GC法测定利鲁唑的含量

秦迎春秦卫红

（1 湖南省张家界市食品药品检验所，湖南 张家界 427000；2 湖南省张家界市人民医院药剂科，湖南 张家界 427000）

GC法测定利鲁唑的含量

秦迎春1秦卫红2

（1 湖南省张家界市食品药品检验所，湖南 张家界 427000；2 湖南省张家界市人民医院药剂科，湖南 张家界 427000）

目的 采用气相色谱法（GC）测量利鲁唑原料中含有利鲁唑的比例，为临床应用提供理论依据。方法 本文使用了气相色谱法中的内标法，用来测量利鲁唑中的含量。其中色谱柱采用了DB-1弹性的毛细管柱，检测器使用了FID；而汽化室的温度保持在260℃，检测器的温度保持在260℃；柱温保持在230℃，载气使用高纯氮气流速控制在5.0mL/min，尾吹控制在30mL/min，分流比为1/5，采用咖啡因子作为内标物。结果 利鲁唑的含量在1.5～19.5μg/mL呈现了较好的线性关系（r=0.9998），平均的回收率达到了100.1%，其中的RSD达到了0.36%。结论 采用GC法对利鲁唑的含量进行测定，不但方便简便、准确、快速以及可靠，而且最终测出结果比较准确，能够有效测定利鲁唑含量。

含量；利鲁唑；GC法测定

利鲁唑（Riluzole，RLZ）是用来治疗ALS（肌萎缩侧索硬化症）新药，也是目前被认准治疗ALS唯一药物。从文献中可知，目前使用高效液相的色谱法测定该药物含量[1,2]。但是从使用效果来看还存在许多需要改进之处，因此本文结合相关资料后，采用GC法测定出利鲁唑的含量，通过实验体现出这种方法的优势和可行性。

1 仪器与试药

日本岛津的GC-2014气相色谱仪。利鲁唑对照品（自制的，高效液相的色谱法测定含量≥99.9%）；咖啡因（中国药品生物制品检定所，纯度：90%）；利鲁唑原料（鲁南贝体制药有限公司生产，批号：080502）；无水乙醇等各种试剂，这些试剂都属于分析纯。

2 方法与结果

2.1 方法

2.1.1 色谱条件

本文采用了DB-1的弹性石英毛细管柱（30cm×0.53 mm，1.5μm）；将汽化室的温度控制在260℃；柱温控制在230℃；载气使用高纯氮气流速控制在5.0mL/min，尾吹控制在30 mL/min，分流比为1/5，采用咖啡因子作为内标物。

2.1.2 样品溶液的制备

精密称取利鲁唑原料50.10mg，置100mL容器中，加无水乙醇进行溶解，最终配制出浓度是0.501mg/mL溶液。

2.1.3 对照品溶液的制备

精密称取干燥利鲁唑对照品50.00mg放置到100mL的量瓶中，加无水乙醇稀释到刻度，摇匀，得到浓度0.50mg/mL的储备溶液。

2.1.4 内标溶液的制备

精密称取咖啡因约100mg，放置到100mL的量瓶中并加入无水乙醇稀释到刻度上，摇匀即得。

2.1.5 考察线性关系

从配制好的对照溶液（浓度:0.5mg/ml）中精密吸取1.0、3.0、5.0、7.0、9.0、11.0、13 mL，分别置于100mL容量瓶中，加入无水乙醇稀释刻度，摇匀。精确吸取3μL，按“2.1项下”色谱条件进行测定，记录色谱图。根据色谱图利鲁唑和内标峰面积之比，横坐标X是对照品浓度（μg/mL），纵坐标Y表示吸光度，以内标峰面积与利鲁唑峰面积之比对利鲁唑浓度回归，得回归方程：y＝3.4570x-0.2700，r＝0.9998，结果表明利鲁唑在1.5～19.5μg/mL线性关系良好。GC色谱图如图1，其分离度符合规定。

2.1.6 空白试验考察线性

吸取无水乙醇3.0 μL按“2.1” 项下色谱条件进行测定，其空白图谱如图2所示，结果显示无水乙醇没有干扰到利鲁唑的含量。

2.1.7 测定校正因子

图1 GC色谱图

精密吸取对照品储备液3.0、5.0、7.0mL，分别放置到50mL的量瓶中，每个瓶中再加入内标溶液5 mL，用无水乙醇稀释到刻度。每一个浓度重复测定3次，得出其平均校正因子为1.06，RSD=0.32%。

2.1.8 精密度试验

精密吸取对照品的储备溶液中5mL，放置到50mL的量瓶中，并加入内标溶液5mL，用无水乙醇稀释到刻度并摇匀。吸取样品3μL，“2.1”项下色谱条件进行测定，重复6次，结果RSD为0.27%。

2.1.9 重复性试验

从利鲁唑的原料中称取5份样品，按“2.2”项下方法制备，“2.1”项下色谱条件进行测定，结果显示利鲁唑含量为RSD为1.3%，表明该方法重复性良好。

2.1.10 加样回收率试验

从已知含量为99.86%利鲁唑的原料吸取出9份样品，分别放置到50mL的量瓶之中，并且分别加入“2.3”项下储备溶液分别是3.0、4.0、5.0mL的溶液，再加入内标溶液5mL，使用无水乙醇进行稀释到量瓶的刻度上，均匀，过滤，吸取3.0μL，按“2.1”项下条件测定。

2.2 结果

对加样回收率采用了GC法进行试验之后，得出了计算回收率的结果，见表1。

表1 所测定的回收率结果统计（n=3）

从上面2.2中配制的样品溶液中精密取出5mL，精密称取5mL内标溶液加入进去，均匀混合，并取出3μL注入到气相色谱仪中，按照上述测定色谱条件，采用内标法测量利鲁唑中的含量，对这3批样品进行测量之后结果如下，见表2。

3 讨 论

3.1 选择色谱柱

表2 测定样品结果

从各种文献结果可知，如果采用DB-624或HP-5毛细管柱测定，根本就不能够有效分离咖啡因与利鲁唑，但是使用了DB-1的毛细管柱最终结果完全不一样，有效且完全分离出了咖啡因和利鲁唑，并且基线比较稳定，柱效较好。

3.2 选择内标

通过对乙酰氨基酚、非娜西丁以及咖啡因进行试验，利鲁唑是不能够和非娜西丁分离，乙酰氨基酚能够和利鲁唑进行分离，但是稳定性比较差，但是咖啡因与利鲁唑之间进行分离效果比较明显，并且整个过程都具备较好稳定性。

3.3 该方法的优势

采用GC法测定利鲁唑含量，有效的避免了使用二类有毒溶剂的甲醇，而且整个测定过程分析都比较简单，柱效比较高，采用GC法测定平均回收率高达100.1%，RSD仅仅为0.36%，但是从文献张维斌2006年发表《反相高效液相色谱法测定利鲁唑片含量》可知，采用反相高效液相色谱法，平均回收率高达99.5%，RSD为0.71%。相比而言GC法最终所测定结果具备可靠的准确度，同时还能够有效控制柱本品质量。同时这种方法消耗样品量比较少。而且通过本研究发现应用GC法测定，柱效较高，并且分析简便、快速且结果准确可靠，能够有效控制本品的质量。从本试验中可以发现采用无水乙醇作为提取剂效果比较明显，之后再采用甲醇定容做紫外色谱分析。提取极少的原料就能够达到试验提取要求，这种提取方式不但灵敏度高而且降低了样品的杂质含量，确保了色谱柱能够连续分析大量的样品。本文构建出了利鲁唑样品的预处理方法与色谱条件操作，其属性比较强，准确度也比较高，已经被利鲁唑的代动力学以及生物等各种有效性研究广泛使用。

[1] 郑静,陈德俊.高效液相色谱法测定布洛芬片中布洛芬含量[J].中国药业,2007,16(23):34-36.

[2] 李凤兰,胡新海.HPLC法测定布洛芬片的含量[J].中外健康文摘,2010,7(4):92-94.

[3] 郭琦,傅强,潘永西,等.毛细管气相色谱法测定布洛芬胶囊的含量[J].中国药师,2009,12(7):56-59.

[4] 米振清,范剑.用HPLC法测定布洛芬片的含量[J].药学服务与研究,2009,9(2):119-122.

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B

1671-8194（2013）21-0105-02