民间常用药稳心草的薄层色谱研究
2013-03-02王小东王秀丽张
王小东王秀丽张 颖
1.黑龙江省大兴安岭地区食品药品检验检测所,黑龙江 加格达奇 165000;2.黑龙江省大兴安岭职业学院,黑龙江 加格达奇 165000
民间常用药稳心草的薄层色谱研究
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1.黑龙江省大兴安岭地区食品药品检验检测所,黑龙江 加格达奇 165000;2.黑龙江省大兴安岭职业学院,黑龙江 加格达奇 165000
目的:建立稳心草薄层色谱分析方法。方法:薄层色谱鉴别方法。结果:以有效成分金丝桃苷为指标,建立了稳心草的专属性薄层色谱。结论:建立的方法简便,准确,重现性良好,可用于稳心草的定性分析。
稳心草;薄层色谱鉴别方法
稳心草(Hypericum attenuatum Choisy.),又名赶山鞭、黑点叶金丝桃[1]。该药为藤黄科金丝桃属植物,茎圆柱形,常有两条突起的纵肋且散生黑色腺点或黑点。叶卵形、长圆状卵形或卵状长圆形,基部渐狭,无柄,两面及边缘散生黑腺点。花多数,成圆锥状花序或聚伞状花序;萼片5,顶端急尖,表面及边缘有黑腺点;花瓣5,淡黄色,沿表面及边缘有稀疏的黑腺点;雄蕊多数;花柱3个,分离。蒴果卵圆形或卵状长椭圆形。花果期8~11月[2]。稳心草植物资源分布广泛,分布在黑龙江、吉林、辽宁、内蒙古、河北、山西、陕西、甘肃、河南、安徽、山东、江苏、浙江、江西、广东、广西等省。生长于海拔在1100m以下的田野、半湿草地、草原、石砾地、草丛、林内等处。民间用全草代茶叶用,全草可入药,捣烂治疗跌打损伤或煎服作蛇药用。味苦,性平,入心经。具有清热解毒消肿,活血止痛止血,化痰通乳功效。主治各种出血,风湿痹痛,外伤肿痛,乳痈,疗疮肿毒,咯血,吐血,崩漏及乳汁缺乏等。稳心草还用于治疗心脏病,内蒙古呼伦贝尔盟地区通过对慢性克山病的临床观察,发现稳心草在改善慢性克山病患者症状的同时,还对肝脏肿大、浮肿、颈静脉充盈有一定效果,从而使心功能获得不同程度的好转[3]。东北民间采全草内服,用于解热,或治妇女抽筋。顾丽贞等[4]对稳心草的化学成分进行了初步研究,从中分离出了金丝桃素、懈皮素、芦丁、金丝桃苷和山茶酚,发现稳心草含有大量黄酮类化合物。董建勇等[5]对甘肃产稳心草进行了化学成分研究,从地上部分分离出了11个黄酮化合物。其药理作用主要是黄酮类成分,具有提高机体免疫力,促进机体代谢、强心、降压、利尿、抗菌、抗病毒、抗衰老及明显的耐缺氧作用。本文采用薄层色谱法检识稳心草中金丝桃苷,方法简便快速,灵敏准确。
1 实验材料
1.1 药品与试剂 实验所用药材于2011年10月采于黑龙江省大兴安岭地区加格达奇区大子杨山,经大兴安岭地区农林科学研究院刘光工程师鉴定为藤黄科植物稳心草(Hypericum attenuatum Choisy.)的地上部分。金丝桃苷标准品由中国药品生物制品检定所提供(批号111521-201004);聚酰胺薄膜武汉科新技术开发有限公司经销;实验所用试剂均为分析纯。
1.2 仪器型号 电子天平AE200(北京赛多利斯仪器系统有限公司),KT-300Y超声波药品处理机(济宁中冠超声波有限责任公司),DSY-1四孔电热恒温水浴锅(北京国华医疗机械厂),CAMAG-Linomat-5瑞士卡马半自动点样仪,ZY-600U薄层色谱自动成像分析系统(北京先驱)。
2 方法与结果
取稳心草药材粉末0.3g,加20ml甲醇,超声10min,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml,使溶解,作为供试品溶液。另取金丝桃苷对照品,加甲醇制成每1ml含0.5mg溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录ⅥB)实验。吸取供试品溶液4μl,2μl,对照品溶液2μl,分别点于同一聚酰胺薄膜上,以36%乙酸为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点,见图1。
3 讨论
3.1 比较了甲醇、乙醇、乙醚和醋酸乙酯的提取效果,乙醚、醋酸乙酯提取液的样品特征斑点少,乙醇提取液的样品斑点不清晰,因此选用甲醇为提取溶剂。
3.2 供试品点样量对比分析,点样4μl较2μl斑点清晰,且重现性好,如图所示,2μl为2号位置,4μl为3号位置,选择供试品点样量为4μl。
3.3 稳心草药材均选取整棵药材,粉碎混合均匀,称取一定量进行薄层分析,可防止茎、叶、花蕾、果实等不同部位金丝桃苷含量不同而产生误差。
3.4 研究结果表明,稳心草的有效活性成分中含有金丝桃苷等,经薄层色谱分析研究,金丝桃苷在Rf=0.41处薄层色谱分离清楚,斑点清晰,无托尾,重显性好。本项研究建立的方法简便、准确、重复性好,可用于稳心草的质量控制,为该药材的进一步研究和开发利用提供科学依据。
[1]中国科学院中国植物志编辑委员会《中国植物志》.第五十卷.第二分册[M].北京:科学出版社,1990:71-72.
[2]唐庭棣.大兴安岭药用资源[S].哈尔滨:哈尔滨出版社,2001:309-310.
[3]黑龙江呼伦贝尔盟地方病研究所.稳心草对慢性克山病的初步治疗观察[J].黑龙江医药,1976(5,6):46-48.
[4]顾丽贞,张宏彬.稳心草化学成分的研究[J].植物学报,1980,22(2):151.
[5]董建勇,贾忠建.赶山鞭中黄酮类化学成分研究[J].中国药学杂志,2005,12(40):897-899.
The common folk medicine W enxin Cao thin-layer chromatography
WANG Xiao-dong1,WANG Xiu-li2,ZHANG Ying1
(1.Daxinganling Food and drug inspection Jiagedaqi165000;2.Daxinganling Vocational College Heilongjiang Jiagedaqi165000)
Objective:To establish Wenxin Cao for thin-layer chromatography analysis.M ethods:TLC method.Results:The effective active ingredient Hypericin as an index established exclusivity Wenxin Cao TLC.Conclusion:The established method issimple,accurate,good repeatability can be used Wenxin Cao quality control.
Wenxin Cao;TLCmethod
R284.1
A
1007-8517(2013)05-0021-02
2013.02.10)