺肿瘤中得到大量的表达[14]。进一步的分析，超声弹性成像的评分越高，则表示肌成纤维细胞在乳腺肿瘤中得到大量的表达。因此，临床中可以采取超声弹性成像进行判断肌成纤维细胞的分布情况。由于肌成纤维细胞属于非转化的细胞，常常和肿瘤细胞相比，该细胞的基因组相对比较稳定，且不容易出现抗原丢失的情况发生。因此，这也为临床中治疗乳腺肿瘤提供新的思路。

综上所述，临床中可以采取超声弹性成像进行判断肌成纤维细胞在乳腺肿瘤中的表达情况。而且超声弹性成像能够为临床中乳腺癌的肌成纤维细胞靶向治疗提供科学的依据，并且对乳腺肿瘤的预后也具有一定的意义[15]。因此，超声弹性成像技术对于乳腺肿瘤的诊断和临床治疗均具有一定的意义。

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