枣仁安神胶囊中丹参酮ⅡA的含量测定

徐 晏

（浙江医药高等专科学校，浙江 宁波 315000）

枣仁安神胶囊中丹参酮ⅡA的含量测定

徐 晏

（浙江医药高等专科学校，浙江 宁波 315000）

目的为后续制订枣仁安神胶囊的质量控制指标提供参考依据。方法利用高效液相色谱法测定枣仁安神胶囊丹参酮ⅡA的含量。结果丹参酮ⅡA在4.04～36.32μg之间线性关系良好，r=0.9999，丹参酮ⅡA平均回收率为98.36%，RSD=2.01%。结论该方法准确、专属性强、重现性好，可作为本品中丹参酮ⅡA的含量测定方法。

枣仁安神胶囊；丹参酮ⅡA；高效液相色谱法

枣仁安神胶囊由酸枣仁、丹参、五味子等中药材组成，经过多年的临床实践证明，对神经衰弱患者心、肝血虚症引起的失眠，兼有头晕、健忘等症有显著的疗效，处方中所含有的丹参酮ⅡA是主要有效成分之一。本文利用HPLC法对其所含成份中的丹参酮ⅡA含量测定，为以后制订该制剂的质量控制指标提供参考依据。

1 仪器与材料

岛津LC-2010AT型高效液相色谱仪，AL204-IC型电子分析天平（d=0.0001g，梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司），市售枣仁安神胶囊（091201，贵州同济堂制药有限公司），丹参酮对照品（1241-200302，中国药品生物制品检定研究院），甲醇为色谱醇和分析醇，水为重蒸馏水，0.45μm微孔滤膜。

2 含量测定

2.1 色谱条件

岛津LC-2010AT型高效液相色谱仪；UV紫外检测器；Diamonsil C18色谱柱（5μm，200×4.6mm）；检测波长：270nm；流动相为甲醇-水（75∶25）；流速1mL/min；柱温40℃。

2.2 对照品溶液的制备

精密称取丹参酮ⅡA对照品10mg置于50mL棕色瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇均。再从中精密量取5mL置于50mL棕色量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇均，即得。

2.3 供试品溶液的制备

取装量差异项下的胶囊内容物约1g，紧密称定，置50mL棕色量瓶中，加甲醇40mL，超声处理2次，每次超声30min，过滤，静置冷却后，加入甲醇稀释至刻度，摇均，再以0.45μm微孔滤膜过滤，取滤液作为供试品溶液。

2.4 方法学考察

2.4.1 标准曲线的制备

精密吸取丹参酮ⅡA对照品溶液（浓度为20.18ug/mL）2.0μL、4.0ul、6.0μL、10.0μL、14.0μL、18.0μL注入高效液相色谱仪进行测定，按上述色谱条件测定其峰面积，以峰面积值为纵坐标（Y），进样体积为横坐标（X）绘制标准曲线，得到的回归方程为y=104232x+6149.5，R=0.9999。结果表明丹参酮ⅡA在4.04～36.32μg范围内具有良好的线性关系。

2.4.2 精密度考察

精密称取供试品1.0026g制成供试品溶液，取10μL按上述色谱条件重复进样测定6次，测得丹参酮ⅡA峰面积值的RSD为1.11%。

2.4.3 稳定性考察

精密称取供试品1.0064g制成供试品溶液，在室温下放置，分别在0h、8h、16h、24h、36h、48h进样进行测定，测得丹参酮ⅡA峰面积值的RSD为1.58%。

2.4.4 重复性考察

分别精密称取供试品5份，每份1g，按上述制备方法制成供试品溶液，分别吸取上述溶液各10ul进样进行测定，测得丹参酮ⅡA峰面积值的RSD为1.57%。

2.4.5 加样回收率

分别精密称取已知含量的供试品（含量为1.7583g/g）6份，每份0.5g，分别加入丹参酮ⅡA对照品溶液（浓度为0.8736mg/mL甲醇溶液）各1mL，按上述供试品制备方法制备供试品溶液，并以上述色谱条件测定峰面积，计算得到丹参酮ⅡA的平均回收率为98.36%，RSD为2.29%，表明回收率良好。结果见表1。

表1 加样回收率考察数据

2.5 含量测定

取供试品按照上述色谱条件测定其峰面积值，各批胶囊平行测定3次，利用外标一点法结合制剂含量计算公式计算丹参酮ⅡA的含量，结果见表2。样品及对照品色谱图见图1。

表2 三批样品的含量测定

3 结果与讨论

图1 丹参酮ⅡA对照品及样品色谱图

本文在进行含量测定之前已利用回流及超声两种方法提取胶囊中的丹参酮ⅡA，两种方法含量测定结果显示回流提取的效率和色谱峰的分离效果均不及超声处理好，并对超声时间进行考察得出超声30min已将其中丹参酮ⅡA提取完全，此时超声处理的含量比回流处理的含量高33.3%，故本文选择超声提取丹参酮ⅡA；此外，本文还对溶剂干扰通过阴性实验进行考察，结果显示溶剂并未对实验产生干扰。经对三批样品的测定，表明本含量测定方法可靠，操作简便，符合高效液相色谱法《中国药典（一部）》（2010版）的规定，且该方法重现性好，可作为本品中丹参酮ⅡA的含量测定方法。

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R282.710.3

B

1671-8194（2013）18-0100-02