甘油化时滴速对冰冻解冻去甘油红细胞质量影响

柴婷婷

甘油化时滴速对冰冻解冻去甘油红细胞质量影响

柴婷婷

目的 对本站制备冰冻解冻去甘油红细胞方法进行探索, 并对其质量进行分析评价。方法 随机抽取本站红细胞悬液4℃保存9 d以内20u,随机分成甲组10u, 加甘油速度40滴/分和乙组10U加甘油速度120滴/min, 分别进行甘油化, -80℃冰冻及用ACP215全自动血细胞处理仪解冻。甘油化处理, 进行质量检测：甲组游离血红蛋白(0.14±0.05) g/L；乙组游离血红蛋白(1.01±0.02) g/L, 两组差异有统计学意义, (P＜0.01),甲乙两组其他指标符合国家标准, 差异均无统计学意义。结论 本站制备冰冻解冻去甘油红细胞的方法高效高质, 值得推广。

冰冻红细胞；冰冻解冻去甘油红细胞；全自动血细胞处理仪

成分输血在我国已经广泛开展, 其中Rh(D)阴性血的用量逐年增加, Rh(D)阴性血比例在我国汉族人群仅占(0.3~0.5%)［1］, 超低温甘油化冰冻保存红细胞作为血站平时贮备, 一旦临床急需可立即进行解冻洗涤, 即极大方便了临床用血, 又保证抢救生命时间, 而甘油化制备冰冻解冻红细胞是长期保存Rh(D)阴性血最理想方法, 作者按加甘油时不同滴速分成甲、乙两组, 检测洗涤后质控指标, 对冰冻解冻去甘油红细胞制备方法进行探索, 并对其质量进行评价。

1 材料与方法

1.1 试剂与耗材 复方甘油试剂(北京博德桑特)、三珠袋(北京博德桑特)、ACP215红细胞洗涤耗材(美国血技)、9%氯化钠(北京博德桑特)、0.9%氯化钠(山东威高)、输血器(江西洪达)、贺利氏6000I离心机(德国)、三洋-80℃速冻冰箱(MDF－U32V型、日本)、调速多用振荡器(HY－4型、金坛市)、电热恒温水浴箱(HHW21－600型、天津)、无菌接驳机(SC-201型、日本)、钨酸钠(天津化学试剂四厂)、氢氧化钠(天津博迪化工)、乙二醇(天津富宇精细化工)、无水乙醇(沈阳华东试剂厂)、稀释液(希森美康医用电子有限公司)、酚酞(沈阳华东试剂厂)、高碘酸钠(天津福晨化学试剂厂)、血浆游离血红蛋白试剂盒(北京瑞尔达生物科技)、溶血剂(希森美康医用电子有限公司)。

1.2 取样 用本站检测红细胞悬液4℃保存9 d以内20 U,随机分成甲组10 U, 乙组10 U。

1.3 冰冻红细胞制备 取9 d内红细胞悬液各20 U, 经2200转, 25 min离心后, 分出上清, 转移至三珠袋, 通过无菌接驳机与输血器相连接, 加入57%复方甘油溶液, 振荡器60次/ min, (甲组滴速40滴/min, 加5min后静止5min再继续加入,仍是40滴/min, 至加甘油完毕；乙组滴速120滴/min, 匀速加完, 不需静止)排尽空气, 室温平衡放置30min, 纸盒装入后放在-80℃保存一个月后待用。

1.4 冰冻解冻去甘油红细胞制备 保存一个月后, 冰冻红细胞从-80℃冰箱取出立即放入37~42℃恒温水浴箱中溶化, 4~6 min/(袋·U), 启动ACP215全自动血细胞处理仪, 应用去甘油化程序洗涤, 用9%氯化钠80ml、0.9%生理盐水2000 ml, 解冻洗涤过程大约60 min。

1.5 质量标准 红细胞回收率≥80%, 白细胞残留率≤1%,血小板残留率≤1%, 甘油含量<10g/L, 血浆游离血红蛋白含量≤1g/L, 体外溶血≤50%。

1.6 统计学方法 计数资料以(x±s)表示, 两组采用t检验, P＜0.05为差异有统计学意义。见表1。

表1 两组结果差别比较

2 结果

3 讨论

冰冻解冻去甘油红细胞在制备过程中, 冰冻红细胞制备是质量的前提, 冰冻与解冻洗涤过程操作必须严格按照操作规程进行, 减少红细胞损失［2］。甘油的加入能使红细胞膜受到很大冲击, 渗透压逐步达到平衡很重要, 如果在加入甘油时先40滴/分, 加5 min后静止5 min再继续加入40滴/min,使红细胞膜渗透压能得到很好的平衡, 甲组以可间歇再加入方式每次为40滴/min, 是本站经过实践检验后确立的操作方法；乙组为设立对照组加入甘油滴速120滴/min, 其余条件相同, 甲组游离血红蛋白(g/L)为0.14±0.05, 乙组游离血红蛋白为(1.02±0.04) g/L, 两组差异具有统计学意义, (P＜0.01),实验证明, 过快的加入甘油, 使红细胞膜受到强烈刺激, 血与甘油混合后渗透压得不到很快平衡, 很容易产生溶血, 使血液制备质量得不到保证, 所以作者认为加甘油时滴速的保证起到关键作用。

［1］ 邱艳.全血成分血质量要求与血液标准化.北京:中国标准出版社, 2002.

［2］ 安万新,于卫建.输血技术学.北京:科学技术文献出版社, 2010: 152.

130033 长春市中心血站