两种定量检测D-二聚体方法的比较

全媛，王平平

(泰州市第二人民医院检验科，江苏泰州225500)

两种定量检测D-二聚体方法的比较

全媛，王平平

(泰州市第二人民医院检验科，江苏泰州225500)

D-二聚体；检测；方法比较

D-二聚体(D-dimer,D-D)是反映已交联的纤维蛋白被纤溶酶降解的特异性分子标记物，是血栓性疾病的唯一标记物，它能有效地确定有无稳定的纤维蛋白存在。它的生成或增高反应了凝血和纤溶系统的激活，其血浆中的水平可代表体内凝血酶的活性及纤维蛋白的生成情况，可以作为体内血栓形成的指标之一[1]。近年来，定量检测D-二聚体含量已成为排查深静脉血栓(DVT)、肺栓塞(PE)、弥散性血管内凝血(DIC)等血栓性疾病的重要手段之一，并作为溶血栓治疗的动态监测指标[2]。但是不同的检测方法D-二聚体结果通常不一致

[3]，现将本院两种检测D-二聚体的方法进行比较，结果如下。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

1.1.1 免疫比浊法采用美国IL公司ACL-9000全自动血凝仪及其配套D-D检测试剂。

1.1.2 VIDAS测D-D：采用法国生物梅里埃D-D检测试剂，在VIDAS仪器按操作说明进行检测。

1.2 标本

1.2.1 质控品IL公司提供的正常及高值质控血浆。

1.2.2 血样随机抽取住院及门诊患者共100例，采集新鲜全血用109mmol/L枸橼酸钠1:9抗凝，3000r/min离心10min，分离血浆，3h内完成检测。

1.3 试验原理

1.3.1 免疫比浊法的原理样品中的D-二聚体分子与包被有高特异性D-二聚体克隆抗体的乳胶颗粒结合后，乳胶颗粒发生凝集，在405nm检测透光强度变化，凝集程度与样本中的D-二聚体含量成正比。

1.3.2 VIDAS测D-D原理：是一种定量全自动ELISA法，将两步的免疫夹心法与最后的荧光检测结合起来，利用现成的单剂量试剂和分析仪中储存的校准系统，对单份样品进行检测。

1.4 方法

1.4.1 重复性实验(批内精密度)根据CLSI的EP5-A2文件[4]对于精密度评价的要求，分别在ACL-9000血凝仪和VIDAS测定正常及高值水平血浆D-D含量，3h内各水平测试20次，计算均值(x)、标准差(s)、变异系数(CV)。

1.4.2 稳定性实验(批间精密度)按上述方法分别测定正常及高值质控血浆D-D含量，每天1次，连续测定20天，计算均值(x)、标准差(s)、变异系数(CV)。

1.4.3 比对实验根据CLSIEP9-A2文件[5]，选取随机的住院及门诊病人新鲜全血标本100例，采用上述两种方法平行检测D-D含量，最后对检测结果进行相关性分析。

1.5 统计学方法用SPSS17.0统计软件进行相关性分析。

表1 D-D批内及批间精密度测定结果

2 结果

2.1 重复性与稳定性比浊法和VIDAS法的重复性与稳定结果见表1，可见VIDAS法的重复性与稳定要优于比浊法。

2.2 比对实验将检测结果作回归曲线，得到免疫比浊法与VIDAS比对结果的回归方程：y=0.873x+ 46.485,相关系数r=0.981。根据CLSI文件要求(r＞0.975)，可见两种方法相关性理想。

3 讨论

血浆D-D是纤溶酶水解蛋白形成的降解产物之一，为继发性纤溶所特有的代谢物，是血栓已形成并被溶解的直接证据。但D-D测定受很多因素的影响，只要机体血管内有血栓形成及纤维溶解活动，D-D含量就升高。

根据上述实验结果，两种定量检测方法均有准确、快速、简便的特点，尤其VIDAS法具有更高的检测灵敏度和精密度，避免了连续加样的偶然误差，重复性和稳定性要优于免疫比浊法。但是，VIDAS测定一个标本需一个试剂条，一个批次检测标本量不多，免疫比浊法一个批次检测标本量比较大，对于标本量大的医院来说，免疫比浊法更加快速，简便。不同检测法虽然使用的抗体不同，识别的抗原不同，但比对实验结果表明，两种方法相关性较好。因此，选择哪一种D-D检测方法需各实验室根据自身具体情况决定。

[1]傅应裕,陈小华,秦光明.乳胶增强免疫比浊法检测D-二聚体水平的方法学评价[J].实验与检验医学,2005,10(5):441-442.

[2]郭雪梅,王鸿利.快速D-二聚体检测在诊断静脉血栓形成中的应用进展[J].中国实验诊断学，2000,4(1):41-43.

[3]师伟,张国富.D-二聚体研究进展.实用医技杂志，2010,17(11)：1031-1033.

[4]NCCLS.Evaluation of Performance of Quantitative Measurement Methods；Approved Guideline-Second Edition.NCCLS document EP5-A2[S].NCCLS,940 West Valley Road,Suite 1400,Wayne, Pennsylvania 19087-1898 USA,2004.

[5]NCCLS.Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples；Approved Guideline-Second Edition.NCCLS document EP9-A2[S].NCCLS,940 West Valley Road,Suite 1400,Wayne, Pennsylvania 19087-1898 USA,2002.

R446.62,R364.1+5

B

1674-1129(2013)05-0504-02

10.3969/j.issn.1674-1129.2013.05.043