十雄角果木树皮的乙酸乙酯萃取部位化学成分的研究

胡格华 吴 军

（三峡大学天然产物研究与利用湖北省重点实验室，湖北宜昌 443002）

（Hubei Key Laboratory of Natural Products Research ＆Development，China Three Gorges Univ.，Yichang 443002，China）

角果木属Ceriops Arn.植物为生长在热带、亚热带海岸潮间带的红树科（Rhizophoraceae）真红树植物.该属植物全球有5 个种：角果木Ceriops tagal（Perr.）C.B.Robinson、十雄角果木C.decandra（Griff.）Ding Hou、澳洲角果木C.australis（White）Ballment，Smith ＆Stoddart、C.zippeliana Blume和C.pseudodecandra Sheue，Liu，Tsai＆Yang.角果木和十雄角果木广泛分布于非洲、马达加斯加、亚洲南部和南太平洋岛屿的海岸上；澳洲角果木为澳大利亚沿海区域所特有的一个物种；C.zippeliana分布于亚洲西南部地区，而C.pseudodecan－dra主要分布于澳大利亚、新几内亚和斯兰岛［1－4］.该属植物在我国仅有一个物种，即角果木，仅分布于海南省［5－6］.在我国角果木的叶子煎熬后用于治疗疟疾［5－6］；在印度十雄角果木作为一种民间草药用于治疗腹泻、阿米巴病、出血和恶性溃疡［7］.药理实验表明，十雄角果木的叶子和呼吸根的醇提物在口服剂量为250mg／kg和500mg／kg时，对小鼠表现出很强的体内抗炎活性［8］.据报道，从十雄角果木的根和树叶中分离鉴定了28 个化合物，包括12 个二萜类化合物［9－12］和16个羽扇豆烷型三萜化合物［12－13］.为了深入研究十雄角果木的化学成分，本实验首次对该植物树皮95%乙醇提取物乙酸乙酯萃取部位的化学成分进行了研究，共分离得到了3个二萜类化合物（1－3）和1个儿茶素（4）.

1 实验仪器与材料

Bruker AV－400核磁共振仪；Waters 600高效液相色谱仪；2996检测器，Empower色谱工作站；岛津LC－20A 液相色谱仪；SPD－20A 检测器；薄层硅胶GF254和柱色谱硅胶（100～200 目）为青岛海洋化工厂产品；ODS反相硅胶为日本YMC 公司产品；高效液相色谱所用试剂为色谱纯，其余均为分析纯.

实验材料于2009 年采集于印度Godavari河口红树林湿地，并经印度红树分类学家Prof.Satyanandamurty T 鉴定为十雄角果木Ceriops decandra（Griff.）Ding Hou的树皮.植物标本（CD－001）存放于暨南大学药学院海洋药物研究中心.

2 提取与分离

干燥的十雄角果木树皮7.4kg粉碎后，用95%乙醇浸提5次，每次48h.提取液合并后减压蒸干.提取物经水混悬后，分别用乙酸乙酯、正丁醇萃取3次.将乙酸乙酯部位浸膏加水混悬，氯仿萃取得到氯仿萃取部位，余下即为乙酸乙酯萃取部位（1 503.6g）.取乙酸乙酯萃取部位浸膏（256g），经正相硅胶柱色谱分离，氯仿－甲醇系统（100∶0→1∶2）梯度洗脱得到242个流分.流分78～92 合并，经高效液相色谱（YMC－Pack ODS－A，250mm×10mm，5μm）分离，乙腈－水系统（70∶30）洗脱得到3个流份，其中流份1为化合物化合物1（10.2mg）.流份2经高效液相色谱（YMC－Pack ODS－A，250mm×4.6mm，5μm）分离，乙腈－水系统（56∶44）洗脱得到化合物2（5.4mg）和化合物3（3.4mg）；流份169－171合并后，采用氯仿、丙酮反复重结晶，得到化合物4（16.1mg）.

3 结构鉴定

化合物1：白色晶体（丙酮），1H－NMR （400 MHz，CDCl3）δ：5.26 （1H，br s，H－14），3.70（1H，dd，J＝9.5，2.3Hz，H－16），3.60（1H，dd，J＝9.0，2.0Hz，H－15），3.52（1H，d，J＝9.5Hz，H－16），0.90（3H，s，17－CH3），0.88（3H，s，18－CH3），0.84（3H，s，19－CH3），0.78（3H，s，20－CH3）；13C－NMR （100 MHz，CDCl3）δ：140.2（C－8），126.8（C－14），78.7（C－15），63.3（C－16），54.9（C－5），50.4（C－9），42.1（C－3），39.2（C－1），38.4（C－10），37.1（C－13），36.3（C－7），33.7（C－18），33.3（C－4），32.5（C－12），23.6（C－17），22.6（C－6），22.1（C－19），19.0（C－2），18.8（C－11），15.0（C－20）.以上数据与文献报道一致［14］，故鉴定化合物1为ent－8（14）－海松烯－15R，16－二醇.

化合物2：浅黄色粉末，1H－NMR（400 MHz，CDCl3）δ：7.82（1H，d，J＝1.5 Hz，H－14），7.37（1H，dd，J＝8.1，1.5Hz，H－12），7.28（1H，d，J＝8.1Hz，H－11），3.43（1H，d，J＝10.9 Hz，H－18），3.14（1H，d，J＝10.9Hz，H－18），2.89（1H，m，J＝8.9 Hz，H－15），2.64（1H，dd，J＝17.8，11.1，H－6），2.63（1H，dd，J＝17.8，6.6 Hz，H－7），2.31 （1H，br d，J＝12.9 Hz，H－1），2.24（1H，dd，J＝11.1，6.6 Hz，H－5），1.25（3H，s，H－20），1.24（3H，s，H－17），1.23（3H，s，H－16），0.92（3H，s，H－19）；13C－NMR（100 MHz，CDCl3）δ：199.6（C－7），153.7（C－9），146.7（C－13），132.5（C－8），130.7（C－12），124.9（C－14），123.7（C－11），71.0（C－18），42.6（C－5），37.7（C－4），37.6（C－10），37.6（C－1），36.0（C－6），34.8（C－3），33.6（C－15），23.9（C－16），23.8（C－17），23.8（C－20），18.3（C－2），17.2（C－19）.以上数据与文献报道一致［15］，故鉴定化合物2 为18－羟基－8，11，13－松香三烯－7－酮.

化合物3：白色粉末，1H－NMR （400 MHz，CDCl3）δ：5.46（1H，br s，H－14），3.74（1H，dd，J＝7.2，2.4 Hz，H－16），3.53（1H，dd，J＝9.0，2.4Hz，H－15），3.46（1H，d，J＝7.2Hz，H－16），1.03（3H，s，17－CH3），1.05（3H，s，18－CH3），1.04（3H，s，19－CH3），0.91（3H，s，20－CH3）；13C－NMR（100MHz，CDCl3）δ：215.4（C－3），136.4（C－8），131.0（C－14），79.2（C－15），63.8（C－16），55.6（C－5），50.0（C－9），48.2（C－4），39.1（C－13），38.2（C－1），38.0（C－10），36.8（C－7），35.2（C－2），31.9（C－12），26.3（C－18），24.3（C－6），23.9（C－17），22.5（C－19），19.7（C－11），15.2（C－20）.以上数据与文献报道一致［16］，故鉴定化合物3 为ent－8（14）－海松烯－15R，16－二醇－3－酮.

化合物4：白色粉末，分子式为C15H14O6，茴香醛－浓硫酸显色为桔黄色.将该化合物与儿茶素标准品进行TLC 对照，经多种溶剂系统展开，其Rf值均一致，故鉴定该化合物为儿茶素.

［1］ Wu J，Xiao Q，Xu J，et al.Natural Products from True Mangrove Flora：Source，Chemistry and Bioactivities［J］.Nat.Prod.Rep.，2008，25：955－981.

［2］ Huang Y L，Tan F X，Su G H，et al.Population Genetic Structure of Three Tree Species in the Mangrove Genus Ceriops（Rhizophoraceae）from the Indo West Pacific［J］.Genetica，2008，133：47－56.

［3］ Sheue C R，Liu H Y，Tsai C C，et al.On the Morphology and Molecular Basis of Segregation of Ceriops Zippeliana and C.Decandra （Rhizophoraceae）from Asia［J］.Blumea，2009，54：220－227.

［4］ Sheue C R，Liu H Y，Tsai C C，et al.Comparison of Ceriops Pseudodecandra Sp.Nov.（Rhizophoraceae），a New Mangrove Species in Australasia，with Related Species［J］.Botanical Studies，2010，51：237－248.

［5］ 林 鹏，付 勤.中国红树林环境生态及经济利用［M］.北京：高等教育出版社，1995.

［6］ 中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志［M］.北京：科学出版社，2009.

［7］ Rastogi R P，Mehrotra B N.Compendium of Indian Plants［M］.New Delhi：Publications ＆Information Directorate，1991.

［8］ Uddin S J，Shilpi J A，Barua J，et al.Antinociceptive Activity of Ceriops Decandra Leaf and Pneumatophore［J］.Fitoterapia，2005，76：261－263.

［9］ Anjaneyulu A S R，Rao V L，Lobkovsky E，et al.Ceri－opsin E，a New Epoxy Ent－kaurene Diterpenoid from Ceriops Decandra［J］.J Nat Prod，2002，65：592－594.

［10］Anjaneyulu A S R，Rao V L.Ceriopsin A－D，Diterpenoids from Ceriops Decandra ［J］.Phytochemistry，2002，60：777－782.

［11］Anjaneyulu A S R，Rao V L.Ceriopsin F and G，Diterpenoids from Ceriops Decandra［J］.Phytochemistry，2003，62：1207－1211.

［12］Wang H，Li M Y，Wu J.Chemical Constituents and Some Biological Activities of Plants from the Genus Ceriops［J］.Chem.Biodiv.，2012，9：1－11.

［13］Ponglimanont C，Thongdeeying P.Lupane－triterpene Esters from the Leaves of Ceriops Decandra （Griff.）Ding Hou［J］.Aust.J.Chem.，2005，58：615－618.

［14］Han L，Huang X S，Sattler I，et al.Three New Pimaren Diterpenoids from Marine Mangrove Plant，Bruguiera Gymnorrhiza［J］.Pharmazie，2005，60：705－707.

［15］Tanaka R，Ohtsu H，and Matsunaga S.Abietane Diterpene Acids and Other Constituents from the Leaves of Larix Kaempferi［J］.Phytochemistry，1997，46：1051－1057.

［16］Sergio R，Peraza S，Eenesto O，et al.Screening of Yucatecan Plant Extracts to Control Colletotrichum Gloeosporioides and Isolation of a New Pimarene from Acacia Pennatula［J］.J.Agric.Food Chem.，2005，53：2429－2432.