幼貂抗犬瘟热病毒母源抗体消长规律的测定

张力燕 陈 晨 李 鹏 谢之景 （山东农业大学动物科技学院 泰安 271018）

幼貂抗犬瘟热病毒母源抗体消长规律的测定

张力燕 陈 晨 李 鹏 谢之景*（山东农业大学动物科技学院 泰安 271018）

本试验采用20只未进行免疫接种的健康幼貂，分别在30、45、60日龄进行颈静脉采血，制备血清，测定抗CDV的中和抗体滴度。结果表明，30日龄绝大多数幼貂抗CDV母源中和抗体效价在1:30.0以上，45日龄母源抗体均较低，血清抗CDV中和抗体效价小于1:20.0。60日龄母源抗体基本消失，血清抗CDV中和抗体效价等于或小于1:8.0。所以45日龄对幼貂进行CD免疫接种较好。

水貂 犬瘟热病毒 母源抗体

犬瘟热(Canine Distemper, CD)是由犬瘟热病毒(Canine Distemper virus, CDV)引起犬科、鼬科、和浣熊科等动物的一种急性、高度接触性传染性疾病[1]。CDV是副粘病毒科麻疹病毒属的成员，病毒粒子呈多形性，多数呈球形，直径大多数在150～300nm之间，为负链单股不分节的RNA病毒，只有一个血清型。目前CDV自然感染的动物范围在不断扩大，除犬科外，人们又发现了许多CDV的新宿主，例如鼬科的雪貂、水貂，浣熊科的小熊猫、浣熊，猫科的猫、狮、孟加拉虎、豹，大熊猫科的大熊猫，偶蹄目猪科的猪，日本猕猴和人等。CD在世界各地均有分布，所有养犬和经济动物的国家均有CD的发生。CD疫苗的应用在一定程度上控制了CDV的流行[2,3]，但是在实际生产过程中仍有许多疑似CDV感染的病例。CD在我国广泛存在，我国部分省市的皮毛动物特别是水貂饲养场不断有CD病例的出现，给养殖户造成很大的经济损失。造成免疫失败的原因较多，但其确切原因尚不清楚，但抗CDV母源抗体的干扰是造成免疫失败的一个重要原因。为此对幼貂的抗CDV母源中和抗体进行测定，找出其消长规律，为选择CD初次免疫接种的时机提供实验数据。本研究具有重要的理论意义和生产实践意义，为保证养貂业的健康发展具有重要的现实意义。

1 材料和方法

1.1 毒株与细胞

CDV-M1本实验室分离鉴定保存，MDCK细胞由辽宁出入境检验检疫局胡传伟副研究员惠赠。

1.2 试验动物

从潍坊诸城5个养貂场随即抽取20只未进行免疫接种的健康幼貂。

1.3 方法

1.3.1 中和抗体效价的测定 分别在30、45、60日龄对20只试验幼貂进行颈静脉采血，制备血清，将血清置56℃水浴30 min进行灭活，置-20℃冻存，待检。采用血清微量中和试验测定血清抗CDV中和抗体效价。采用固定病毒—稀释血清法[4]，测定血清抗CDV的中和抗体滴度。

1.3.2 对病死水貂的综合诊断 对在试验过程中死亡的水貂从临床症状、剖检变化、病理组织学、病毒形态学观察等方面对病死水貂作出综合诊断。

2 结果

2.1 中和抗体效价

幼貂在30日龄抗CDV母源中和抗体效价较高，效价等于或大于1:18.6；幼貂在45日龄母源抗体均较低，血清抗CDV中和抗体效价等于或小于1:19.1；幼貂在60日龄抗CDV母源中和抗体基本消失，血清抗CDV中和抗体效价等于或小于1:8.0。母源抗体随着日龄的增加逐渐下降，甚至消失。见表1。

表1 幼貂抗CDV母源中和抗体 (log2)

2.2 对死亡水貂的诊断结果

6、15、16及19号幼貂在试验过程中死亡，出现CDV感染的典型临床症状，病初鼻镜发干，流浆液性鼻涕，眼结膜充血潮红，淌眼泪，伴有轻度的咳嗽，体温升高。随着病程的发展，鼻镜出现龟裂，流脓性鼻涕，咳喘加重，有脓性眼屎。

对病死水貂进行解剖，气管黏膜有出血，肺部有米粒大圆点样出血，甚者发生实变；胃底部有弥漫性出血，十二指肠、空肠前段点状或弥漫性出血，回盲口有溃疡，甚者整个肠道弥漫性出血；肝脏有点状出血；膀胱黏膜点状或弥漫性出血，肾脏实质点状出血；有神经症状的病死犬解剖脑膜点状出血及脑实质点状出血。在气管黏膜上皮细胞和膀胱粘膜上皮细胞胞浆内和核内见到包涵体。对病料进行处理后，用0.5%磷钨酸进行负染，电镜观察。能够观察到CDV病毒粒子。诊断结果表明这4只幼貂是感染CDV而发病死亡。

3 讨论

母源抗体的被动免疫对新生动物是十分重要的，然而对疫苗的接种也带来一定的影响，若免疫接种时间过早，母源抗体的干扰易造成CD免疫失败，严重影响免疫效果，若免疫接种时间过晚，则动物易出现CD免疫空白期，动物易于感染CDV。为此，弄清幼貂抗CDV母源中和抗体的消长规律有很重要的意义。对20只未进行免疫接种的健康幼貂的检测结果，在30日龄绝大多数幼貂抗CDV母源中和抗体效价在1:30.0以上，仅有2只幼貂的抗CDV的母源中和抗体效价小于1:30.0，这表明绝大多数幼貂在30日龄抗CDV的母源中和抗体效价较高，如此时对幼貂进行CD免疫，母源抗体会严重干扰CD的免疫效果，易造成免疫失败；幼貂在45日龄母源抗体均较低，血清抗CDV中和抗体效价小于1:20.0，尽管此时母源抗体也会影响CD的免疫，但是免疫能够获得成功；幼貂在60日龄母源抗体基本消失，血清抗CDV中和抗体效价等于或小于1:8.0，若此时进行免疫能获得良好的免疫效果，但是一些幼貂在60日龄前会有一段免疫空白期，在免疫空白期幼貂易于感染CDV而发病，这可能是4、15、16及19号幼貂感染CDV发病死亡的原因。根据上述分析，在45日龄对幼貂进行CD免疫接种较好，此时进行CD免疫接种能够避免免疫空白期的出现，同时又能获得较好的免疫效果，这与幼狐的抗CDV母源抗体消长规律基本相似[4]。

[1] Gassen U, Collins FM, Duprex WP, et al. Establishment of a rescue system for canine distemper virus. J Virol 2000 Nov;74(22): 10737-44.

[2] Franke-V; Matern-B; Ackermann-O; et al.The prevention of distemper in zoo animals. Berl-Munch-Tierarztl-Wochenschr. 1989 Feb 1; 102(2): 56-8.

[3] Tizard-I. Grease, anthraxgate, and kennel cough: a revisionist history of early veterinary vaccines. Adv-Vet-Med. 1999; 41: 7-24.

[4] 杨笃宝, 雷留真, 谢之景等. 幼狐犬瘟热母源抗体消长规律的测定[J]. 山东畜牧兽医. 2009, 8: 9-10.

S858.92

A

1007-1733(2013)09-0010-02

2013–06–13）

*通讯作者