Her－2／neu和CD138在乳腺癌中表达及意义

陈 军，胡永均，张桃华，陈玲玲

（1.上海市嘉定区中心医院 病理科，上海201800；2.上海市第六人民医院金山分院）

乳腺癌是我国女性最常见的恶性肿瘤之一，癌细胞的侵袭转移是影响乳腺癌患者预后的重要因素。癌细胞的侵袭转移是一个非常复杂的过程，与细胞－细胞和细胞－细胞外基质的黏附功能降低有关。CD138属于Syndecans基因家族，是一类细胞表面跨膜蛋白多糖，作为膜表面黏附受体参与细胞与细胞及细胞－细胞外基质之间的黏附。大量实验研究表明，CD138促进了恶性肿瘤的发生、发展、浸润及转移［1－3］。本研究采用免疫组织化学方法检测乳腺癌和乳腺良性病变组织中CD138的表达，探讨其与Her－2／neu的表达、乳腺癌转移及各临床病理因素之间的关系，以评价CD138在乳腺癌发生发展及转移中的作用。

1 材料与方法

1.1 临床资料 收集我院1998－2005年手术切除

的乳腺癌根治标本102例，患者均为女性，年龄25－75岁，包括浸润性导管癌78例，导管内癌9例，浸润性小叶癌9例，特殊类型癌6例，并结合其相应的临床资料，按国际抗癌学会（UICC）及美国癌症联合会（AJCC）建议的TNM分期法（第六版）对其进行临床分期，同时选择15例乳腺良性肿瘤（纤维腺瘤）和15例正常乳腺组织（巨乳症患者的乳腺组织）作对照。其中93例（91.18%）有完整随访资料，生存超过5年者70例（68.63%），超过10年者49例（48.04%）。所有标本均经中性10%甲醛固定，常规石蜡包埋，4μm厚连续切片。

1.2 主要试剂和方法 Her－2／neu、CD138单克隆抗体，S－P试剂盒，DAB－酶底物显色试剂购于福州迈新生物技术开发公司，采用免疫组化的方法，按照公司试剂盒的操作步骤执行。用已知阳性染色的乳腺癌切片为阳性对照片，用PBS代替一抗作阴性对照。

1.3 结果判断 Her－2／neu阳性定位于细胞膜和（或）细胞质内，表达结果判定标准：－（无染色或少于10%细胞膜染色），＋（＞10%细胞有不完整胞膜染色），＋＋（＞10%细胞有较弱但完整的胞膜染色），＋＋＋（＞10%细胞有较强的完整胞膜染色），（－＋）视为无或低表达，（＋＋－＋＋＋）为过表达。CD138阳性定位于细胞膜和（或）细胞质内，在10×40倍光镜下随机观察5个视野，计算其平均数，每个视野计数100个细胞，以整张切片阳性细胞＞25%为阳性（＋），＜25%为阴性（－）。

1.4 统计学处理 Her－2／neu、CD138在组织中的阳性表达率比较用卡方检验，相关性用Spearman相关分析（统计软件STATA8.0）。

2 结果

2.1 Her－2／neu、CD138在乳腺正常组织，良性肿瘤及乳腺癌组织中的表达（表1）

表1 Her－2／neu、CD138在乳腺正常组织、良性肿瘤及癌组织中的表达

由上表可见，Her－2／neu在癌组织中的表达与正常乳腺组织和良性肿瘤中的差异有显著性（P＜0.05），在不同种类的乳腺癌中无差异（P＞0.05），Her－2／neu在0期与Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ－Ⅳ期分别为30%、38.09%、59.18%、81.81%，Her－2／neu阳性表达与临床分期之间：0期与Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ－Ⅳ期差异有显著性（P＜0.05），阳性表达与患者5年生存率差异有显著性（P＜0.05），在有转移和无转移组中差异有显著性（P＜0.05）。此外，Her－2／neu阳性表达与年龄、肿瘤大小、ER、PR无关。

CD138在癌组织中的表达与正常乳腺组织和良性肿瘤中的差异有显著性（P＜0.05），在不同种类的乳腺癌中无差异（P＞0.05），CD138在0期与Ⅰ期、Ⅱ 期、Ⅲ－Ⅳ 期 分 别 为 80%、66.67%、34.69%、18.18%，CD138阳性表达与临床分期之间：0期与Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ－Ⅳ期差异有显著性（P＜0.05），阳性表达与患者5年生存率差异有显著性（P＜0.01），在有转移和无转移组中差异有显著性（P＜0.05）。此外，CD138阳性表达与年龄、肿瘤大小、ER、PR无关。

图1 Her－2／neu表达于乳腺癌细胞膜和细胞质内SP×200

图2 CD138表达于乳腺癌细胞膜和细胞质内SP×200

2.2 Her－2／neu、CD138在乳腺癌中表达的相互关系 见表2。

表2 Her－2／neu、CD138在乳腺癌中表达的相互关系

由上表可见，Spearman相关分析rs＝－0.259，P值为0.009＜0.01，显示两者在乳腺癌中的表达相关。

3 讨论

CD138（Syndecans－1）基因是黏附分子整合素跨膜黏结蛋白的聚糖家族成员，人类基因位于2号染色体，亦称蛋白聚糖，存在于所有哺乳动物中，是细胞间质、细胞质膜的重要组成成分。一般认为，硫酸乙酰肝素与胞外配体的结合是CD138功能活性的关键。这些配体主要包括多肽生长因子、胞外基质蛋白、细胞–细胞黏附分子、酶和其他蛋白（胶原Ⅰ、Ⅲ和Ⅴ型、层黏连蛋白、替拿素、纤黏连蛋白等）［4］。CD138具有一系列功能：①生长因子受体激活的调节。CD138的表达水平可直接影响肝素结合生长因子家族（如FGF）、肝细胞生长因子（HGF）、肝素－结合表皮生长因子（EGF）、血管内皮生长因子等与受体的结合。②参与细胞－胞外基质黏附。介导细胞黏附到胞外基质蛋白的主要受体为整合素家族受体，但胞外基质蛋白还具有结合起来糖胺聚糖的能力，尤其是硫酸乙酰肝素。实验证明，细胞能利用整合素和CD138双受体来介导细胞－胞外基质的黏附，硫酸乙酰肝素蛋白聚糖增加了结合作用的总的强度。③促进细胞－细胞间黏附。细胞可通过其表面的CD138与邻近细胞上的受体如血小板内皮细胞黏附因子、L－选择素等结合达相互黏附目的。④与细胞移行有关。CD138表达量减少或缺失可降低细胞－基质间黏附力，加速细胞的移行。CD138是一种跨膜蛋白聚糖，可表达在各种来源的肿瘤细胞表面，包括骨髓瘤、卵巢癌，乳腺癌、肝癌、霍奇金淋巴瘤及某些HIV有关的淋巴瘤。在正常细胞恶变后，细胞膜表面CD138分子的表达常发生改变，并且与肿瘤的恶性程度、预后有一定相关性［2、3］。

本研究显示乳腺癌组织中CD138阳性表达率为42.16%，显著低于乳腺良性高变组织的表达率100.00%（P＜0.01）；CD138在高中分化、低分化乳腺癌中阳性表达率分别为47.5%和22.72%，分化程度越高，表达越强（P＜0.05）；在临床分期组中分期越高，其表达降低，差异有显著性（P＜0.05）；在有淋巴结转移组的表达（33.85%）显著低无淋巴结转移组（56.75%，P＜0.05），这与史伟峰等［5］研究的结果一致，提示乳腺癌细胞CD138表达降低或缺失导致肿瘤细胞与细胞，细胞与细胞外基质黏附功能降低，细胞生长接触抑制功能丧失，导致瘤细胞大量增殖，具有侵袭性，这可能与乳腺癌侵袭转移密切相关。

Her－2／neu基因又称 C－erbB－2基因，是一种原癌基因，主要在胚胎发育时开始表达，成年后正常组织可检到少量表达。位于人第17号染色体长臂，分子量为185KD的跨膜糖蛋白，具有酪氨酸激酶的活性［6］，而氨基酸的序列和结构与表皮生长因子受体（EGFR）同源，故又称为人表皮生长因子相关基因，参与调控细胞生长、增殖及分化，其产物过度表达与肿瘤恶性程度高、生长快、预后差相关。应用DNA杂交分析法发现 Her－2／neu只在腺癌中扩增，而Her－2／neu在乳腺癌中的扩增率为其他腺癌的3倍［7］。以上研究表明，Her－2／neu的表达对乳腺癌的发生、转移和早期发现有重要意义。本研究显示Her－2／neu在乳腺良性病变中的表达率低（6.67%），而在乳腺癌组织中的阳性表达率可达56.86%，差异有高度显著性，与一些研究［8］结果一致，表明Her－2／neu与乳腺癌恶性程度有关，随着阳性表达率的增高，恶性程度也增高。故它对良恶性病变有一定的鉴别诊断价值。本实验还发现Her－2／neu在有淋巴结转移的乳腺癌中的阳性率（66.15%）明显高于无转移者（43.24%），差异有高度显著性。有学者［8］认为乳腺癌中 Her－2／neu的表达不仅与淋巴结转移显著相关，而且与淋巴结转移数目相关。并对292例原发性乳腺浸润癌中的Her－2／neu蛋白染色，证实Her－2／neu扩增及蛋白表达与组织分级、淋巴结转移程度、死亡率、复发率呈正相关。其他学者也有相同的报道［8－10］。本实验结果与以上学者的研究结果相吻合，这表明Her－2／neu表达与乳腺癌的转移密切相关，与淋巴结转移状况一样可以作为评估乳腺癌患者预后指标之一。

雌激素对女性生殖器官（包括阴道、子宫、输卵管、卵巢）及乳腺的生长、发育起着最为关键的作用，而且对男性的睾丸功能、精子发生以及附后属性器官也极为重要。本研究发现，CD138、Her－2／neu在乳腺癌组织中的表达与ER无关，对乳腺癌激素治疗的判断意义不大，与Tang等［11］报道一致。

本研究发现，CD138和 Her－2／neu密切相关，CD138在乳腺癌组织中低表达时 Her－2／neu高表达，乳腺癌组织中低表达时Her－2／neu高表达，表达率增高，CD138阳性表达率下降，二者呈负相关（P＜0.01）。两者在乳腺癌的发生发展中起重要作用，在肿瘤诊断、病情进展、转移潜能和预后的评价等方面具有很大的潜在价值。因此，随着分子生物学的不断发展，癌基因研究的不断深入，相信该基因对癌的预测、诊断、治疗、预后的价值会得到更为全面的认识。

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