孔雀新城疫与组织滴虫病混合感染的诊治

2013-04-07封天祥河南省西峡县畜牧局474500

山东畜牧兽医 2013年5期

封天祥（河南省西峡县畜牧局 474500）

孔雀新城疫与组织滴虫病混合感染的诊治

封天祥（河南省西峡县畜牧局 474500）

2012年12月中旬，河南省西峡县回车镇苏某饲养的123只孔雀发生了以扭颈、呼吸困难、排黄绿色稀粪、急性死亡为主要特征的疾病。发病孔雀48只，死亡6只，发病率和死亡率分别为39%和4.9%。经临床观察、病理剖检和实验室检查，确诊为孔雀新城疫和组织滴虫混合感染，现报道如下：

1 发病情况

2012年10月3日，苏某从外地引进1日龄125只雏孔雀，采用地面平养与锯末炉加热供温进行育雏，育成脱温后转至育成舍饲养，并在树林中放牧。期间，分别进行了鸡新支(Ⅳ+H120)疫苗和法氏囊疫苗各2次饮水，同时注射H5亚型高致病性禽流感灭活苗和H9低致病性禽流感灭活苗各2次，孔雀长势良好，除意外损伤2只外，全部成活。12月19日孔雀开始发病，至23日共死亡6只。期间苏某曾使用抗菌素饮水治疗，但效果不佳。

2 临诊症状

现场观察可见，病孔雀精神萎靡，闭目呆立，羽毛松乱，垂头缩颈，双翅下垂；食欲减退或废绝；冠髯发紫：病孔雀伸颈，张口呼吸、咳嗽、气喘，伴有明显的呼吸道症状；口腔有粘性分泌物，摇头并有吞咽动作；嗉囊积液，倒提病孔雀，有粘性分泌物从口腔中流出；下痢，排黄白色、灰白色、黄绿色或硫磺色稀粪；部分患病孔雀翼下、腹、胸、股内皮下组织出现水肿，外观呈紫黑色；少数病孔雀出现跛行；有的病例出现颈部扭曲、转圈等神经症状，最后瘫痪倒地，衰竭死亡。

3 病理变化

剖检可见患病孔雀的气管内有大量粘液；气管、胸腔心侧内膜上有出血点；肺脏淤血，呈紫褐色；心肌条纹状出血；腺胃乳头点状出血，肌胃角质层下斑状出血，内容物呈黄绿色；肝脏显著肿大，表面有圆形或不规则形态凹陷的坏死灶，其边缘隆起，呈淡黄色，弥漫整个肝脏；脾脏、肾脏肿大；肠道黏膜呈弥漫性出血，并伴有炎症变化，肠内容物呈黄白色；盲肠肿大如拇指，触之坚实如香肠状，剪开盲肠可见内容物干燥坚硬，有干酪样栓塞物；部分病例胸、腹、股内侧肌肉呈片状出血，跖和趾关节关节囊内有血样浆液或干酪样物；有的患病孔雀胸腹部皮肤呈紫黑色，皮下有血样渗出物。

3 实验室诊断

3.1 病毒学诊断

3.1.1 血清学诊断随机无菌采集孔雀血样20份，进行红细胞凝集抑制(HI)试验和红细胞凝集(HA)试验，检测孔雀的抗体水平。结果表明，抗体滴度严重不均，有的孔雀抗体水平在4个滴度以下，有的孔雀抗体水平高达12个滴度。该结果表明孔雀已经感染新城疫。

3.1.2 病毒的分离培养取病死孔雀的脑、肝组织病料研磨，加入双抗，制成组织匀浆，接种于10个12日龄SPF鸡胚尿囊腔，每胚0.2ml，置于35～37℃恒温箱培养，每6h验蛋1次，36～72h后，鸡胚出现死亡。收集死亡的鸡胚，无菌操作取尿囊液，做无菌检查，弃掉混浊的尿囊液，留下无菌的尿囊液供进一步检查使用。取活胚放入4℃冰箱内，过夜24h观察，发现鸡胚绒毛尿囊膜水肿，头、胸、翅、背、趾部有出血斑，尤以翅、趾部明显。

3.1.3 病毒鉴定取上述无菌尿囊液做微量血凝试验，发现该病毒具有血凝特性。用上述无菌尿囊液配制成4个凝集单位的抗原液，与已知鸡新城疫病毒标准阳性血清和禽流感(H5、H9)标准阳性血清做血凝抑制(HI)试验。结果表明，该病毒的血凝性只能被鸡新城疫标准阳性血清抑制，不能被禽流感(H5、H9)标准阳性血清抑制，说明所分离的病毒为NDV。

3.1.4 动物回归试验将12只10日龄健康罗曼雏公鸡随机分为试验组和对照组，每组6只。用分离到的病毒液按0.5ml/只的剂量给试验组雏公鸡滴鼻；对照组未进行任何处理。24h后试验组雏公鸡开始发病，表现出与发病孔雀类似的临床症状，发病后2～5d有4只雏公鸡死亡。剖检死亡的雏公鸡，其病理变化(除肝脏和盲肠)和发病火鸡基本相同。对照组雏公鸡无一发病，全部存活。

3.2 细菌学诊断

3.2.1 细菌培养无菌取病死火鸡肝、睥、脑组织接种于普通肉汤和普通琼脂培养基，经37℃培养24h后，未发现可疑细菌。

3.2.2 涂片镜检将刮取的病死火鸡新鲜盲肠内容物及内侧病灶组织混合，用35～38℃生理盐水稀释，做悬滴标本，在400倍显微镜下观察虫样虫体，其大小为6～30um，少数有一根鞭毛，呈钟摆样来回运动。镜检结果证明，病料中有组织滴虫虫体存在。综上所述，确诊为孔雀新城疫和组织滴虫混合感染。