抗氧化微量营养素对肥胖大鼠胰岛形态的影响

朴松兰 周禹含

（长春中医药大学，吉林 长春 130017）

抗氧化微量营养素对肥胖大鼠胰岛形态的影响

朴松兰 周禹含

（长春中医药大学，吉林 长春 130017）

抗氧化；微量营养素；肥胖；大鼠；胰岛

随着社会经济的发展，人们的生活方式，尤其饮食习惯发生了很大的改变，越来越多的人正加入肥胖的行列。由于食物的加工越来越精细，导致抗氧化微量营养素（antioxidant micronutrients，AM）丢失过多，摄入减少。肥胖患者氧化应激明显增加，而胰岛细胞对氧化应激损伤非常敏感。本研究选用硒（Se）、钒（V）、铬（Cr）和维生素E等微量营养素，观察其对肥胖大鼠胰岛β细胞形态的影响，以探讨使用抗氧化微量营养素干预肥胖致2型糖尿病的可行性。

1 实验材料

1.1 实验动物

清洁级雄性SD大鼠35只，体质量150～170g，购于吉林大学白求恩医学部实验动物中心。

1.2 实验动物

高脂饲料由吉林大学白求恩医学部实验动物中心配制：每100g高脂饲料含有基础饲料60g，猪油15g，蛋黄粉13g，干酪素10g，白糖2g。基础饲料总热能3.29Kcal/g(碳水化合64.44%、蛋白质21.88%、脂肪13.68%)；高脂饲料总热能4.62Kcal/g(碳水化合物30.15%、蛋白质22.00%、脂肪49.85%)。

1.3 血糖仪

北京怡成JPS-7血糖仪检测。

1.4 抗氧化微量营养素

硒酸脂多糖为上海天赐福生物公司产品，钒酸钠为上海试剂三厂产品，醋酸维生素E由浙江新昌制药有限公司提供，富铬酵母由北京中科院高能物理研究所提供。

2 实验方法

2.1 模型制备及分组

购入大鼠适应性饲养1周后，按体质量随机分为2组，正常对照组(10只)，喂以基础饲料，高脂饲料组（25只），喂养猪油为主要脂肪成分配制的高脂饲料；第8周末，高脂实验组大鼠体质量基本稳定，参照正常对照组大鼠的平均体质量及标准差，筛选肥胖模型（体质量大于对照组平均体质量加1.96倍标准差），未达到标准者剔除。将肥胖模型大鼠分为干预组（9只）和模型对照组（9只）。

2.2 微量营养素补充剂量及方法

每日以按公斤体质量140μg Se（16.60mg硒酸酯多糖）、1.785mg V（14mg NaVO4·12H2O）、140μg Cr（127.27mg富铬酵母）灌胃，饲含VE的软料（相当于100mg VE/公斤体质量、每日）。

2.3 胰腺HE切片的胰岛定量分析

干预6周后处理大鼠，取胰腺组织，经新鲜配置并预冷（4℃）的4%多聚甲醛固定，应用自动脱水机进行梯度酒精脱水，二甲苯透明，经自动包埋机进行石蜡包埋，使用石蜡切片机切片，切片厚度为4μm。每组取5只小鼠胰腺HE切片，用HPIAS-1000高清晰度彩色图像分析系统对小鼠胰腺组织切片（HE染色）进行体视学定量分析。测试参数a：胰岛面积与胰腺面积比（%），测定切片胰腺中所有胰岛面积总和，后将胰腺整体摄入分析系统并测定整个胰腺面积，计算二者之比。测试参数b：胰岛形状因子（L2/4πA，A为面积，L为周长），为所有胰岛形状因子的平均值。

3 实验结果

3.1 血糖

0周模型对照组和AM干预组高于正常组对照组，但组间没有明显差异。干预期间正常对照组血糖比较稳定，模型对照组和AM干预组1～6周血糖逐渐下降，第6周末，AM干预组血糖低于模型对照组，但组间均没有显著差异，详见图1。

图1 抗氧化微量营养素干预期间血糖变化（mmol/L）

3.2 HE染色、定量分析

HE染色显示，正常对照组大鼠胰岛形态比较规则，胞浆丰满。肥胖模型对照组部分胰岛细胞胞浆疏松化，胞浆淡染。AM干预组胰岛与模型对照组相比有不同程度的恢复，但仍可见少数胰岛细胞空泡变性。

定量分析结果表明，模型对照组胰岛面积与胰腺面积比低于正常对照组，AM干预组胰岛面积与胰腺面积比高于模型对照组，但各组间均无显著差异，详见图2。模型对照组胰岛形状因子高于正常对照组，AM干预组低于模型对照组，但各组间没有显著差异，详见图3。

图2 实验各组胰岛面积与胰腺面积比检测结果（%）

图3 实验各组胰岛形状因子检测结果

4 结果分析与讨论

血糖检测结果显示，AM干预期间实验各组血糖均波动在正常范围内，可能与造模时间短等因素有关。第6周AM干预组血糖低于模型对照组，可能与造模轻、干预时间短有关。大鼠胰腺HE染色观察结果显示，模型对照组胰岛细胞水肿明显，而AM干预组胰岛细胞有不同程度改善。图像分析结果显示，第6周，与模型对照组相比，AM干预组胰岛形状因子、胰岛与胰腺面积比有不同程度改善，但不明显，也可能与造模及干预时间短等因素有关。

本实验结果提示，补充AM能够保护高脂饮食诱导的肥胖大鼠胰岛细胞形态，可能延缓或防止2型糖尿病的发生。由于经费有限，存在干预时间短、检测指标不全面等缺点，有待于进一步研究、探讨。

R-33

B

1671-8194（2013）23-0060-02

吉林省教育厅“十一五”科学技术研究项目吉教科合字[2010]329号