囊肿颗粒薄层色谱鉴别方法研究

董 芳

囊肿颗粒薄层色谱鉴别方法研究

董 芳

（江西省鹰潭市中医院，鹰潭335099）

目的 确立囊肿颗粒的定性鉴别方法。方法 采用薄层色谱法对囊肿颗粒部分药味进行定性鉴别。结果 确立了牡丹皮、赤芍、大黄的薄层定性鉴别方法。结论 所确立方法简单，专属性好，操作性强，阴性无干扰，对囊肿颗粒的质量控制具有非常重要意义。

囊肿颗粒；薄层色谱法

囊肿颗粒是我院根据中医妇科方加减组方研制成的中药内服制剂．由牡丹皮、赤芍、大黄、三棱、莪术、路路通等十二味中药组成，临床上主要用于治疗气滞血瘀、痰湿凝滞所致的癥瘕痞块、卵巢囊肿。为了控制产品质量，对处方中主药进行了鉴别研究。

1 仪器与试药

仪器：DHG-9023型电热恒温鼓风干燥箱（上海医用恒温设备厂），薄层自动铺板器（重庆南岸新力实验电器厂）。

试药：囊肿颗粒（自制）；大黄对照药材（批号902-89013）；丹皮酚（批号0708-9704）；芍药苷（批号0736-200117）

以上对照品和对照药材均由中国药品生物制品检定所提供。硅胶G（中国海洋化工集团）、硅胶H（中国海洋化工集团）；其他试剂为分析纯。

2 实验方法及结果

2.1 牡丹皮的薄层鉴别 取本品内容物5g，加乙醚30ml，超声处理15分钟，滤过，药渣备用，滤液挥去乙醚，残渣加丙酮1ml使溶解，作为供试品溶液。另取丹皮酚对照品，加丙酮制成每1ml含5mg的溶液，作为对照品溶液．照薄层色谱法（中国药典2005年版一部附录VI B）实验，吸取上述两种溶液各10微升，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-醋酸乙酯确盐酸（15∶3∶0.04）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以20%三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的紫褐色斑点。结果见图1。

2.2 赤芍的薄层鉴别 取2.1项下的药渣，挥去乙醚，加乙醇30ml，超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取芍药苷对照品，加乙醇制成1ml含1mg的溶液，作为对照品。照薄层色谱法（中国药典2005年版一部附录VI B）实验，吸取上述两种溶液各5微升，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸（40∶5∶10∶0.2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝紫色斑点。结果见图2。

2.3 大黄的薄层鉴别 取本品1g，加甲醇20ml，超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，再加盐酸1ml，至水浴中加热30分钟，立即冷却。用乙醚分两次提取，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加氯仿1ml使溶解，作为供试品溶液。另取大黄对照药材0.1g，同法制成对照药材溶液，照薄层色谱法（中国药典2005年版一部附录VI B）试验，吸取上述两种溶液各4微升，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为粘合剂的硅胶H薄层板上，以正己烷-醋酸乙酯-甲酸（30∶10∶0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。结果见图3。

图1 ［鉴别］（1）薄层色谱图1.6丹皮酚对照品 2.7样品（20121016）3.牡丹皮阴性对照4.赤芍阴性对照5.牡丹皮、赤芍阴性对照8.样品（20121030）9.样品（20121113）

图2 ［鉴别］（2）薄层色谱图1.6芍药苷对照品 2.7样品（20121016）3.牡丹皮阴性对照4.赤芍阴性对照5.牡丹皮、赤芍阴性对照8.样品（20121030）9.样品（20121113）

图3 ［鉴别］（3）薄层色谱图1.大黄对照药材 2.样品（20121016）4.样品（20121113）3.样品（20121030）5.大黄阴性对照

3 讨论

三个薄层鉴别均在参考有关文献基础上建立。并考察了供试品的提取方法、展开剂和显色剂。为了使供试品的处理简便快速，三个薄层鉴别均采用超声提取，实验证明，该提取方法均能满足制样要求，且提取液的杂质相对较少，减少了干扰。采用本标准的展开剂斑点集中，Rf值适宜，并与其他成分完全分离，阴性样品无干扰。另外，采用正己烷-氯仿-无水乙醇（7∶3∶1）、氯仿-甲醇（5∶1）、石油醚（30～60℃）-甲酸乙酯-甲酸（15∶5∶1）的上层溶液三套展开系统分别对本标准鉴别（1）、（2）、（3）展开系统进行验证实验，对应的展开系统均能检出相应的成分。验证实验中，鉴别（1）的显色方法采用盐酸酸性5%三氯化铁乙醇溶液显色时，薄层板经烘烤后显出干扰的其他杂质斑点，改用20%三氯化铁乙醇溶液不经烘烤直接显色，杂质斑点不显色，色谱较单纯，排除了干扰。按照本标准对三批供成品进行实验验证，效果良好，结果见附图。

牡丹皮和赤芍中均含有丹皮酚和芍药苷，前者丹皮酚含量居多，后者芍药苷含量居多，由于生产工艺中对两种药材处理方法不同，前者丹皮酚得以基本保留；后者芍药苷提取基本完全，而丹皮酚保留甚少。从阴性样品可以看出，鉴别（1）主要鉴别牡丹皮，由于牡丹皮为生药原粉直接入药，本标准提取方法提出牡丹皮中的芍药苷甚少，加之其本身芍药苷含量少，以致达不到检测下限，故鉴别（2）主要鉴别赤芍。

10.3969／j.issn.1672-2779.2013.21.108

1672-2779（2013）-21-0149-02

吴义红

2013-08-22）