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粪便镜检脂肪球与小儿轮状病毒肠炎相关性探讨

2013-04-13李杰岳颖李娇郭丽

沈阳医学院学报 2013年3期
关键词:胶体金轮状病毒婴幼儿

李杰,岳颖,李娇,郭丽

(1.沈阳市儿童医院检验科,辽宁 沈阳 110032;2.沈阳医学院科学实验中心)

轮状病毒(rotavirus,RV)是引起婴幼儿严重腹泻的最主要病原体,世界范围内有35%~52%的患儿腹泻由它引起[1]。有研究认为RV可以通过胃肠屏障而到达血液循环,引起各个脏器病变,导致多种并发症,成为RV腹泻致死的重要原因之一[2]。为了解本地区婴幼儿粪便镜检脂肪球与RV腹泻关系以及感染现状,我们对2011年9月至2012年4月沈阳市儿童医院腹泻婴幼儿的粪便进行粪便常规检查,同时进行RV抗原检测,现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 2011年9月至2012年4 月到我院就诊的腹泻患儿5 187 例,其中男3 085例,女2 102例,年龄9 d~5岁。

1.2 方法

1.2.1 试剂与仪器 杭州艾康生物技术有限公司提供,采用胶体金法即胶体金免疫层析技术和双抗体夹心原理检测粪便中A群轮状病毒抗原。日本Olympus C21显微镜。

1.2.2 试验方法 水样便采用产品所配的一次性塑料吸管滴加2滴(大约50 μl)至装有稀释缓冲液的收集器中;固态粪便可用取样棒(收集器自带)挑取大约50 mg标本的粪便加入装有稀释缓冲液的收集器中。充分摇匀,折断收集器尖端,弃去头2滴,垂直滴加2滴(约80 μl)无气泡的样品稀释液于试剂的加样孔(S)内,10~20 min读取测试结果。阳性出现两条紫红色的条带;阴性时质控区内(C)出现一条紫红色的条带;无效则质控区内(C)未出现紫红色的条带,需重新检测。同时记录粪便性状并直接涂片镜检。镜检标准严格按照《全国临床检验操作规程》。

1.3 统计学方法 采用SPSS 15.0进行统计学分析,计数资料采用Pearson Chisquare 检验。P<0.05为差异有显著性。

2 结果

2.1 RV阳性婴幼儿不同性别、不同年龄脂肪球检测结果 5 187例腹泻婴幼儿粪便中RV感染1 287例,阳性率为24.8%。RV阳性男患儿脂肪球阳性为70.0%,RV阳性女患儿脂肪球阳性为66.4%,差异无显著性。RV阳性年龄<6个月、6个月~2岁、>2岁患儿脂肪球阳性分别为67.6%、69.0%和52.6%,差异无显著性。见表1。

表1 RV阳性婴幼儿不同性别、不同年龄脂肪球检测结果

2.2 RV阳性组与阴性组粪便镜检脂肪球数量比较 0代表未见脂肪球,>0代表见到1个以上脂肪球。分析结果见表2。RV阳性组中68.5%的粪便标本镜检可见脂肪球,显著高于RV检测阴性组(32.0%),差异有显著性。

表2 RV阳性组与阴性组粪便镜检脂肪球数量比较

注:两者比较χ2=533.6,P<0.01

3 讨论

RV是引起人类和动物病毒性腹泻的主要病原体,属呼肠病毒科轮状病毒属,为双链RNA病毒,分为A、B、C 3组,仅A、B组引起人类严重发病,A组致婴幼儿腹泻且最为常见,已成为世界范围内儿童急性腹泻病最重要的病原之一。

通过对本院5 187例腹泻婴幼儿粪便进行检测结果分析可见,A 群RV阳性标本1 287例,阳性率为24.8%,与其它报道一致[3]。由表1可见不同性别、不同年龄RV阳性婴幼儿脂肪球检测结果差异无显著性。A 群RV阳性标本中粪便镜检出脂肪球882例,检出率68.5%,与张静等[4]报道一致。由表2可见,RV阳性组与阴性组粪便镜检脂肪球数量比较,差异有显著性。分析其相关的原因可能是:RV的发病机制尚不完全清楚,认为RV主要侵犯上部小肠的微绒毛上皮细胞,使其凋亡。腹泻患儿小肠绒毛变短、萎缩,黏膜固有层单核细胞侵润,内质网池膨胀,线粒体肿胀,微绒毛稀少,不规则、可见裸露的微绒毛。可能是婴幼儿感染RV后最先出现消化道黏膜免疫反应,引起小肠黏膜破坏。由于新生的上皮细胞功能低下及吸收面积变小,造成肠吸收不良而出现脂肪球[5]。因缺乏脂肪酶而使脂肪水解不全,引起脂肪消化不良,肠黏膜上皮细胞刷状缘受损,脂肪吸收障碍,导致粪便中的脂肪球增多。

小儿RV肠炎,起病急且常出现发热、呕吐和腹泻等症状,持续时间较长,可达3~9 d,同时还伴有脱水和电解质平衡紊乱等症状。RV是婴幼儿秋冬季腹泻的主要病原体,不仅引起肠道内感染,而且常可能发生病毒血症,引起肝脏、心肌、神经系统,甚至呼吸系统及泌尿系统等损害[6]。目前临床检测RV的方法有PCR、胶乳凝集法、ELISA双抗体夹心法、病毒培养、电镜检查、胶体金法等。本实验所用的胶体金法,具有快速、特异、敏感、方法简单、结果准确的特点[7],适合一般基层实验室门急诊的常规检查。在高发流行季节建议把A 群RV抗原检测作为急性腹泻患儿粪便的常规检查之一。

本研究发现粪便镜检脂肪球数量与RV阳性呈正相关。根据腹泻发生的季节,临床症状,在尚未开展A 群RV抗原检测的医院,如果腹泻婴幼儿粪便常规检测发现脂肪球时,提示医生高度怀疑RV感染,从而避免临床误诊,及早确诊RV感染有助于指导临床有效治疗和控制致死性并发症。

参考文献:

[1]李上淼,李绍锦.儿科轮状病毒医院感染的高危因素分析与处理对策[J].中国初级卫生保健,2012,26(2):52-53.

[2]刁艳霞,陈兰举.轮状病毒肠道外感染的研究进展[J].国际儿科学杂志,2010,37(2):203-205.

[3]张巧红,万汝根,李国钢.腹泻患儿轮状病毒感染分析[J].中华医院感染学杂志,2011,21(6):1139-1236.

[4]张静,刘庆玲,熊德栋,等.A 群轮状病毒的检测对于婴幼儿腹泻的重要性研究[J].国际检验医学杂志,2011,32(9):1001-1002.

[5]魏静芬,叶富法.婴幼儿腹泻轮状病毒感染的检测与分析[J].中国妇幼保健,2009,24(12):1640-1641.

[6]唐红,汪青,郑洁丽.婴幼儿轮状病毒肠炎并胃肠外损害的临床分析[J].中华全科医学,2010,8(2):196-197.

[7]高平.婴幼儿腹泻患者A 群轮状病毒快速检测分析及临床意义[J].检验医学与临床,2011,8(19):2375-2376.

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