壮阳复方中药制剂对运动大鼠心肌组织自由基代谢影响的研究*

朱 磊，刘洪珍

（曲阜师范大学体育科学学院，山东曲阜273165）

近年来，随着自由基生物医学的发展，自由基疾病和疲劳的关系受到广泛重视。大量研究证明，力竭运动可以导致内源性氧自由基生成增多，与运动性疲劳的发生密切相关［1］。而某些中药成分作为安全有效的抗氧化剂或自由基清除剂可以显著增强运动能力、延缓疲劳的出现，特别是复方中药已成为当前运动领域的研究热点［2］。本研究通过观察壮阳复方中药制剂对大鼠力竭游泳耐力和血清自由基代谢的影响，探讨壮阳复方中药制剂抗疲劳的作用及其可能机制，为具有消除运动员疲劳功能的复方中药制剂产品的开发提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 中药制剂及给药方案

复方中药制剂：附子、肉桂、鹿茸等18位中药。按大鼠体重于每日早晨灌服中药制剂，对照组灌服纯净水。

1.2 实验动物分组及运动训练模型

选取 8周龄雄性 Wister大鼠 96只，体重（200±5）g，采用国家标准大鼠饲料喂养。随机均分为对照组（灌服纯净水）、运动组和运动服药组（灌服壮阳复方中药制剂）。对照组只进行适应性训练，运动组和运动服药组采用电动大鼠跑台适应性训练一周（跑速5～10 m／min，时间10 min）后，依表1模型进行训练。8周后将每组大鼠随机均分为4个亚组。分别于安静状态下、定量负荷、力竭即刻、力竭恢复12 h四种状态处死并记录力竭时间。

Tab.1Training model in rats

力竭标准：大鼠先后滞留跑道后1／3处达3次以上，停跑后体征表现为呼吸急促、神情倦怠、腹卧位，对刺激反应迟钝。

1.3 取材与样本制备

每只大鼠于相应时刻断头后快速取出心脏，将心尖和心室部分剪下，放在冰生理盐水中洗净，滤纸吸干，装入样品管中，并迅速放入－84℃超低温冰箱中。

1.4 指标测定

还原型谷胱甘肽（glutathione，GSH），丙二醛（malonaldehyde，MDA），超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）和蛋白含量（考马斯亮兰法）测试试剂盒均购于南京建成生物公司，对各项指标的测定严格按照试剂盒说明书进行，在实验之前进行预实验。

1.5 统计学处理

数据用均数±标准差（¯x±s）表示，采用 SPSS 13.0统计软件对所得数据进行统计分析，并进行方差分析和独立样本t检验。

2 结果

2.1 安静状态下大鼠心肌各指标的变化

安静状态下各组之间心肌组织MDA含量都没有显著性差异；运动服药组GSH含量显著高于其他各组（P＜0.05）；SOD活性仅运动服药组极显著高于对照组（P＜0.01，表2）。

2.2 定量负荷运动后大鼠心肌各指标的变化

定量负荷运动后，心肌组织MDA含量运动组显著低于对照组，运动服药组极显著低于其它组（P＜0.05，P＜0.01）；对照组GSH含量显著低于运动组且极显著低于运动服药组（P＜0.05，P＜0.01）；运动服药组 SOD活性极显著高于对照组（P＜0.01，表 3）。

Tab.2 Rat cardiac index in the quiet state（¯x±s，n＝8）

Tab.3 Rat cardiac index in the quota load state（¯x±s，n＝8）

2.3 力竭运动后即刻大鼠心肌各指标的变化

大鼠力竭即刻对照组心肌组织MDA含量显著高于运动组而极显著高于运动服药组（P＜0.05，P＜0.01）；运动服药组GSH含量显著高于其它两组（P＜0.05）；对照组SOD活性极显著低于其它两组，运动服药组SOD活性极显著高于运动组（P＜0.01，表 4）。

Tab.4 Rat cardiac index in the instantly exhausting state（¯x±s，n＝8）

2.4 力竭运动恢复12 h后大鼠心肌各指标的变化

大鼠力竭运动恢复12 h后，运动服药组心脏组织MDA含量极显著低于对照组且显著低于运动组（P＜0.05，P＜0.01，表5）；运动服药组GSH含量极显著高于对照组而显著高于运动组（P＜0.05，P＜0.01）；各组间 SOD活性均无显著性差异。

Tab.5 Rat cardiac index in the renewing state（¯x±s，n＝8）

2.5 各组大鼠运动至力竭的时间

对照组大鼠力竭时间显著小于运动组而极显著小于运动服药组；运动服药组力竭时间极显著长于运动组（表6）。

Tab.6 Exhaustive comparison of time in rats under different conditions（¯x±s，n＝16）

3 讨论

机体在正常状态下，存在氧化与抗氧化的平衡体系，因而常选用MDA、SOD和GSH等指标来反映机体内脂质过氧化反应的变化。

3.1 安静时壮阳复方中药制剂对运动大鼠心肌的影响

鲁政等［3］研究表明，在低氧运动及低氧运动加电解质饮料干预的情况下，运动后血清MDA均没有显著性变化。则进一步说明运动对MDA的影响与运动强度有关。本实验结果运动组MDA、SOD、GSH含量与安静对照组无显著性变化，也可能是训练强度较小所致。

3.2 定量负荷后壮阳复方中药制剂对训练大鼠心肌的影响

在正常情况下，机体自由基的产生和清除处于相对平衡状态，但在剧烈运动过程中，体内自由基的产生明显增加，使机体潜在受损的可能性增加。Marc Benderitter等研究表明大鼠大强度运动后血浆中MDA含量显著性下降而GSH含量显著性升高。本实验大鼠定量负荷运动后，运动组心肌组织MDA含量显著低于对照组，而运动组GSH显著高于对照组，说明有氧训练可以有效缓解运动造成的自由基增多，同时增强机体清除减弱自由基能力，减少对机体的损伤。运动服药组大鼠心肌MDA含量显著低于运动组，而运动服药组大鼠心肌GSH和SOD含量及其显著高于说明本实验所用壮阳复方中药制剂可以协同运动训练，更高效的减少或清除运动造成的机体自由基含量的增加。

3.3 力竭后即刻壮阳复方中药制剂对训练大鼠心肌的影响

张琳［4］实验结果显示，大强度耐力训练后，运动组MDA含量升高，训练导致自由基生成增加。服用白藜芦醇后，心肌SOD活性升高，MDA含量下降，表明白藜芦醇具有保护心肌组织免受运动所造成自由基损伤的功能。本实验结果显示，大鼠力竭即刻运动组心肌组织MDA含量显著低于对照组，而运动组心肌组织SOD活性极显著高于于对照组，说明长期的有氧耐力训练，可以减少力竭时自由基的产生，同时提高机体清除自由基的能力。大鼠力竭即刻运动服药组心肌组织MDA含量极显著低于对照组，运动服药组GSH含量显著高于对照组，而SOD含量极显著高于对照组，说明运动加服药同样可以增强机体力竭时消除自由基的能力。且运动服药组较单纯运动组更良性的变化，提示运动和服用本实验配制的壮阳复方中药制剂具有协同作用。

3.4 力竭恢复12 h壮阳复方中药制剂对训练大鼠心肌的影响

力竭运动后，随着时间的推移，自由基不再增多，而抗氧化剂由于生理惯性依然维持在较高的水平，于是自由基开始减少，而当自由基减少之后，抗氧化剂也将恢复。刑三丽等［5］研究表明补阳还五汤具有补气活血通经活络的作用，可以保护氧化酶活性，清除缺血缺氧组织所产生的大量自由基，抑制自由基介质的脂质过氧化连锁反应，稳定细胞膜，从而促进损伤细胞的恢复。本实验大鼠力竭后恢复12 h，心肌组织MDA含量运动组低于对照组，而运动服药组极显著低于对照组，提示长期运动训练和服用本实验配制的壮阳复方中药制剂增加了机体清除自由基的能力。

3.5 壮阳复方中药制剂对大鼠运动能力的影响

许多实验表明，中药可以延长大鼠力竭时间，提高运动能力：唐量实验表明葛根总黄酮对大强度运动过程中产生的过量自由基具有较强的清除作用，可提高小鼠的运动能力，使小鼠游泳至力竭的时间明显延长。说明中药的灌服对提高运动能力具有积极意义。本实验的研究结果显示，对照组大鼠力竭时间显著小于运动组而极显著小于运动服药组，这说明运动训练和复方中药制剂都能延长大鼠力竭运动时间。而运动服药组力竭时间极显著长于运动组，说明运动训练和复方中药制剂具有协同作用。

运动训练能降低大鼠心肌内MDA含量，抑制脂质过氧化，提高大鼠心肌内SOD活性和GSH含量，增强机体的抗氧化能力。壮阳复方中药制剂能够提高大鼠心肌内SOD活性、GSH含量，降低MDA含量，提示壮阳复方中药制剂可有效抑制脂质过氧化反应，提高机体在不同功能状态下的抗氧化能力。壮阳复方中药制剂能够协同运动训练延长大鼠运动时间，提高运动能力，推迟疲劳的发生。

［1］ Yamada K，Yamamiya I，Utsumi H.In vivo detection of free radicals induced by diethylnitrosamine in rat liver tissue［J］.Free Radic Biol Med，2006，40（11）：2040-2046.

［2］ 杨 波，任晓丽，李 翔.槲皮素对力竭运动疲劳大鼠血清自由基代谢的影响［J］.解放军预防医学杂志，2011，29（1）：19-21.

［3］ 鲁 政，胡 杨，田 野，等.低氧运动对血清MDA、SOD、GSH的影响及电解质饮料干预效果的研究［J］.北京体育大学学报，2007，30（2）：198-202.

［4］ 张 琳.白藜芦醇对耐力训练大鼠血液及不同组织某些生化指标影响的实验研究［D］.陕西：陕西师范大学，2003.

［5］ 刑三丽，振 华，晋 浩，等.补阳还五汤的抗氧化作用［J］.解剖学杂志，2005，28（5）：529-532.