454例肝酶水平与血清IL—22水平的相关性分析
2013-07-02万静朱敏林丹红史虹莉
万静 朱敏 林丹红 史虹莉
摘要 目的:初步探讨血肝酶水平与血清IL-22水平的相关情况。方法:對象为华山医院体检者454名,进行全面检查,采用ELISA方法检测IL-22水平,采用Spearman等级分析IL-22水平和肝酶的关系。结果:IL-22水平与谷丙转氨酶、谷草转氨酶及γ-谷氨酰转肽酶明显相关(相关系数分别为-0.122,-0.123及-0.127,P值分别为0.020,0.019及0.015)。结论:血清IL-22水平与血肝酶水平显著负相关,提示IL-22可能与肝脏疾病相关。
关键词 肝酶IL-22 肝脏疾病
中图分类号:R392
文献标识码:C
文章编号:1006-1533(2013)02-0022-04
近年来,研究发现IL-22作为新型的炎症细胞因子在肝脏疾病中发挥着重要的生物学作用。IL-22受体仅能在肝细胞中检测到,IL-22在肝脏疾病中的主要功能在于促进肝细胞存活,刺激肝细胞增殖和刺激肝细胞产生急性反应蛋白。本研究通过對454例成人体检者外周血IL-22水平的检测及其与肝酶相关性研究,探讨IL-22的变化与肝脏疾病的关系。
1 资料与方法
1.1研究设计及對象
入选者为2008年10月-2009年9月在华山医院体检中心进行体检者共454例,其中男292例,女162例,平均年龄(45.0±11.4)岁。
1.2方法
1.2.1标本收集
于体检日清晨从研究對象前臂周围静脉采取空腹血标本,标本置入肝素钠抗凝管内,以3000rpm高速离心后,取上清液置于-80℃冰箱保存、待测。
病史及体检 问卷表格明确年龄、性别、吸烟史、饮酒史。测量体重(Kg),身高(cm),腰围(cm),血压(mmHg),体重指数(BMI)为体重(k曲除以身高(m)的平方。
1.2.2实验室及辅助检查
采用连续监测法测定谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)及γ-谷氨酰转肽酶(gamma-glutamyl transferase,GGT)(合富生化科技贸易有限公司),连续监测法测定碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)(罗氏诊断有限公司),钒酸盐氧化法测定总胆红素(TBIL)(和光纯药工业株式会社)。采用尿酸酶-Trinder法测定血尿酸(上海科华东菱诊断用品有限公司)。采用肌氨酸氧化酶法测定血肌酐(上海科华东菱诊断用品有限公司),紫外-GLDH法测定血尿酸氮(上海科华东菱诊断用品有限公司)。空腹血糖采用葡萄糖氧化酶法(GOX0560,上海景源医疗器械有限公司),同时测定血总胆固醇(CHOD-PAP法,CHO0560,上海景源医疗器械有限公司)、血甘油三脂(GPO-PAP法,TGP0560,上海景源医疗器械有限公司)、高密度脂蛋白(IRC法,21200AMZ00404000,Daiichi Pure Chemicals Co.Ltd)。以上所有生化检查均在日立7600-020自动分析仪上完成。
1.2.3血浆IL-22水平检测
采用BioLegend公司生产的Legend Max Human IL-22 ELISA Kit检测人血清中IL-22含量。该检测方法采用双抗体夹心ELISA法,加入酶联抗人IL-22多克隆抗体,样本和标准品中的IL-22与多抗结合,形成免疫复合物,洗去游离的酶联抗体;加入显色底物;加入终止液终止反应,检测吸光度。采用四参数方程拟合IL-22标准曲线,根据样本OD值求出标本中IL-22浓度。
1.3肝功能肝酶指标异常标准
参照肝功能检查正常参考值,本研究分析中将ALT、AST、GGT和ALP的正常范围分别定义为<50U/L、<30U/L、3-45U/L和35-104U/L,TBIL的正常范围定义为3.4~20.4μmol/L。
1.4统计分析
统计分析采用SPSS 11.0统计软件处理,数据描述采用x±s或中位数表示,计量资料采用独立样本t检验或非参数统计分析,IL-22与肝酶相关性采用Spearman等级相关分析法分析。
2 结果
2.1临床特征
研究显示男性和女性的年龄和收缩压之间无统计学差异,在身高、体重、体重指数、舒张压、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、甘油三酯、空腹血糖、ALT、AST、ALP,TBIL间存在统计学差异。然而两组在IL-22水平上无统计学意义(表1)。
2.2IL-22与肝酶相关性分析
Spearman相关分析结果,总体检测的IL-22水平与ALT、AST及GGT水平明显相关(相关系数分别为-0.122,-0.123及-0.127,P值分别为0.020,0.019及0.015),但未显示与ALP(相关系数:-0.060,P=0.257)和TBIL相关(相关系数:-0.014,P=0.784)。
根据肝酶异常定义,ALT、AST、GGT及ALP异常人数分别为32例、57例、54例及15例。IL-22水平与肝酶(ALT、AST及GGT)异常显著相关(相关系数分别为-0.129,-0.142及-0.114,P值分别为0.014,0.007及0.029),但也未显示与ALP(相关系数:-0.031,P=0.557)和TBIL相关(相关系数:-0.038,P=0.609)。
3 讨论
IL-22是2000年才发现的细胞因子。IL-22与IL-10二级结构非常相似,最初被称为IL-10相关T细胞衍生诱导因子。IL-22虽然由免疫细胞产生,但并不作用于这些细胞,而是以皮肤,胰腺,肝脏等组织细胞为主要靶细胞,调节这些组织细胞的功能。
本研究通过检测454例体检者肝酶与IL-22的含量,相关分析显示,ALT、AST与GGT与IL-22都呈负相关,也就是IL-22升高时,3个肝酶水平下降,表示IL-22可能是肝脏的保护作用。本组体检者肝功能异常比例较低(<10%),本研究提示即使在肝功能异常比例较低情况下IL-22与肝酶的ALT、AST及GGT也明显负相关,支持其可能存在的肝细胞保护作用。
近年来研究显示IL-22可通过调节肝脏脂质代谢,對高脂饮食诱导的肝坏死起到保护作用,可能對脂肪性肝炎的防治提供新思路。
此外,對于刀豆蛋白A(ConA)及四氯化碳(CCL4)诱导肝炎中也发现其保护作用,ConA能与T细胞表面受体结合并引起T细胞活化,从而导致肝脏炎症,其主要表现为转氨酶的升高以及严重的肝脏病理损伤,可以很好地模拟由免疫因素介导的肝脏疾病。ConA诱导肝炎时,保护性细胞因子和促炎性细胞因子之间的平衡决定了炎症严重程度,TNF-α和IL-4促进肝脏炎症,而IL-6、IL-10和IL-22则减轻肝脏炎症。大量研究证明IL-22對ConA诱导的肝炎起保护作用。在CC14诱导的肝炎中,IL-22也有相似的结果。Pan等通过液压转基因技术在小鼠肝内高表达IL-22,高表达的IL-22大量激活肝内STAT3,从而显著上调抗凋亡蛋白的表达(包括Bcl-xL、Bcl-2和Mcl-1)。给这些高表达IL-22的小鼠注射ConA后并没有诱发明显的肝炎。在其肝内仅观察到了少量的点状坏死,而對照组小鼠肝内能观察到大量片状坏死。以上证据表明:高浓度的IL-22能显著改善ConA引起的肝细胞损伤、坏死和凋亡。其作用机制可能是:IL-22通过JAK-STAT途径激活STAT3,STAT3的激活导致抗氧化蛋白、急性时相反应蛋白、促有丝分裂蛋白和抗凋亡蛋白的上调,从而起到保护肝脏的作用。
IL-22在酒精导致的肝病中也起保护性作用,Ki等通过對小鼠的酒精喂养导致脂肪肝和肝损伤,注射含IL-22基因的腺病毒能阻止酒精诱导的肝细胞脂肪变性,而清除STAT3能消除IL-22對酒精性肝损伤的保护作用。
然而IL-22在慢性乙型肝炎和肝癌中的作用还不太明确,有研究认为炎症刺激导致IL-22的大量产生,升高的IL-22能促进肝细胞增殖和提高了肝细胞的存活率,在短期内起着抗炎和保护肝细胞的作用,但在IL-22的期刺激下,长可能会诱导肝炎向肝癌的转化,最终导致肝癌形成。
尽管本研究仅在体检人群中對肝酶指标和IL-22水平进行了初步相关性分析,不能推测因果关系,并且体检人群非最佳人群,但是毕竟在较大样本量完成了相关性分析,研究提示在肝功能异常较低时同样存在IL-22水平和肝酶的负相关,提示其可能IL-22和肝病相关。