Hb＜3g/L溶血的标本对常规生化检验结果的影响

2013-06-23王辉莉

中国医药指南 2013年8期

关键词：脱氢酶基转移酶胆红素

王辉莉

（和龙市人民医院，吉林和龙 133500）

Hb＜3g/L溶血的标本对常规生化检验结果的影响

王辉莉

（和龙市人民医院，吉林和龙 133500）

目的探讨 Hb 浓度低于 3.0g/L 的溶血血清标本中常规生化检验指标的变化。方法选取我院进行健康体检的受检者 40 例，检测溶血与不溶血两种血清后，将两者以不同比例混合，制备成 Hb 浓度为 Hb 低于 1.0g/L 和 1.0～3.0g/L 的两种溶血血清，再进行检测。结果 Hb 低于 1.0g/L 的溶血血清相比非溶血血清，生化检测中 AST、ALT、ALP、LDH、CK、HBDH 浓度均显著升高（P ＜ 0.05），CK-MB浓度有所降低但不具有统计学意义（P ＞ 0.05）。Hb 浓度在 1.0g/L 与 3.0g/L 之间的溶血血清相比非溶血血清，AST、ALT、ALP、LDH、CK、CK-MB、HBDH 浓度均显著升高（P＜ 0.01）。结论轻中度溶血标本都会使常规生化检验中大部分检测结果失真，溶血程度越高检测结果越不可信。

Hb ＜ 3g/L；溶血标本；常规；生化检验

在生化检验中，溶血、乳糜血及黄疸是影响检验结果准确性3个常见的主要因素，其中尤以溶血影响最为常见[1]。溶血除常见的红细胞破坏外，血小板、白细胞等血细胞破坏所释放的某些胞内成分也可干扰或影响临床生化项目测定。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取我院进行健康体检的受检者40例，均早晨空腹采血6mL，分别注入两支真空采血管。去其中一支真空采血管将管帽打开使管内外气压平衡，拔掉空针头，将血液键入管中，以每分钟3000转的速度离心处理，时间为6min，分离血清后即为不溶血的血清。另外一支采血管将空针头直接插入真空管帽上，将血液压入管内，利用管内的气压负压与挤压力产生溶血，以每分钟3000转的速度离心处理，时间为6min，分离血清后即为溶血的血清。血清中不存在肉眼可见的脂血与黄疸。

1.2 仪器与试剂

生化检测仪器为日立7020型全自动生化分析仪，生化检测试剂为四川迈克，质控品为上海科华东菱试剂提供。

1.3 检测方法

检测内容包括血清中AST、ALT、ALP、LDH、CK、CK-MB、HBDH，操作方法均根据试剂盒说明书的内容严格进行。检测溶血与不溶血两种血清后，将两者以不同比例混合，制备成Hb浓度为Hb低于1.0g/L和1.0～3.0g/L的两种溶血血清，再进行检测。

1.4 统计学方法

检验指标资料的数据采用SPSS13.0统计学软件分析，计量单位以表示，组间以t检验，以P＜0.05为具有统计学意义。

2 结果

不同Hb浓度血清溶血标本与非溶血标本的生化检测结果，见表1。Hb低于1.0g/L的溶血血清相比非溶血血清，生化检测中AST、ALT、ALP、LDH、CK、HBDH浓度均显著升高（P＜0.05），CKMB浓度有所降低但不具有统计学意义（P＞0.05）。Hb浓度在1.0g/L与3.0g/L之间的溶血血清相比非溶血血清，AST、ALT、ALP、LDH、CK、CK-MB、HBDH浓度均显著升高（P＜0.01）。

3 讨论

溶血对临床生化检验的干扰主要有以下3种类型：①血细胞高浓度组分逸出，使血浆分析物浓度增加。如果血细胞中某一分析物浓度大大高于血浆，则溶血无疑会导致血浆中泛成分浓度增高，多种生化成分红细胞中的浓度比血浆中的浓度有不同程度的增高，其中精氨酸酶活性比血浆高1500倍以上[2]。乳酸脱氢酶增高180倍，这是因为红细胞中含丰富的乳酸脱氢酶；某些因素引起血小板破坏（如某些商品乳酸脱氢酶试剂中含有表面活性剂或测定前用蒸馏水稀释）也可使乳酸脱氢酶测定增高，其增高程度与血小板数量多少有关。在血浆制备、储存和测定的诸环节上都有可能发生不同程度的血小板破坏，影响乳酸脱氢酶测定，而使用血清测定乳酸脱氢酶只要不发生溶血，结果较稳定，故有人推荐用血清测定乳酸脱氢酶。在人红细胞中门冬氨酸氨基转移酶和谷氨酸氨基转移酶的活性分别是血浆中的38倍和约7倍[3]。在血红蛋白（Hb）1.14g/L±0.27g/L的溶血条件下，血清门冬氨酸氨基转移酶和谷氨酸氨基转移酶活性轻微增高。当Hb＞1.5g/L的溶血可使血清门冬氨酸氨基转移酶的活性明显增高。当Hh＞3.0 g/L的溶血血清谷氨酸氨基转移酶明显升高。②血红蛋白对分光光度测定中吸光度的干扰。溶血能引起可见光谱的短波长段（300-～500nm）的吸光度明显增高。不同类型的分析方法受血红蛋白吸光度干扰的程度不同，动力学法受血红蛋白吸光度的干扰最小，而经典的终点比色法则最易受血红蛋白干扰，导致样品分析物测定浓度高于实际浓度。③某些血细胞组分对化学反应的干扰。Hb是各种重氮试剂法测定血清总胆红素的重要干扰因素，但是不同方法受干扰的程度可不同。其中J-G法受溶血干扰小，Hb2.5g/L的溶血引起的负干扰一般＜15%[4]。SDS加速剂法和二氯苯胺法受溶血干扰较大，Hbl.0g/L的溶血即可使总胆红素测定值下降17%[5]。血红蛋白对重氮剂法测定总胆红素的干扰机制可能是：血红蛋白与胆红素或胆红素重氮反应的中间产物羟基吡咯亚甲基甲醇结合，形成血红素胆红素或血红素一羟基吡咯亚甲醇复合物，从而阻止第二个偶氮胆红素分子的形成，使测定结果低于真值。用动力学法测定血清肌酸激酶时，溶血干扰CK测定，主要是由于红细胞腺苷酸激酶（AK）参与CK检测反应所致。尽管在CK测定中加人了竞争性AK抑制剂——磷酸腺苷，但由于后者在较高浓度时对CK也有非特异性抑制作用，其终浓度一般限制在5mmol/L，在此条件下AK活性只能抑制88%，因此AK干扰不能完全消除。此外，溶血血清CK测定还受红细胞CK的影响，红细胞CK活性比血浆高14倍。当Hb＞2.5g/L的溶血时即可干扰CK的测定，使测定结果高于真值；当Hb＞3.4g/L的溶血时，血清CK增高22%；当Hb＞2.8g/L的溶血时血清CK的活性由无溶血时的57U/L增至77U/L。溶血对动力学法测定血请rGT呈负干扰，Hb3.4g/L的溶血血清rGT测定值降低22%。其抑制机制尚不清楚，推测可能与白细胞和血小板释放的甘氨酸有关。已知甘氨酸是该酶的抑制剂，血小板中甘氨酸含量是血浆的10～15倍。