不同生长阶段马齿苋水分及总黄酮含量分析

董海胜, 朱景涛, 张淑静, 陈 斌

(中国航天员科研训练中心航天医学基础与应用国家重点实验室,北京 100094)

马齿苋(Portulaca oleracea L.)是一种药食同源的植物,马齿苋科一年生草本植物,别名五行草、酸苋、猪母菜、地马菜、马蛇子菜及长寿菜等.其功能据《本草纲目》记载:“散血消肿,利肠滑胎,解毒通淋,治产后虚汗”[1-3].据《本草拾遗》记载:“破痃癖,止消渴,又主马恶疮虫”.马齿苋味酸、性寒,具有清热解毒、益气生津、凉血止血、散血消肿等作用,主治热痢脓血、热淋、带下、痈肿恶疮、丹毒等.马齿苋资源丰富、物美价廉,在我国民间已有几千年的应用历史.多项研究表明马齿苋中黄酮类成分是其降血糖作用的有效成分之一[4-5].

本文对马齿苋生长过程中全草总黄酮含量的动态变化以及不同部位总黄酮的分布状况进行分析,为确定马齿苋的适宜采收时间和采收部位提供实验数据.

1 材料与方法

1.1 马齿苋

马齿苋全草采自北京唐家岭村菜园,如图1.

图1 马齿苋全草Fig.1 Whole plant of purslane

1.2 仪器及试剂

紫外可见分光光度计;鼓风干燥箱;电子天平;离心机,研钵及玻璃器皿;芸香苷(芦丁)对照品,中国药品生物制品检定所;硝酸铝,亚硝酸钠,氢氧化钠及其他试剂均为分析纯,北京化学试剂公司.

1.3 实验方法

1.3.1 水分含量的测定,烘箱干燥法[6]

平行测定2次,计算样品水分的平均含量.

1.3.2 总黄酮含量的测定,亚硝酸钠-硝酸铝比色法[7]

1.3.2.1 标准工作曲线

精密称取芦丁(芸香叶苷)对照品40 mg,置100 mL容量瓶中,加甲醇溶解并稀释到刻度,摇匀,即得.芦丁对照品溶液的浓度为0.41 mg/mL.精密吸取芦丁对照品溶液和供试品溶液0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0 mL,分别置10 mL刻度试管中,加水1 mL,加5%亚硝酸钠溶液1 mL,放置6 min(不断振摇),加10%硝酸铝溶液1 mL,放置6 min(不断振摇),加4%氢氧化钠溶液4 mL,摇匀,用蒸馏水定溶至10 mL,放置15 min.在分光光度计上500 nm处测定.

1.3.2.2 样品溶液的制备及含量测定

选择干净马齿苋,洗去尘土污迹.摊晾过夜,阴干表面水分.精密称取经洗净、阴干的马齿苋样品15 g,再加入70%乙醇50 mL,置研钵中研磨,定溶至100 mL待测.取定溶后的样品液1 mL,按照1.3.2.1步骤在500 nm波长处测定吸光度.平行测定2次,计算样品中总黄酮的平均含量.

2 结果与分析

2.1 标准曲线绘制

黄酮类化合物主要有槲皮苷、杨梅树素、香橙素、山柰素等.这些成分的化学结构中都含有—OH、—-==C-O等供电子体,在亚硝酸钠的碱性溶液中,可与Al3+反应产生高灵敏度的橙红色配合物,具有特定的紫外吸收峰.按照2005版中国药典中黄酮类成分的含量测定显色系统NaNO2-Al(NO3)3-NaOH来进行含量测定.经拟合,芦丁标准曲线的回归方程为:y=12.069x+0.018 6,R2=0.999.在0.009～0.088 mg/mL范围内,芦丁质量与吸光值呈良好的线性关系,可作为马齿苋总黄酮含量测定计算依据,见图2.

2.2 不同生长阶段马齿苋全草、茎、叶中水分含量

不同生长阶段马齿苋全草、茎、叶中水分含量如图3.由图3可见,马齿苋全草随着生长期的延长水分含量逐渐降低,变化不明显;马齿苋茎随着生长期的延长水分含量先升高后降低,变化不明显;马齿苋叶随着生长期的延长水分含量逐渐降低.

2.3 不同生长阶段马齿苋全草、茎、叶中总黄酮含量

图2 总黄酮定量标准曲线Fig.2 Standard curve of total flavonoids

图3 不同生长阶段马齿苋全草、茎及叶中水分含量Fig.3 Water content of whole purslane,stems and leaves at different growth stages

不同生长阶段马齿苋全草、茎及叶中总黄酮含量见图4.由图4可见,马齿苋全草、茎及叶中总黄酮含量随着生长期的延长均逐渐降低,其中马齿苋生长后期茎中总黄酮含量最低,马齿苋生长前中期总黄酮含量差异不大.不同生长阶段马齿苋总黄酮含量的分布规律有一定的差异,生长初期的马齿苋茎总黄酮含量比叶高,马齿苋生长的中后期茎中总黄酮含量低于叶中总黄酮含量.

图4 不同生长阶段马齿苋全草、茎及叶中总黄酮含量Fig.4 Total flavonoids content of whole purslane,stems and leaves at different growth stages

2.4 不同生长阶段马齿苋全草总黄酮含量与其他植物的比较

不同生长阶段马齿苋全草总黄酮含量与其他植物对比情况见表1.表1中,马齿苋总黄酮百分含量p(以干物质计)计算公式如下:

式(1)中,m为不同生长阶段马齿苋鲜草总黄酮含量g/100 g,如图4;w为水分含量,如图3.

表1 不同植物品种总黄酮含量比较Tab.1 Comparison of total flavonoids content of different plant varieties

由表1可见,马齿苋全草生长初期及中期的总黄酮含量均高于锁阳、槐枝、杭白菊及侧柏叶,生长后期总黄酮含量高于锁阳而低于其他3种植物品种[8-11].由此可见,马齿苋采收期以生长初期及中期为宜,此期间其有效成分总黄酮含量较高.文中报道的为总黄酮含量,由于黄酮类物质有多种形式,不同形式对应不同的药效,因此有必要进一步分析马齿苋黄酮类物质的具体形式[12].

3 讨论和结论

不同生长阶段马齿苋总黄酮含量有差异,在生长初期马齿苋肉质鲜嫩多汁,总黄酮含量最高,生理活性最佳.不同植物体内的总黄酮分布情况已有大量文献报道,多数研究结果显示,植物叶片中的总黄酮含量最高,推测叶片可能是合成或蓄积黄酮类物质的主要组织[13-15].通过对不同生长阶段马齿苋全草、茎及叶中总黄酮含量进行分析,叶片中的总黄酮含量在生长的中后期均高于茎的总黄酮含量,与文献报道的结果基本一致.因此,在以总黄酮含量为指标时,宜采收马齿苋生长前中期的全草、叶片及茎,采收各生长阶段的马齿苋叶可以制成马齿苋叶保健茶等,进行进一步深加工.

参考文献:

[1] 解思友,逢美芳,孙艳,等.马齿苋的化学成分与药理作用最新研究进展[J].现代药物与临床,2011,26(3):212-215.

[2] 郭长江,徐静,韦京豫,等.我国常见水果类黄酮物质的含量[J].营养学报,2008,30(2):130-135.

[3] 胡忠泽,杨久峰,谭志静.柿叶黄酮对糖尿病小鼠降血糖作用及机制探讨[J].营养学报,2006,28(6):540-541.

[4] 杨武英,上官新晨,徐明生,等.青钱柳黄酮对α--葡萄糖苷酶活性及小鼠血糖的影响[J].营养学报,2007,29(5):507-509.

[5] 曹群华,瞿伟菁,牛伟,等.沙棘黄酮对链脲佐菌素致糖尿病大鼠降糖作用[J].营养学报,2005,27(2):151-154.

[6] 中华人民共和国卫生部.GB 5009.3—2010食品中水分的测定[S].北京:中国标准出版社,2010.

[7] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京:化学工业出版社,2005:22.

[8] 赵超,陈华国,靳凤云,等.槐枝中总黄酮的含量测定[J].光谱实验室,2010,27(1):190-191.

[9] 张立明,郑传莉,李思.紫外分光光度法测定锁阳中总黄酮含量[J].科协论坛,2009,12:73-74.

[10] 盛炜炜,朱云龙.分光光度法测定杭白菊中总黄酮的含量[J].海峡药学,2009,21(12):99.

[11] 于生,单鸣秋,丁安伟,等.侧柏叶炮制前后总黄酮的含量变化[J].现代中药研究与实践,2010,24(1):52-53.

[12] 刘荣华,邵峰,马志林,等.山楂叶中总黄酮的含量测定方法研究[J].江西中医学院学报,2007,19(6):37-40.

[13] 吴菊兰,李维林,汪洪江,等.红凤菜和白子菜总黄酮含量的动态变化[J].植物资源与环境学报,2009,18(4):79-81.

[14] 任爱农,鞠建明.野菊不同部位的总黄酮含量测定[J].中草药,1999,30(8):589--590.

[15] 金则新,李钧敏,朱小燕.夏蜡梅总黄酮、总绿原酸含量及其环境因子相关性分析[J].浙江大学学报:理学版,2007,34(4):459-464.