山区散养柴鸡球虫感染率的调查分析

2013-08-27薛勇姚学军吕艳秋刘洁李荣华康晓杰北京市昌平区动物疫病预防控制中心

中国畜牧业 2013年13期

文│薛勇姚学军吕艳秋刘洁李荣华康晓杰（北京市昌平区动物疫病预防控制中心）

鸡球虫病严重危害养鸡行业，一年四季均可暴发。少量感染仅引起不易察觉的损伤，而且可使鸡产生保护性免疫，在临床上称为球虫感染。当大量的球虫卵囊感染鸡只时，可引起明显的症状，称为球虫病。所有日龄和品种的鸡对球虫都易感，尤其21～45日龄的雏鸡最易感，如果治疗不及时，死亡率可高达80%。病愈的雏鸡，生长发育受阻，饲料报酬率下降，抵抗力降低，易患其他疾病。带虫鸡可通过粪便造成传播。

昌平区位于北京市西北部，山区、半山区占全区总面积的2/3。近年来旅游业的兴旺促进了山区林地散养柴鸡事业的发展。为了摸清昌平区山区散养的柴鸡感染球虫病的情况，我们对散养柴鸡较集中的山区镇进行了球虫抗体抽测，意义在于摸清球虫病在该区感染的范围和程度，并制定有效防治对策。

一、材料

1.被检样品来源。随机抽检昌平辖区内三个山区镇的8个养殖户的散养柴鸡，日龄在120～300天，每户抽样10只左右，共计85份鸡血样品。

2.待检血清的准备。将采得的鸡血，放于37℃恒温箱4小时，待血清全部析出之后进行分离、封存、待检。

3.检测试剂。鸡球虫抗体酶联免疫（ELISA）试剂盒，购自北京中寰宇神生物科技有限公司。

二、检测方法及判定

1.检测方法。本ELISA检测方法，应用双抗原夹心法测定标本中鸡球虫抗体水平。

2.方法原理。用纯化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被单抗的微孔中依次加入球虫抗体（待检血清），再与HRP（标记的抗原）结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加TMB（底物）显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的球虫抗体呈正相关。用酶标仪在450纳米波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中鸡球虫抗体浓度。

3.检测步骤。具体操作按试剂盒说明书进行。

4.结果判定。

（1）用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

（2）样品浓度＞147纳克/升为抗体阳性；浓度＜147纳克/升为抗体阴性；浓度＝147纳克/升为可疑。

三、球虫抗体检测结果

本次试验，鸡群日龄在120～300天，共计抽检8户林地柴鸡散养户，检测鸡85只，检测结果如下（见表1、表2）。

在表1中，5个标准品分别位于A1、B1、C1、D1、E1孔，并在A2、B2、C2、D2、E2孔做一组平行对照。取每个标准品检测的双孔结果平均值为该标准品检测浓度，从表1可以看出，检测浓度与试剂盒提供的浓度符合率100%，试验结果成立。

样品检测按照说明书要求采用单孔检测，检测结果浓度值均＜147纳克/升，检测结果全部为球虫抗体阴性。

由表2可见，抽检的这8个柴鸡散养户的85份血样，球虫抗体皆为阴性。

四、检测结果分析

本次试验共检测了85份样品，分别来自三个山区镇的8个柴鸡散养户，饲养方式为散养，鸡群日龄分别在120～300天之间，本次抽取的样品检测鸡球虫抗体结果全部为阴性，究其原因，笔者认为有以下几点：

1.鸡雏优质。经流行病学跟踪调查，鸡雏购自未发生过球虫污染的种鸡场，在种蛋、孵化、运输等环节均经严格管理、消毒。

2.饲养环节。林地面积较大，每亩放养100～150只，并设有围栏，封闭管理，实行全进全出制；在饲养环节，尤其是21～45日龄，即球虫易感期，养殖户在饲料中添加了抗球虫的预防药物。

3.养殖环境优越。本次抽检的养殖户分布在山区镇，养鸡场地全部在山上或树林间，养鸡年限较短（1～3年），球虫对养殖场地污染较少；另柴鸡散养活动区域较大，大约0.3公顷为一个牧区，饲养密度小，受日光紫外线、高温、空气流通等因素影响，寄生虫、病菌、病毒等病原微生物不易存活；外界环境相对于室内环境更为优越，鸡与鸡之间的疾病传播大大降低。