献血者血液检测不合格后追踪检测的分析与应用

沈爱文

(广州血液中心从化血站，广东 广州 510900)

献血者血液检测不合格后追踪检测的分析与应用

沈爱文

(广州血液中心从化血站，广东 广州 510900)

目的 对HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP抗体的ELISA单试剂检测阳性和ALT不合格的献血者进行追踪检测，判断因检测而非献血者本身原因而暂时屏蔽的献血者解除屏蔽的时间，扩大无偿献血者队伍。方法 2008年1月至2012年12月在我站无偿献血的682名无偿献血者，对HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP抗体单试剂检测阳性、或ALT不合格者，间隔六个月后再次抽血进行重新追踪检测，对检测结果进行χ2检验，判断与原来检测结果的差异性。结果 追踪检测各项目合格率分别是：HBsAg 31.6% 、抗-HCV 40.1%、抗-HIV为61.1%、抗-TP 为14.2%，ALT为63.3%。经χ2检验，各检测项目追踪检测合格率有高度显著性差异（P＜0.01）。结论 通过对单试剂检测结果不合格或ALT不合格而暂时屏蔽的献血者血液追踪检测，可以减少因HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP抗体的ELISA检测假阳性或非病理性原因引起的ALT暂时增高而不合理误淘汰献血者，对建立和扩大固定献血者队伍，保护献血者热情，促进无偿献血工作具有重要意义。

HBsAg；抗-HCV；抗-HIV；抗-TP抗体；ALT

根据我国目前献血相关法律法规的规定，对每一个无偿献血者都要用两种不同厂家的试剂分别进行HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP、转氨酶（ALT）等传染病标志物及相关项目检测，双试剂阳性献血者血液直接淘汰，单试剂阳性献血者标本则复检测，双孔复检测阴性则献血者合格，复检测中只要有一孔呈阳性反应则淘汰该血[1,2]。对HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP双试剂阳性的献血者屏蔽，以后不能献血，而对单试剂阳性者则在6个月后复查再决定是否屏蔽，终止献血资格。本站从2008年开始对ELISA单试剂阳性和ALT 不合格的献血者6个月后进行复查，ELISA双试剂阴性解除屏蔽，双试剂阳性则永久屏蔽。对ELISA检测单试剂阳性者6个月后再复查，两次复查均阳性则屏蔽。而ALT受多种因素影响，故ALT不合格的献血者可进行多次追踪检测，不永久屏蔽。本站自2008年1月至2012年12月期间对682例ELISA检测单试剂阳性或ALT不合格献血者进行追踪检测，结果报道如下。

1 材料与方法

1.1 研究对象

2008年1月至2012年12月我站无偿献血者682例，年龄18～55岁。经ELISA检测为HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP其中一项或一项以上单试剂阳性，或ALT不合格者。

表1 ELISA单试剂阳性或ALT不合格献血者追踪检测结果

1.2 仪器和试剂

瑞士哈密顿公司ML-STAR和TECAN全自动加样仪；FAME 全自动酶标分析系统；日立7180生化分析仪；Anthos ht 3酶标仪、科华酶标仪；Itswell实验室数据处理系统；HBsAg、抗-HCV ELISA试剂盒为雅培和科华生物工程公司生产，抗-HIV ELISA试剂盒为伯乐和科华生物工程公司生产，抗-TP ELISA试剂盒为万泰和科华生物工程公司生产，ALT速率法试剂盒为亚太和科华生物工程公司生产，全部试剂批批检定合格，均在有效期范围内使用。

1.3 方法

682例追踪检测标本按原检测不合格项目分类检测，HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP的检测用ML-STAR和TECAN全自动加样仪加样，用FAME 全自动酶标分析系统进行孵育、洗版、加试剂、比色等后处理，用日立7180生化分析仪进行ALT检测，所有数据用Itswell实验室数据处理系统进行汇总。所有检测步骤严格按照试剂盒说明书进行。

2 结 果

ELISA检测单试剂阳性或ALT不合格献血者6个月后追踪检测结果如表1。经χ2检验，χ2=168.6，P＜0.01，各项目追踪检测的合格率有显著性差异。

3 讨 论

血液质量最主要是指献血者血液检测的质量，关系到献血者的健康和受血者的输血安全。根据卫生部的血液检测规定，对所有应用于临床输注的献血者血液的必须进行输血相关传染病标志物，包括HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP和ALT的检测，病原体标志物一般用ELISA法检测，ALT用速率法或赖氏法检测，每个项目要用两个不同厂家的试剂同时进行检测，检测结果阳性血视为不合格血，应进行消毒处理，不能用于临床输注。

是酶联免疫吸附试验 (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，ELISA)是20世纪70年代发明的一种检测抗原抗体反应的免疫学检测方法，因其快速、灵敏、特异、简单等特点，发展十分迅速，已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域的检测和应用研究。但ELISA影响因素多，如试剂质量、标本因素、体内某些内源性物质（酶）的影响、操作技术与标准对照、手工或全自动酶免分析仪的运行情况等均可影响检测结果。因此，对于输血相关传染病标志物（抗原和抗体）的检测有时出现单试剂阳性的情况，要具体问题具体分析，不能简单将阳性结果献血者屏蔽或淘汰。单试剂检测阳性结果可能跟下面因素有关：一是献血者感染病毒或病原体后产生抗体，检测时由于仪器出现故障、或手工操作不当或技术原因可造成检验结果的假阳性。二是ELISA试剂盒均采用基因工程或合成多肽抗原或抗体包被固相，由于病毒存在变异，尤其是HCV和HIV变异度很高，不同厂家选用的抗原或抗体组合不完全相同，来源和用量方面也有差异，就造成不同厂家的ELISA试剂盒检测结果有差异，经常出现同一标本这个厂家试剂做出来阳性，另一厂家试剂做出来阴性的情况[3]，尤其是弱阳性标本，另外检测原理不一致也可造成这种情况。三是由于假阳性引起。标本溶血、凝集不全等外源因素、或内源性物质如类风湿因子、高浓度的非特异性免疫球蛋白、嗜靶抗原的自身抗体、类地高辛、类AFP样物质、重乳糜血清、胆红素、血红蛋白及血液黏度过大等均可引起假阳性[3,4]。

本研究的追踪检测结果显示，各传染病标志物项目单试剂检测阳性或ALT不合格的献血者6个月后血液追踪检测，其合格率有显著性差异，其中ALT的合格率最高，达63.3%，这是因为ALT影响因素多，大多情况下是由非病理因素引起的，如剧烈运动、饮酒等。在正常情况下，ALT主要存在于各组织细胞中，以肝细胞含量最高，其次为肾脏、心肌、骨骼肌和其它器官，当肝脏受损时，此酶即释放于血清中，因此血清中含量增加。临床上将ALT增高作为诊断肝炎的一个指标，但它并不是肝炎的特异性指标，一些非病理性因素也会引起ALT增高，如经常大量饮酒，营养过剩引起肥胖，劳累、服药、饮食不当等，肌肉剧烈活动等均可使此酶活性增高[5]。如献血者是因为非病理性因素引起的ALT增高，当消除该因素后，过6个月后再检测则很多会转变为合格。HBsAg、抗-HCV、抗-HIV分别是HBV、HCV、HIV的血清学标志物，三者均为病毒，传播途径相同，抗体产生方式也大致相似，ELISA试剂盒检测原理相似，均使用一遍进口试剂和一遍国产试剂进行检测，单试剂阳性者6个月后追踪检测其合格率无显著性差异。抗-TP是梅毒螺旋体的抗体，6个月后追踪检测其合格率最低。

对于ELISA检测单试剂阳性的献血者6个月后追踪检测仍为单试剂阳性的情况，有多种原因：可能仍为假阳性结果引起。或是献血者感染了弱病毒株[6]，一般情况下如献血者感染病原体而出现ELISA单试剂阳性时，6个月后检测大多数仍为双试剂阳性反应，但如感染了弱病毒株，则病程进展缓慢，产生可检测的抗原或抗体量少，6个月后检测仍可能为单试剂阳性，本研究中各个项目都有6个月后检测仍为单试剂阳性的情况。

通过对ELISA检测单试剂阳性或ALT不合格献血者的追踪检测，可以减少因为ELISA假阳性或非病理性因素引起的ALT增高而被误淘汰的献血者，既保证了检测结果的准确性，不漏检任何一个阳性标本，保证用血者输血安全，也不轻易误淘汰任何一个热情的献血者，对无偿献血工作具有重要意义。

[1] 戴涌,陈慧萍,汤恒,等.2004年湖北省内使用的HIV抗体ELISA诊断试剂的评估分析[J].江西医药,2005,40(10):623-624.

[2] 余刚宝.某国产与进口HIV诊断试剂检测结果分析[J].临床输血与检验,2010,12( 1):57-58.

[3] 陈景芬,张员梅,刘殿香.ELISA检测抗HCV影响因素分析[J].中华医学实践杂志,2007(6):152.

[4] 张德志.关于ELISA检测影响因素分析[J].中外医学研究,2010, 8(4):53.

[5] 赵彩萍,王雪峰.无偿献血者ALT增高的相关因素分析[J].医学信息,2010,31(9):2582-2583.

[6] Deacon NJ,Tsykin A,Solomon A,et a1.Genomic structure of an attenuated quasi species of HIV-1 from a blood transfusion donor and recipients[J].Science,1995,270(5238):988-991.

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1671-8194（2013）20-0095-02