中药超微饮片的成分组成与原药材成分的差异分析

袁 超

（冷水江市中医院，湖南 冷水江 417500）

中药超微饮片的成分组成与原药材成分的差异分析

袁 超

（冷水江市中医院，湖南 冷水江 417500）

目的 对中药超微饮片的成分组成与原药材成分的差异进行对比分析，为中药超微饮片在临床上的应用提供可靠的参考依据。方法 采取薄层色谱法、紫外分光光度法、高效液相色谱法对小柴胡汤超微饮片与原药材展开定性鉴别、水溶性浸出物重量以及总黄酮和黄芩苷溶出量进行测定，并对比分析测定结果。结果 定性鉴别结果显示超微饮片与原药材在对照品相应位置上均出现相同斑点；相同条件下，超微饮片水溶性浸出物量较原药材多（P＜0.05）；相同溶剂量下超微饮片总黄酮、黄芩苷溶出量较原药材大（P＜0.05）。结论 超微饮片对原有药材的药效学物质基础予以了保留，且有效成分溶出量得到显著增加，值得临床应用。

中药超微饮片；原药材；定性鉴别；有效成分；差异

近几年超微粉碎技术在中药材加工中得到了广泛的应用，使得中药超微饮片在临床上得到了应用。本次研究中出于对中药超微饮片的成分组成与原药材成分的差异进行对比分析的目的，采取薄层色谱法、紫外分光光度法、高效液相色谱法对不同饮片展开了定性鉴别和溶出物重量进行了测定，现汇报如下。

1 材 料

1.1 药品与试剂

小柴胡汤超微饮片与传统饮片，处方组成：柴胡24g、党参9g、黄芩9g、半夏9g、大枣9g、甘草9g、生姜9g。黄芩苷对照品，高效液相用甲醇（色谱纯），其他试剂均为分析纯，高纯水为实验室自制。

1.2 仪器

UV-2401PC分光光度仪；UltiMate-3000型高效液相色谱仪；GLIOM高速冷冻离心机；HHS-4S型电子恒温不锈钢水浴锅；766-1型远红外辐射干燥箱；CP225D型电子天平；Nikon Ecl ipse E600生物显微镜；Nikon Coolpix 4500数码相机。

1.3 数据处理

研究中相关数据资料采用SPSS18.0统计学软件处理，水溶性溶出物重量、总黄酮溶出量测量结果采用均数加减标准差（）进行表示，分别展开t检验和χ2检验，在P＜0.05时，视为差异具有显著统计学意义。

2 实验方法

2.1 小柴胡汤供试品制备

以处方比例称取小柴胡汤超微饮片和传统饮片，分别加入含有药材总量5、10、20倍的水。将超微饮片在100℃的水浴锅中浸泡2次，传统饮片则是经回流提取2次，每次持续30min，而后在5000rpm，25℃条件下离心10min，取上清液，浓缩至250mL，备用。

2.2 小柴胡汤超微饮片粒度测定

取小柴胡汤超微饮片样品少许，将其制成临时水装片，而后在显微镜下对粒径的大小进行观察与测量，同时注意细胞破壁情况。

2.3 小柴胡汤超微饮片与传统饮片定性鉴别

小柴胡超微饮片样品、传统饮片样品、对照品试液以及阴性样品的制备均按照《中华人民共和国药典》（2010版）所著方法进行[1]。

2.4 水溶性浸出物测定

以《中华人民共和国药典》（2010版）所著水溶性浸出物测定方法中热浸法展开测定[2]。

2.5 小柴胡汤超微饮片与传统饮片总黄酮溶出量测定

2.5.1 样品制备

取2.1所制备的样品溶液50mL，浓缩至15mL后加入35mL浓度为95%的乙醇进行沉淀，静置过夜后进行抽滤，在滤液中加入浓度为70%的乙醇定容至50mL，精密移取1.0mL放置在蒸发皿中挥干，而后采取浓度为50%的甲醇进行溶解，定容至100mL作为供试液。

2.5.2 总黄酮溶出量测定

将浓度为50%的甲醇溶液作为空白对照，对基线进行调整，取2.5.1所制备的供试液采取紫外分光光度计在277nm处进程吸光度测定，而后依照标准曲线对小柴胡汤超微饮片与传统饮片每克药材中总黄酮的溶出量进行计算。

2.6 小柴胡汤超微饮片与传统饮片黄芩苷溶出量测定

2.6.1 高效液相色谱法的色谱条件

色谱柱为：C18Kromasil柱，规格为4.6×250mm；流动相为：甲醇-水-磷酸(v∶v∶v，47∶53∶0.2)；流速为：1.0mL/min；进样量为：10µL；检测波长为315nm；柱温为25℃。

2.6.2 样品供试液制备

取2.1所制备的样品溶液50mL，浓缩至15mL后加入35mL浓度为95%的乙醇进行沉淀，静置过夜后进行抽滤，取滤液1.0mL，各4份，而后采取浓度为70%的乙醇定容至10mL，备用。

2.6.3 黄芩苷含量测定

在上述色谱条件下对个样品供试液进行测定。以峰面积，依照标准缺陷对小柴胡汤超微饮片与传统饮片每克药材中黄芩苷含量进行计算。

3 结 果

3.1 超微饮片粒径检测

在显微镜下可发现超微饮片样品绝大多数呈现为颗粒状物质，细胞破壁率占视野的95%以上，直径在5～38µm之间。

3.2 小柴胡汤超微饮片与传统饮片黄芩苷薄层色谱鉴别

经观察发现，在黄芩苷对照品相同位置上超微饮片与与传统饮片均存在墨绿色斑点，并且超微饮片的颜色更为明显，阴性样品为产生干扰。

3.3 水溶性浸出物重量测定结果

经统计得知，在相同溶剂中超微饮片水溶性浸出物重量大于传统饮片（P＜0.05），且随着溶剂量的增加，浸出物重量也随之加重，详见表1。

表1 超微饮片与传统饮片水溶性浸出物重量测定结果统计

3.4 总黄酮溶出量

相同溶剂量下，超微饮片的总黄酮溶出量较传统饮片大（P＜0.05），随着溶剂量的增加溶出量也随之增多，详见表2。

表2 超微饮片与传统饮片总黄酮溶出量比较结果统计

3.5 黄芩苷溶出量比较

相同溶剂量下，超微饮片的黄芩苷溶出量较传统饮片大（P＜0.05），随着溶剂量的增加溶出量也随之增多，详见表3。

表3 超微饮片与传统饮片黄芩苷溶出量比较结果统计

4 讨 论

近年来中医药水平得到了飞速的发展，中药的临床价值越来越受到重视，然随着科技的进步，医疗水平的提高，中药饮片煎煮麻烦、质量不稳定、服用与携带不方便以及卫生状况不佳等缺点逐渐暴漏出来，使中医药的发展受到了一定的影响[3]。随着超微粉碎技术的发展与应用，使中药超微饮片在临床上得到了广泛的应用，本次试验通过对比分析超微饮片与传统饮片的定性鉴别结果、水溶性浸出物重量、总黄酮与黄芩苷溶出量的测定结果得知，超微饮片可以对原有药材的药效学物质基础予以保留，且水溶性浸出物重量、总黄酮与黄芩苷等有效成分的溶出量均较传统饮片高，由此可知，超微饮片在临床上具有较高的应用价值，值得关注。

[1] 蔡光先,郑雪花,刘塔斯,等.桑叶超微粉的粒径检测及显微特征观察[J].时珍国医国药,2009,17(2):246-247.

[2] 李志猛,王跃生,李晓明,等.甘草饮片超微粉碎前后甘草酸溶出行为的比较研究[J].中国中药杂志,2009,28(11):1030-0133.

[3] 司南,杨健,边宝林.不同粒度麻杏石甘汤配方药材超微粉中麻黄碱及伪麻黄碱的溶出率比较[J].中国中药杂志,2009,31(11): 884.

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1671-8194（2013）20-0085-02