新疆汉族与维吾尔族酒依赖患者家庭暴力行为与COMT基因多态性关联分析☆

邹韶红赵宗峰马瑞董红斌佟钙玉

家庭暴力不仅是一个社会问题，也是一个医学、公共卫生和精神卫生问题。开展家庭暴力的预防研究是当前精神应激研究领域的重要任务，寻找家庭暴力的危险因素，又是开展预防研究的重要手段。以往的研究可以将酒依赖患者家庭暴力的相关因素概括为：生物学因素、社会文化因素和社会心理学因素。迄今为止，有关酒依赖患者家庭暴力的生物学研究无论国内国外都十分有限[1]。暴力行为除与社会、心理因素有关外，还与一些中枢神经递质及其相关的基因和基因表达有关[2]。其中，人类儿茶酚氧位甲基转移酶（Catechoi-O-methyltran-sferase，COMT）基因多态性成为暴力攻击行为基因研究的热点之一。国内和国外的部分研究显示rs4680位点低活性Met/Met基因型与攻击行为有关[3-5]，但也有相反的研究结果认为，高活性Val/Val基因型更富有攻击性[6]。针对不同民族酒依赖患者家庭暴力行为的遗传学研究目前还未见报道，故本研究以新疆地区汉族与维吾尔族酒依赖家庭施暴者和酒依赖无施暴者为研究对象，探讨暴力行为与COMT基因rs4818、rs4680两位点多态性的关联性。

1 对象和方法

1.1 研究对象 来自新疆精神卫生中心戒酒科及我院临床心理科，符合中国精神障碍分类与诊断标准第三版（Chinese Classification and Diagnostic Criteria of Mental Disorder，CCMD-3）和国际疾病分类（International Statistical Classification of Diseases，ICD-10）酒依赖诊断分类，年龄25岁～65岁，排除严重躯体疾病和其他精神疾病等情况。共有194例酒依赖患者纳入研究，均为男性，年龄25～64岁，平均（42.25±7.04）岁。其中汉族126例，平均年龄（42.14±7.63）岁；维吾尔族68例，平均年龄（42.47±6.92）岁，两组年龄无统计学差异（P>0.05）。

全部入组对象及家属对本研究知情，并签署知情同意书。本研究通过院伦理委员会批准。

1.2 研究方法

1.2.1 家庭暴力问卷调查 自行设计家庭暴力调查表，内容包括社会人口学资料（年龄、性别、族别、婚姻状况、职业和受教育年限等）和对家人施暴情况。对施暴的评定标准主要依据家庭暴力的定义（指对配偶进行伤害、折磨、摧残和压迫等人身方面的强暴行为，其手段有殴打、捆绑、凌辱人格、残害身体、限制人身自由、精神摧残、遗弃以及性虐待等）[7－8]，具体调查内容为：①在家中您对家人是否采取过以下行为（可多项填）：羞辱或吵架漫骂；摔东西；限制家人衣食住行、超负荷劳动等；徒手殴打(拳打脚踢)；持械殴打(如捆绑、鞭打)；非意愿性性行为。②如果对家人曾发生过这种行为，请问发生次数：1周3次以上；1周1～2次；1月2～3次；半年2～3次；1年2～3次。如果1年至少有2～3次任1项施暴行为则认为属于施暴组。

由1名经过系统学习和训练的精神科主治医师在安静独立的房间分别对各研究对象进行访谈。有关家庭暴力的问题由研究者与患者进行深入访谈后记录。对精神摧残方面，被施暴者是否感到痛苦，询问其家属以落实。

1.2.2 基因组DNA的提取及特定片段的PCR扩增 问卷调查后，于次日晨采集空腹外周静脉血3～4mL，放置于5mL的EDTA－Na2抗凝管中，－80℃冰箱储存。用TIANGEN血液基因组DNA提取试剂盒提取样本DNA。PCR引物序列由北京鼎国生物技术工程有限责任公司合成，上游引物为5’－TCGTGGACGCCGTGATTCAGG－3’，下 游 引 物 为5’－ACAACGGGTCAGGCATGCA－3’。PCR反应总体系为40μL，反应液为 10×buffer（含 Mg2+，20μM/μL）4μL，dNTP（10μM/μL）1μL，TaqDNA 聚合酶（2U/μL）1μL，模板 DNA 1μL，上下游引物各1μL（10μM/μL），加ddH2O至40μL，在PTC－100 PCR扩增仪上扩增。反应程序：95℃预变性3min，进入循环，95℃变性30s，68℃退火1min，72℃延伸90s，共35个循环；72℃延伸7min，4℃保存。反应结束后取5μL扩增产物于1×TAE缓冲液中用1%琼脂糖凝胶电泳20min（恒压150V），电泳结果在凝胶成像系统拍照保存。

1.2.3 测序分型 扩增产物由北京鼎国生物技术工程有限责任公司进行目的片段测序，结果返回后对相应位点分型并记录。

1.3 统计学方法根据施暴情况，将汉族与维吾尔族酒依赖患者分别分为施暴和无施暴两亚组。使用SPSS 10.0，应用χ2检验计算基因型分布是否符合Hardy-Weinberg平衡法则，χ2检验比较同一民族两亚组之间基因型以及等位基因频率的分布差异，并应用QUANTO version1.2计算统计检验功效（1-β）值。应用SHEsis软件，经χ2检验进行两位点联合分析，D’值>0.7定义为强连锁[9]。检验水准α为0.05，双侧检验。

2 结果

汉族酒依赖患者组中，有70例（55.6%）施暴者，平均年龄（40.79±7.24）岁，无施暴者平均年龄（41.84±7.92）岁，二者无统计学差异（P>0.05）；维吾尔族酒依赖患者组中，有34例（50.0%）施暴者，平均年龄（41.69±6.70）岁，无施暴者平均年龄（41.25±6.11）岁，二者无统计学差异（P>0.05）。两民族酒依赖患者中，施暴者的分布无统计学差异（P>0.05）。

2.1 Hardy-Weinberg平衡检验 汉族酒依赖患者中两亚组 的 rs4680（χ2=0.155，P=0.694；χ2=0.140，P=0.708）和rs4818（χ2=2.649，P=0.104；χ2=0.024，P=0.876）位点基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡法则；维吾尔族酒依赖患者中两亚组的 rs4680（χ2=3.316，P=0.069；χ2=0.105，P=0.746）和 rs4818（χ2=3.316，P=0.069；χ2=1.492，P=0.222）位点基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡法则。

表1 两民族施暴组与无施暴组rs4680位点基因型与等位基因频率分布

表2 两民族施暴组与无施暴组rs4818位点基因型与等位基因频率分布

2.2 rs4680位点基因型与等位基因频率分布的比较 两民族酒依赖施暴组与酒依赖无施暴组rs4680位点基因型和等位基因频率差异均无统计学意义（P>0.05）。见表1。汉族两亚组统计检验功效（1-β）值为0.760，维吾尔族两亚组统计检验功效（1-β）值为0.570。

2.3 rs4818位点基因型与等位基因频率分布的比较 两民族酒依赖施暴组与酒依赖无施暴组rs4818位点基因型和等位基因频率差异均无统计学意义（P>0.05）。见表2。汉族两亚组统计检验功效（1-β）值为0.769，维吾尔族两亚组统计检验功效（1-β）值为0.615。

2.4 两位点联合作用分析 两个SNPs的连锁不平衡检验以及双位点联合分析结果表明，汉族两组rs4818-rs4680之间 D’=1.000，r2=0.235；维吾尔族两组 rs4818-rs4680之间D’=1.000，r2=0.519。两民族两个SNPs位点之间存在强连锁不平衡，两个SNPs处于同一个单倍型，可以进行单倍型分析。汉族、维吾尔族酒依赖施暴组与酒依赖无施暴组进行单倍型频率的比较，两民族两组间rs4818-rs4680组成的单倍型频率差异均不具有统计学意义（P>0.05）。见表3。

3 讨论

COMT基因是暴力攻击行为研究的重要候选基因之一，到目前为止已发现COMT基因编码区至少有8个单核苷酸多态性变异[10],COMT基因的rs4818、rs4680多态性均位于第四外显子。本研究采用病例对照研究方法，选择rs4818、rs4680两个位点进行分析，试图了解新疆汉族与维吾尔族酒依赖患者家庭暴力行为与COMT基因多态性的关系。结果提示，rs4680与rs4818位点两民族酒依赖施暴组与无施暴组基因型与等位基因频率差异均不具有统计学意义（P>0.05），这说明COMT基因rs4818、rs4680位点可能不是新疆汉族与维吾尔族暴力行为的单一易感基因，此与Jones等[11]的推测不一致，他认为COMT基因不仅与精神分裂症患者的攻击行为有关，也可能与普通人群的攻击行为有关。另外，刘文英等[12]和黄雄等[13]研究国内精神分裂症患者暴力行为与rs4680位点基因多态性的关系，未发现二者之间相关，从侧面支持了本研究的研究结果。

单倍型分析能够检测出变异的连锁不平衡，比单个位点的分析更具效能[14]。对rs4818、rs4680两位点联合作用分析提示，两民族两组间rs4818-rs4680组成的单倍型频率差异均不具有统计学意义（P>0.05）。

针对酒依赖患者家庭暴力行为的遗传学研究非常有限，本研究虽然得出新疆汉族与维吾尔族酒依赖患者家庭暴力行为与COMT基因rs4818和rs4680位点可能无关联性的结论，但考虑到样本数量偏少，且统计检验功效（1-β）值并不高，结论有出现假阴性的可能，后续的工作需要扩大样本数量，尤其是维吾尔族样本数量，结合环境因素的交互作用，进一步探讨家庭暴力行为与COMT基因多态性的关联及连锁。

[1]赵幸福,张亚林.暴力攻击行为相关基因的研究进展[J].国外医学精神病学分册，2004,31(3):147－149.

[2]Gerra G,Garofano L,Bosari S,et al.Analysis of monoamine oxi⁃dase A(MAO－A)promoter polymorphism in male heroin－depen⁃dent subject:behavioural and personality correlates[J].Neural Transm,2004,111(5):611－621.

[3]Kim YR,Kim JH,Kim SJ,et al.Catechol－O－methyltransfer⁃aseVal158Met polymorphism in relation to aggressive schizophre⁃nia in a Korean population[J].Eur Neuropsychopharmacol,2008,18(11):820－825.

[4]Gu Y,Yun L,Tian Y,et al.Association between COMT gene and Chinese male schizophrenic patients with violent behavior[J].Med Sci Monit,2009,15(9):484－489.

[5]Matthew D,Albaugh BA,Valerie S,et al.COMT Val158Met gen⁃otype as a risk factor for problem behaviors in youth[J].J Am Acad Child Adolesc Psychiatry,2010,49(8):841－849.

[6]Caspi A,Langley K,MilneB,et al.A replicated molecular genet⁃ic basis for subtyping antisocial behavior in children with atten⁃tion－deficit/hyperactivity disorder[J].Arch Gen Psychiatry,2008,65(2):203－210.

[7]张亚林.高级精神病学[M].长沙:中南大学出版社.2007:801－811.

[8]邹韶红,张亚林,张勇,等.夫妻暴力社会人口学及社会文化因素的研究[J].中国临床心理学杂志,2010,18(3):326－328.

[9]Gabriel SB,Schaffner SF,Nguyen H,et al.The structure of hap⁃lotype blocks in the human genome[J].Science,2002,296(5576):2225－2229.

[10]王美萍,张文新.COMT基因多态性与攻击行为的关系[J].心理科学进展,2010,18(8):1256－1262.

[11]Jones G,Zammit S,Norton N,et al.Aggressive behaviour in pa⁃tients with schizophrenia is associated with catechol－O－methyl⁃transferase genotype[J].Br J Psychiatry,2001,179(4):351－355.

[12]刘文英,周云飞,高欢,等.精神分裂症COMT基因多态性与暴力行为的关联研究[J].中国民康医学,2008,20(11):1105－1107.

[13]黄雄,姜南林,振强,等.COMT基因多态性与精神分裂症暴力攻击行为的关联性[J].广东医学,2010,31(1):82－83.

[14]Frazer KA,Ballinger DG,Cox DR,et al.A second generation hu⁃man haplotype map of over3.1 million SNPs[J].Nature,2007,449(7164):851－861.