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郁李微型繁殖技术研究

2013-06-21宋洪文

绿色科技 2013年2期
关键词:丛生外植体生根

宋洪文,周 鑫

(黑龙江林业职业技术学院,黑龙江 牡丹江 157011)

1 引言

郁李(PrunusjaponicaThunb)属蔷薇科、樱属。落叶灌木,高约1.5m,小枝纤细,叶卵圆形,长3~7cm,宽1.5~2.5cm,先端渐尖,基部圆形,边缘有浅重锯齿,花先于叶或与叶同时开放,花梗长5~10mm,花直径约2cm,倒卵形,花瓣粉红色或近白色,核果近球形,直径约1cm,暗红色,光滑而有光泽,花期3~5月,是园林中重要的观花、观果树种,常与棣棠、迎春等其他花木配植,也可作花篱栽植。郁李常规用种子繁殖,花色变化大,花色的不确定性加大了植物配置难度,限制了郁李的使用,而微型繁殖技术不但可以快速繁殖,同时使花色稳定,利于园林利用。

2 材料与方法

2.1 材料

选取健壮的枝条,用饱满而未萌发的侧芽作为外植体,切成小段,每段长2~3cm。每段带有1个侧芽,用自来水冲洗15min,在无菌条件下用75%的酒精消毒30s,再用0.1%升的汞消毒7~8min,最后用无菌水冲洗6~8遍,在超净工作台上把它们接种于不同的培养基上。

2.2 方法

2.2.1 侧芽诱导培养

以MS为基本培养基,不同种类、浓度的生长调节剂组合形成1~48号侧芽诱导培养基(表1),将外植体接种于不同的培养基上,培养2周后,观测生长情况。

表1 不同生长调节剂组合培养基编号

2.2.2 增殖培养

根据2.2.1实验结果,将诱导培养中高达到1cm的侧芽,接种于以MS为基本培养基,KT浓度分别为2.0mg/L、2.5mg/L、3.0mg/L、3.5mg/L、4.0mg/L,IBA浓度分别为0.1mg/L、0.5mg/L、1.0mg/L、1.5 mg/L的丛生芽诱导培养基上,培养2周后,观测生长情况。

2.2.3 生根培养

将诱导培养中高达到1cm的侧芽,接种于以1/2 MS为基本培养基,KT浓度分别为0.1mg/L、0.2mg/L、0.4mg/L,IBA浓度分别为0.5mg/L、1.0mg/L、1.5mg/L的生根培养基上,培养2周后,观测生长情况。

3 结果与分析

3.1 侧芽诱导培养

外植体在不同的侧芽诱导培养基生长15d,每种培养基随机抽取10个样本,统计分析诱导率结果,从表2可以看出NAA对侧芽诱导结果有一定影响,但差异不显著;IBA对侧芽诱导结果有显著影响,以0.1mg/L最好,0.5mg/L次之,1.0mg/L最差;BA 对侧芽诱导结果有显著影响;KT对侧芽诱导结果有极显著影响;NAA×BA的交互作用对侧芽诱导不显著;NAA×KT和IBA×BA的交换作用对侧芽诱导均显著;IBA×KT交换作用对侧芽诱导极显著。IBA与KT组合好于其他组合,从图1可以看出IBA与KT组合的28号培养基侧芽诱导率最高,达到87.9%,即 MS+KT1.5+IBA0.1侧芽诱导效果最好。

表2 不同培养基侧芽诱导率方差分析结果

图1 不同培养基平均侧芽诱导率统计

3.2 丛生芽诱导培养

随机抽取培养基样品各40个,统计分析丛生芽有效(不含玻璃化或形成愈伤组织的芽)增值率(表3),KT浓度变化对丛生芽有效增值率影响显著(P<0.05),KT促进芽分化效果显著(P<0.05),过高浓度KT产生玻璃化或形成愈伤组织,使丛生芽有效增值率降低;IBA促进芽生长作用显著(P<0.05),在同一KT浓度下,随着IBA浓度的升高芽的高生长加大,增值率降低,而 KT在3.0mg/L,IBA 0.10mg/L有效增值率最高,因而最佳丛生芽诱导培养基为MS+KT3.0mg/L+IBA0.1mg/L,有效增值率5.9。

表3 不同培养基侧芽有效增值率方差分析

3.3 生根培养

随机抽取不同培养基各40个样品,统计有效根发生率(表4),IBA促进生根效果显著(P<0.05),浓度低于1.0mg/L时随着浓度增加促进生根效果明显,浓度大于1.0mg/L时,形成愈伤组织、出现玻璃化现象增加,因而随着浓度增加有效根数量减少;KT抑制根的发生,随着浓度的增加有效生根率较低。最佳根诱导培养基为1/2MS+IBA0.5,生根率达85%。

表4 不同培养基有效生根率方差分析

4 结语

郁李微型繁殖诱导侧芽分化最佳培养基:MS+KT1.5+IBA0.1mg/L,诱导率达到87.9%;丛生芽诱导最佳培养基:MS+KT3.0mg/L+IBA0.1mg/L,增值率为5.9;生根最佳培养基:1/2MS+IBA0.5mg/L,生根率85%。

[1]周以良,董世林,聂绍荃.黑龙江树木志[M].哈尔滨:黑龙江科技出版社,1986.

[2]谭文澄,戴策刚.观赏植物组织培养技术[M].北京:中国林业出版社,1991.

[3]谷瑞升,蒋湘宁.植物离体培养器官发生调控机制的研究进展[J].植物学通报,1999(3):238~294.

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