类风湿关节炎患者不同阶段瘦素及瘦素受体系统水平的变化

吴茂春 薛原 林星 刘城亮

【摘 要】目的： 探讨瘦素及可溶性瘦素受体在类风湿关节炎患者血清中的变化规律。方法：选择女性类风湿关节炎患者88例，未治疗组40例，治疗后组48例；健康女性48例为正常对照组，用酶联免疫吸附方法检测瘦素、可溶性瘦素受体及抗环瓜氨酸肽抗体；用免疫比浊法测定C-反应蛋白。结果：与正常对照组比较，未治疗组类风湿关节炎患者血清瘦素水平显著增高（P < 0.01），血清可溶性瘦素受体水平无显著变化（P=0.05）。治疗后组与未治疗组比较，血清瘦素水平显著下降（P < 0.01），可溶性瘦素受体水平显著提高（P < 0.01）。治疗后组与正常对照组比较，血清瘦素水平显著下降（P < 0.05），血清可溶性瘦素受体水平显著提高（P < 0.01）。治疗前后血清瘦素与可溶性瘦素受体水平呈负相关（r值分别为

-0.35，-0.319；P < 0.05），未治疗组血清瘦素、可溶性瘦素受体与C-反应蛋白无相关（P > 0.05），治疗后血清瘦素与C-反应蛋白正相关（r=0.358；P < 0.05），治疗后瘦素水平与抗CCP抗体滴度呈正相关（r=0.343；P < 0.05）。结论：类风湿关节炎患者治疗前后血清瘦素与可溶性瘦素受体水平均存在显著异常。通过对治疗前后瘦素与可溶性瘦素受体血清水平的分析，进一步认识类风湿关节炎的发病机制。

【关键词】 关节炎，类风湿；瘦素；瘦素受体

Changes of Leptin and Leptin Receptor Level in Patients with Rheumatoid Arthritis in Different Stages

Wu Mao-chun，Xue Yuan，Lin Xing，Liu Cheng-liang

【ABSTRACT】 Objective：To explore the changes of leptin and soluble leptin receptor （sOB-R）in serum of patients with rheumatoid arthritis（RA）.Methods：Three groups of female were enrolled：40 untreated and 48 treated with RA，and 48 health controls who have no significantly different body mass index（BMI）from those above.The leptin and soluble leptin receptor were measured by enzyme-linked immunosorbent assay.C-reactive protein was measured by immunoturbidimetry and the anti cyclic citrullinated peptide（CCP）antibody was measured by enzyme-linked immunoturbidimetry.Results：Compared with the health controls，the level of leptin in serum increased significantly（P< 0.01）and the level of soluble leptin receptor in it had no significant change

（P = 0.05）in the untreated group.And in the treated group，the level of leptin decreased significantly（P < 0.01）and the level of soluble leptin receptor increased significantly（P < 0.01）compared with the health controls or the untreated group.Compared with the health controls，the level of leptin in serum significantly decreased（P < 0.05）

and the level of soluble leptin receptor increased obviously（P < 0.01）.There was a negative correlation between the level of leptin and that of the soluble leptin receptor before and after the treatment（r=-0.35，-0.319；P < 0.05）.In untreated group the levels of leptin and soluble leptin receptor had no correlation with C-reactive protein（P > 0.05）.And in the treated group，the leptin had positive corelation with C-reactive protein（r=0.358；P < 0.05）and so did the level of leptin with the anti cyclic citrullinated peptide（CCP）antibody（r=0.358，0.343；P < 0.05）.Conclusion：The levels of leptin and soluble leptin receptor were obviously different in patients with RA before and after the treatment.The pathogenesis of RA could be further known by analysis of the levels of leptin and soluble leptin receptor before and after treatment.

【Key words】 arthritis，rheumatoid；leptin；leptin receptor

瘦素（leptin，Lp）是脂肪细胞分泌的肽类激素，在能量营养代谢方面起着重要调节作用。越来越多的证据表明瘦素既作为激素又作为免疫因子在神经内分泌免疫网络中起着重要调节作用，是营养状况、能量代谢、神经内分泌免疫相互影响相互作用的重要中介物。其含量消长与多种自身免疫病的发生、发展有密切联系，可能在免疫系统中具有双向调节作用。瘦素作为新型免疫介质在炎症及免疫应答中发挥的作用受到关注。

本文测定类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）不同阶段的的血清瘦素和血清可溶性瘦素受体（sOB-R）水平的变化，以期研究瘦素及其受体系统在免疫系统中的作用机制，特别是在瘦素耐受下的瘦素在免疫系统的作用。目前，sOB-R的检测在免疫系统的意义的文献较少[1]，对治疗前后的瘦素与瘦素受体血清水平的分析，有助于对RA发生、发展过程的系统认识和把握。

1 临床资料

1.1 一般资料 选取2006年1月至2007年5月在本院门诊与住院确诊为RA的女性患者88例。其中首次确诊未治疗组40例，年龄23～71岁，平均（45.5±18.7）岁；病程最短3个月，最长27年，中位数5.9年；体重指数（BMI）为（21.8±4.4）。治疗后组48例，年龄24～70岁，平均（46.7±18.4）岁；病程最短4个月，最长26年，中位数7.1年；BMI为（21.6±4.8）。其中16例为治疗前后配对病例。随访时间2～15个月。临床表现为近端指间、掌指和/或腕、肩、膝和趾关节疼痛40例；表现为渐进型者38例；有晨僵表现者31例，均伴有全身不适、疲劳、发热等全身症状；表现为受累近端指间、掌指关节明显肿胀者35例；表现为对称性关节炎，远端指间关节受累者1例。全部患者均行双手关节X线检查。正常对照组选择女性健康体检个体48例，通过询问或体检得到身高、体重及BMI值，平均BMI与患者无显著差异。经检验治疗前后的BMI无明显变化。

1.2 诊断标准 根据1987年美国风湿病学会（ACR）制定的类风湿关节炎诊断标准[2]。RA活动性评价采用DAS28评分法。

1.3 纳入标准 ①符合上述诊断标准；②依从性强，能按要求进行观察；③愿意并签署知情同意书。

1.4 排除标准 肝肾功能损害，使用肾毒性药物者。

2 方 法

2.1 标本采集 所有患者及正常对照组女性均于晨8∶00～9∶00空腹采取肘静脉血5 mL，分离血清后，-20℃冰箱保存待测。

2.2 治疗方法 RA治疗后组患者为经甲氨蝶呤、柳氮磺吡啶（SASP）或来氟米特、非甾体类抗炎药物治疗1～6个月，症状有不同程度缓解，处于病程相对稳定期或缓解期。

2.3 血清瘦素检测 试剂盒由依诺金公司生产，采用双抗体夹心酶联免疫检测法测定人血清中的瘦素。血清瘦素受体用酶联免疫吸附法检测，试剂盒由ADL公司生产。

2.4 游离瘦素指数（FLI）计算 瘦素与瘦素受体的比值为FLI值。计算单个样本所对应的游离瘦素指数。

2.5 统计学方法 所测数据采用SPSS11.0软件进行统计分析，计量资料以表示，采用样本t检验，以直线相关法分别分析治疗前后血清瘦素与瘦素受体的关系，以及血清瘦素、瘦素受体与C-反应蛋白（CRP）、抗CCP抗体的关系，并作相关系数显著性F检验。

3 结 果

3.1 各组血清瘦素、瘦素受体、游离指数比较 与正常对照组比较，RA未治疗组患者血清瘦素水平显著增高（P < 0.01），血清瘦素受体水平无显著变化（P=0.05）；RA治疗后组患者血清瘦素水平显著下降（P < 0.05），血清瘦素受体水平显著增高（P < 0.01）。与RA未治疗组比较，RA治疗后组患者血清瘦素水平显著下降（P < 0.01），瘦素受体水平显著增高（P < 0.01）。见表1。

3.2 治疗前后配对资料比较 16例患者治疗前后配对资料比较显示，RA治疗后组与RA未治疗组比较，血清瘦素水平显著下降（P < 0.01），瘦素受体水平显著增高（P < 0.01），见表2。

3.3 未治疗组瘦素与瘦素受体相关性分析 结果显示，RA未治疗组血清瘦素与瘦素受体呈负相关（r=-0.35；P < 0.05），血清瘦素和瘦素受体与C-反应蛋白（CRP）无相关（P > 0.05），见表3。

3.4 RA治疗后组瘦素与瘦素受体相关性分析 相关性分析结果显示，RA治疗后组血清瘦素与瘦素受体呈负相关（r=-0.319；P < 0.05），治疗后血清瘦素与C-反应蛋白正相关（r=0.358；P < 0.05），

治疗后瘦素水平与抗CCP抗体滴度呈正相关（r=0.343；P < 0.05），见表4。

4 讨 论

有研究发现，女性血清瘦素水平高于男性，而瘦素受体的水平低于男性[3]。女性基础瘦素水平高引起瘦素受体耐受或瘦素受体表达下调，降低T细胞的凋亡速度[4]，使自身反应性T细胞累积，可能增加机体对自身免疫病的易感性。试验结果显示，治疗前RA患者血清瘦素水平明显高于对照组。臧谋圣等[5]认为血清瘦素水平在RA患者炎症急性期作为炎症独立应答因子明显增高。Gunaydin R等[6]认为瘦素水平与临床及实验室的活动性参数如红细胞沉降率、CRP无关。这与我们的试验结果一致。但是，Popa C等[7]研究发现RA慢性炎症期血清瘦素浓度降低。我们也发现治疗后的RA患者血清瘦素水平与治疗前比较显著降低，低于正常对照组。治疗后的血清瘦素水平可能可以反映治疗的早期效果。Bokarewa M等[8]研究显示，RA患者瘦素产生明显增加，但关节液中瘦素明显低于相应血浆，即瘦素在炎症性关节中有消耗，分析认为瘦素可能在局部炎症中起到保护作用。在RA患者中，血清瘦素水平的变化不同，这可能与基础瘦素水平和BMI个体差异以及与RA患者疾病发生、发展及治疗的不同阶段有关。

本试验结果显示，RA患者血清中治疗前后sOB-R存在明显差异，治疗前sOB-R明显低于正常对照组，治疗后sOB-R明显高于治疗前，也高于正常对照。有报道称女性结缔组织病患者血清瘦素、瘦素受体存在明显异常[9]。但是各种炎症情况下的sOB-R水平值得我们深入探讨，以便与RA引起的炎症比较。FLI是游离瘦素指数，是瘦素与可溶性瘦素受体的比值，代表瘦素在外周血中存在状态的一个指标，FLI越大提示外周血中游离状态的瘦素越多。本试验结果中RA患者符合这个反馈机制，这可能是瘦素的耐受状态。但是与其他感染性炎症是否相同，有必要进一步实验证明。我们做的其他疾病的试验结果显示，少数患者瘦素高，瘦素受体也高，推测可能是在瘦素非耐受状态下发生。所以瘦素增高的幅度及在血中半衰期和CRP都不一样，治疗前血清瘦素及瘦素受体变化与RA活动性改变并不同步。本试验结果显示，RA未治疗组患者CRP与瘦素及瘦素受体的改变无关，而RA治疗后组CRP改变与瘦素的改变有显著相关。

上述结果表明，RA患者血清瘦素及瘦素受体治疗前后有明显变化，16例治疗前后配对病例也反映了瘦素及其受体在RA患者中的变化规律，特别是治疗后瘦素及其受体的变化与疾病疗效和疗程有关。未治疗组中3例患者瘦素高，瘦素受体也高，原因值得探索，治疗后组中2例难治性RA瘦素高，而瘦素受体低，说明瘦素及其受体的变化与RA的预后有关。临床中发现RA患者长时间高瘦素浓度与疾病活动及进展相关，并可伴随营养不良，治疗后瘦素水平与抗CCP抗体滴度呈正相关。对RA患者追踪观察结果显示，治疗后血清瘦素降低，瘦素受体增高的患者，病情控制较好。瘦素水平是否可以预测RA患者骨结构破坏，有待于进一步观察。当然RA患者血清瘦素及瘦素受体治疗前后的改变可能与临床治疗过程中用药的不同有关。有发现用MTX治疗的RA患者血清瘦素水平比用其他DMARDs药物治疗的RA患者血清瘦素水平高并且高于正常对照人群[7]。

以上RA患者血清的瘦素及瘦素受体的变化规律表明，RA的发生发展过程与患者的瘦素耐受有关。女性及肥胖个体基础瘦素水平高与瘦素抵抗有关[10]。所以广泛深入探讨瘦素及其受体在RA患者各阶段中的表达规律有利于更好地把握RA的发生、发展规律。在方法学方面，做好血清瘦素及瘦素受体实验，分析前的质量控制很重要。血清瘦素及瘦素受体不稳定，必须低温保存，不能反复冻融，必须在规定的时间空腹状态下抽血。瘦素及瘦素受体检测方法不同，标准不同，不利于系统分析，必须建立一个标准方法以利于广泛应用。同时在更大范围对各种疾病情况下的检测分析，有利于比较和深入研究瘦素及瘦素受体在自身免疫病的作用机制。在分析设计上，须有更多的治疗前后的配对纵向比较资料，并把药物干预因素独立出来进行比较。

5 参考文献

[1] 吴茂春，薛原.瘦素与类风湿关节炎[J].现代诊断与治疗，2007，18（6）：343-345.

[2] Amett FC，Edworthy SM，Bloch DA，et al.The American Rheumatism Association 1987 revised criteria for the classification of rheumatoid arthritis[J].Arthritis Rheum，1988，31（3）：315-324.

[3] Yannakoulia M，Yiannakour N，Bluher S，et al.Body Fat Mass and Macronutrient Intake in Relation to Circulating Soluble Leptin Receptor ，Free Leptin Index，Adiponectin，and Resistin Concentrations in Healthy Humans[J].J clin Endocrinol Metab，2003，88（4）：1730-1706.

[4] Matarese G，La Cava A，Sanna V，et al.Balancing susceptibility to infection and autoimmunity：a role for leptin[J].Trends Immunol，2002，23（4）：182-187.

[5] 臧谋圣，王玉，徐胜前，等.瘦素和可溶性瘦素受体在类风湿关节炎中的变化及其与骨质疏松的关系研究[J].中华风湿病学杂志，2010，14（1）：44-47.

[6] Gunaydin R，Kaya T，Atay A，et al.Serum Leptin Levels in Rheumatoid Arthritis and Relationship with Disease Activity[J].South Med J，2006，99（10）：1078-1083.

[7] Popa C，Netea MG，Radstake TR，et al.Markers of inflammation are negatively correlated with serum leptin in rheumatoid arthritis[J].Ann Rheum Dis，2005，64（8）：1195-1198.

[8] Bokarewa M，Bokarew D，Hultgren O，et al.Leptin consumption in the inflamed joints of patients with rheumatoid arthritis[J].Ann Rheum Dis， 2003，62（10）：952-956.

[9] 李久宏，毕桂姣，尚英彬，等.女性结缔组织病患者瘦素及可溶性受体的变化和意义[J].中华风湿病学杂志，2008，12（2）：102-104.

[10] Matarese G，Moschos S，Mantzoros CS.Leptin in Immunology[J].The Journal of Immunology，2005，174（6）：3137-3142.