紫外分光光度法测定苯酚滴耳液中苯酚的含量

邓慧颖

紫外分光光度法测定苯酚滴耳液中苯酚的含量

邓慧颖

目的建立紫外分光光度法测定苯酚滴耳液中苯酚的含量。方法采用紫外分光光度法测定苯酚滴耳液中苯酚的含量，并与药典规定的溴量法比较。结果通过实验苯酚在270nm波长处有最大吸收，在10～50ug/ml范围内，浓度与吸收度线性关系良好，其回归方程A=0.0155C+0.0089,(r=0.9999),平均回收率为99.71%，RSD为0.31%(n=9)，测定结果与溴量法结果一致。结论此法操作简便，准确可靠，快速稳定，与溴量法含量测定比较无显著差异(P>0.05)，可作为苯酚滴耳液的含量测定方法，适用于基层医院制剂的快速检查。

苯酚滴耳液；含量测定；紫外分光光度法

苯酚滴耳液作为医院常用制剂,收载于《中国医院制剂规范》中，具有消炎、止痛的作用，临床主要用于治疗早期急性中耳炎及外耳道炎，制剂中主要成分苯酚具有刺激性及腐蚀性，故必须严格控制其含量。苯酚及其制剂的含量测定方法，《中华人民共和国药典》(2010年版)[1]和《中国医院制剂规范》均采用溴量法[2]，该法需要进行硫代硫酸钠标定以及剩余滴定，操作繁琐费时，测定结果常受一些因素干扰且不易掌握，不能适应制剂配制时快速测定的要求。本文根据苯酚滴耳液的紫外吸收特性，即苯酚在270nm波长处有最大吸收，而制剂中其它成分甘油在此波长处几乎无吸收，建立紫外分光光度法用于苯酚滴耳液的快速含量测定，并对其科学性、准确性和可行性进行验证。

1 仪器与试药

1.1仪器 UV-2550PC紫外可见分光光度计(日本岛津)，AB104-S电子天平(梅特勒-托利多)。

1.2试药 苯酚(分析纯，扬子化工有限公司，批号20110927，符合《中国药典》2010年版规定)；甘油(分析纯，石家庄帅华工贸有限公司，批号20111019，符合《中国药典》2010年版规定)；蒸馏水(本院制剂室自制)；苯酚滴耳液(本院制剂室配制)。

2 处方与制备

2.1处方苯酚20 g，甘油适量。制备取苯酚加入适量甘油中，搅拌至溶解，再加甘油配成1000 ml，混匀，即得。

3 测定波长的选择

3.1对照品贮备液的制备 精密称取苯酚0.2003 g，置100 ml容量瓶中，加水溶解并稀释到刻度，摇匀，制成浓度为2.003 mg/ml的苯酚贮备液。

3.2紫外吸收光谱的测定 精密量取苯酚贮备液1 ml，置100 ml容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，得浓度为20.03ug/ml的苯酚标准溶液；另取辅料甘油2.5 ml，置100 ml容量瓶中，同法稀释，得到按苯酚滴耳液处方相当于含苯酚20ug/ml的甘油辅料溶液，以蒸馏水为空白，狭缝5nm，分别在200～400nm波长范围内进行紫外光谱扫描，结果显示苯酚标准溶液在210nm和270nm处有吸收峰，而甘油溶液在210nm波长处有少量吸收，在270nm处几乎无吸收，与文献报道的一致[3]。故选用270nm作为检测波长。

4 线性关系考查

精密量取上述苯酚贮备液0.5,1.0,1.5,2.0,2.5 ml,置100 ml容量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀，配制成10.0,20.0,30.0,40.0,50.0ug/ml五种不同浓度的标准溶液。以蒸馏水为空白，在270nm波长处测定各溶液的吸收度，以苯酚浓度为横坐标，以吸光度为纵坐标绘制标准曲线，计算得回归方程为A=0.0155C+0.0089，(r=0.9999)。结果表明，苯酚浓度在10.0150～50.0750ug/ml的范围内与吸光度线性关系良好。

5 精密度试验

精密量取本院制剂室配制的2%苯酚滴耳液10 ml，置100 ml容量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀。再精密吸取稀释液1 ml，置100 ml容量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀，即得标示量为20.00ug/ml的溶液。采用紫外分光光度法在270nm波长处，以蒸馏水为空白，测定吸光度，连续测定6次。结果表明紫外分光光度法用于苯酚滴耳液的含量测定具有良好的精密度，RSD=0.20%。

6 稳定性试验

精密量取本院制剂室配制的2%苯酚滴耳液10 ml，置100 ml容量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀。再精密吸取稀释液1 ml，置100 ml容量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。在室温下密封、避光保存0、2、4、6、8、24、48 h后，采用紫外分光光度法在270nm波长处，以蒸馏水为空白，重复测定吸光度。结果表明，苯酚滴耳液供试品在48h内吸光度基本不变，稳定性良好，以吸光度计算相对标准偏差RSD=0.65%。

7 回收率试验

精密量取甘油10 ml共9份，分别置250 ml容量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，按处方比例10 ml苯酚滴耳液中苯酚含量的80%、100%及120%，分别精密称取已知含量的苯酚置上述250 ml容量瓶中，振摇使溶解，加蒸馏水至刻度，摇匀，以蒸馏水为空白，在270nm波长处分别测定吸光度，代入上述标准曲线的回归方程中计算苯酚的含量，并计算回收率。结果表明辅料甘油对主成分苯酚的测定结果无影响，平均回收率为99.71%,RSD=0.31%(n=9)。

8 样品的测定

取本院制剂室配制的2%苯酚滴耳液5批，精密量取10 ml，置100 ml容量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀。再精密量取稀释液1 ml，置100 ml容量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀，即得标示量为20.00ug/ml的溶液。采用紫外分光光度法在270nm波长处，以蒸馏水为空白，测定吸光度，代入标准曲线计算以标示量为100%的含量，并与溴量法测定结果进行比较。对两种方法的测定结果进行t检验，结果表明紫外分光光度法与溴量法无显著差异(P>0.05)。

9 讨论

《中国医院制剂规范》采用溴量法测定苯酚滴耳液中苯酚的含量，操作步骤复杂、费时且终点不易判断，试验误差较大。本文采用紫外分光光度法测定苯酚滴耳液的含量，具有回收率高，精密度良好及简便快速、适用性广、干扰小等特点，对两种方法的测定结果进行t检验无显著性差异(P>0.05)，符合《分析方法验证》中“简便、快速、准确、重现性好”的要求，说明紫外分光光度可代替溴量法用于苯酚滴耳液的含量测定，适用于医院自制制剂的快速检测。

[1] 中国国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部).2010年版.北京：人民卫生出版社.

[2] 潘学田.中国医院制剂规范.北京：中国医药科技出版社，1995.

[3] 周蕾，邵丽晓.紫外分光光度法测定苯酚滴耳液的含量.海峡药学，2005，17(4)：55-56.

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