脑安片治疗脑梗塞的有效性和安全性评价研究

王 昆 潘 琛 裴明砚

（哈药集团三精制药股份有限公司·150069）

脑梗死（CI）又称缺血性脑卒中（CSI），是指局部脑组织因血液循环障碍、缺血、缺氧而发生的软化坏死，主要由于供应脑部血液的动脉出现粥样硬化和血栓形成，是管腔狭窄甚至闭塞，导致局灶性急性脑供血不足而发病；也有因异常物质沿血液循环进入脑动脉或供应脑血液循环的颈部动脉，造成血流阻断或血流量骤减而产生相应支配区域组织软化坏死者。由于脑卒中对老年人是重要的死亡或致残原因，在世界与我国人口老龄化趋势日益加速的情况下，脑卒中的危害性亦必然日益突出，因此脑卒中的防治已成为卫生工作中的一项重要课程，越来越引起国内外医学界特别是神经科学界的重视。哈药集团三精制药股份有限公司研制生产的脑安片（国药准字Z19991034）主要成分为人参、川芎、当归、红花、冰片等，具有活血化瘀，益气通络的功效，应用于脑血栓形成急性期，恢复期气虚血瘀症候者，症见急性起病，半身不遂，口舌歪斜，舌强语蹇，偏身麻木，气短乏力，口角流涎，手足肿胀，舌暗或有瘀斑，苔薄白等。本文根据国家食品药品监督管理局相关中药品种保护法规要求而进行脑安片有效性和安全性评价试验研究工作。

1 材料与方法

1.1 药物

脑安片，批号为960410，由哈尔滨市汉方药物研究所提供。本品片重0.5g。含生药材为2.4g/片。临床用量为一日二次，每次2 片。

脑安胶囊，批号：950801，辽源市亚东制药厂生产。

1.2 动物

清洁级SD 大鼠，雄性65 只，体重（280±20）g，吉林大学白求恩医学院动物实验中心提供。合格证号：SCXK-（吉）2007-0003。

家兔，雄性16 只，体重2.0～2.5kg，哈尔滨市华宇养殖场提供。合格证号：SCXK 黑2007003。

1.3 主要试剂与仪器

戊巴比妥钠（Serva 公司产品），5,-腺苷二磷酸单钠盐（ADP.Na）（中国科学院上海生物化学研究所上海东风生化技术公司提供）。压力换能器、电磁流量计、八道生理记录仪。

1.4 方法

1.4.1 动物急性毒性实验 取体重18～20g 的小白鼠20 只，雌雄各半。实验前将小鼠禁食不禁水12 小时，每只小鼠灌胃给以60%(已达最大浓度)药液0.8ml/20g 体重。观察给药后7日内动物毒性反应及死亡情况。

1.4.2 抗大白鼠实验性血栓形成实验 实验前以2%羟甲基纤维素钠溶液配制成1%、3%、10%的药液供试验用。试验选用雄性Wistar 大白鼠，参照Umetsu 等和徐理纳等方法，将实验动物随机分为五组，空白组，给予2%羟甲基纤维素钠溶液，阳性对照组，给予脑安胶囊（300mg/kg），实验组给予脑安片（30、100 和300mg/kg），连续灌胃给药10d，末次给药1h 后，3%戊巴比妥钠麻醉，分离右颈部动脉及左颈外静脉，取三段聚乙烯塑料管，其中二段二根内径为1.5mm，长约10cm，中段一根内径为2mm，长约8.5cm，在三段聚乙烯管的中段放入一根长约6.5cm 的4 号手术丝线，将肝素生理盐水溶液充满聚乙烯管腔内，当塑料管的一端插入左颈外静脉后，将管的另一端插入右颈总动脉，手术完成后，立即开放血流。15min 后中段血流，迅速取出丝线称重，总重量减去线重为血栓湿重，以mg 计算。

1.4.3 脑安片对家兔脑血管阻力的影响 选用2～3kg 健康家兔，雄性，3.5%戊巴比妥钠35mg/kg iv 麻醉，分离右侧颈总动脉，锁骨下动脉及椎动脉，分离并结扎内乳房动脉，颈深动脉，肌支，肝素按10mg/kg 抗凝后，作颈总动脉插管，连接压力换能器，分离左侧股动脉并插管，另端连接硅缘胶管，经恒速蠕动泵后，再接玻璃T 形管。管侧壁连接另一压力换能器测定椎动脉压力，管的另一端接硅胶管及聚乙烯插管，该管经锁骨下动脉逆行插至椎动脉开口处，开动电子横流泵引股动脉血恒速灌注椎动脉，最后结扎锁骨下动脉的近心端即根部，将颈总动脉压力（ABP）和椎动脉压力（VAP）均同步输入八道生活记录仪上，观察比较脑安片对脑血管阻力和血压的影响，在保温（近体温）条件下，调横流泵使脑血管阻力与血压相近（即调正进入脑血流量接近动物自然状态），椎动脉压力曲线稳定10min 后，通过埋入十二指肠的导尿管给药，受试药物与阳性药物、空白组给药体积均控制在0.5ml/kg 等体积注入，注速5sec，观察并记录给药后10，20，30，50，60min 时的变化值。

1.5 统计学处理

2 结果

2.1 脑安片安全性评价

实验结果表明，经14日内连续观察小鼠无一只死亡，一般状态、饮食、排泄物均正常，毛色光泽佳，未见神经兴奋、抑制等异常反应症状出现。脑安片对小鼠灌胃急性毒性试验的最大给药量为24g/kg，相当于人临床用量的840 倍。

2.2 脑安片对大鼠在体血栓形成的影响

实验结果表明，脑安片高、中剂量组，脑安胶囊阳对药组明显抑制大鼠在体血栓形成，血栓形成速度和空白组比较明显减慢，血栓湿重减轻，抑制率分别为47.7%、39.2%和48.6%，与空白组比较有显著性差异P ﹤0.01。脑安片低剂量组对血栓形成无影响。结果见表1。

表1 脑安片对大鼠血栓形成的影响（±SD）

表1 脑安片对大鼠血栓形成的影响（±SD）

与空白组比较▲P<0.05 ▲▲P<0.01

组别 剂量（mg/kg） 鼠数（只）血栓湿重（mg） 抑制率（%）空白 — 10 32.9±8.1 —脑安片 30 10 32.4±5.9 1.5 100 10 20.0±8.2▲ 39.2 300 10 17.2±6.6▲▲ 47.7脑安胶囊 300 10 16.9±9.2▲▲ 48.6

2.3 脑安片对家兔脑血管阻力的影响

实验结果表明：脑安片能明显降低家兔椎动脉阻力，增加脑血流量，改善脑部微循环，与脑安胶囊作用相似。其中脑安片高、中、低剂量组于给药10 分钟后可使家兔脑血管阻力分别达到99±2、89±4、84±5mmHg，与空白组相比有显著差异P ﹤0.01。 脑安片对家兔血压影响的实验表明，给药10 分钟前后，3 个剂量组家兔的血压分别99±4、95±6、96±4 和99±3、95±4、97±3，无统计学差异，给药20、30、50、60 分钟后的结果与给药前相比之无差异。该实验表明脑安片对脑血管有选择性扩张作用，在降低脑血管阻力的同时，对外周血压几乎没有影响。结果见表2、3。

表2 脑安片对家兔脑血管阻力的影响（±SD）

表2 脑安片对家兔脑血管阻力的影响（±SD）

与空白组比较▲P<0.05 ▲▲P<0.01

血管阻力（mmHg）组别剂量（mg/kg）动物数（只）给药前10 20 30 50 60空白 — 10 112±3 103±5 108±4 110±4 113±2 115±3脑安片 1 10 114±4 99±2▲▲108±3▲114±2 114±3 114±4 3 10 110±3 89±4▲▲98±2▲▲109±3 108±5 110±3 10 10 112±2 84±5▲▲91±5▲▲111±3 112±4 112±3脑安胶囊 10 10 111±3 83±3▲▲92±4▲▲97±3▲102±5▲110±2

表3 脑安片对家兔血压的影响（±SD）

表3 脑安片对家兔血压的影响（±SD）

与空白组比较▲P<0.05 ▲▲P<0.01

药后血压（mmHg）10 20 30 50 60空白 10 110±3 111±4 111±3 111±4 110±5 110±2脑安片 1 10 99±4 99±3 98±3 98±5 99±3 97±2 3 10 95±6 95±4 94±2 93±5 94±2 94±5脑安胶囊 10 10 96±4 97±3 97±2 96±4 96±3 96±3组别剂量（mg/kg）动物数（只） 给药前

3 讨论

脑血管疾病的分类，目前尚未统一。有按病程分为急性脑血管病和慢性脑血管疾病，有按病变性质分为出血性脑血管疾病和缺血性脑血管疾病，还有按病程进展分为暂性脑缺血发作、可逆性缺血性神经功能缺失、进展性脑卒中、完全性脑卒中。脑安片中所含冰片具有辛香走窜之性，以开窍醒神为主要作用，其中的异龙脑成分能够提高血液的脂溶性，血液中的脂溶性越高，药物更加容易穿透血脑屏障，从而增强了心脑血管药物的治疗作用。此外冰片对中枢神经兴奋性有双向调节作用，既能“镇静安神”，又有醒脑作用。能缩短戊巴比妥钠持续睡眠时间，还能延长苯巴比妥钠入睡时间，兴奋中枢神经的作用，延长惊厥潜伏期，减少惊厥死亡率，发挥镇静、抗惊厥作用。但有效成分龙脑、异龙脑能显著延长戊巴比妥引起的小鼠睡眠时间，与戊巴比妥产生协同作用，异龙脑的这一作用尤为显著，这可能与异龙脑的脂溶性较高有关。芳香开窍药物影响血脑屏障通透性的研究主要集中于冰片上。冰片作为小分子脂溶性单萜类物质，口服后迅速透过血脑屏障，脑内浓度高于其他组织，深入研究证实冰片促血脑屏障开放式生理性开放，与大鼠脑皮质微血管内皮CAM-1 的表达无关，而与内皮细胞产生NO 量的增多有一定关系。大量研究还表明冰片具有很好的促透作用，不仅体现在促进药物通过血脑屏障，还体现在透过皮肤与鼻腔、角膜的粘膜系统。通过实验研究表明，脑安片未见明显毒性反应，具有明显的抗血栓作用，能显著降低脑血管阻力，对脑血管有选择性扩张作用，能够增加脑血流量，改善脑循环，与阳性药物脑安胶囊等剂量比较，作用相似。