HER-2、EGFR及P16在宫颈鳞癌中的表达及临床意义

王亚萍 邹 娜 于 水 陈 琦 刘 微

大连市妇产医院病理科，辽宁大连 116033

子宫颈癌是女性生殖系统最常见的恶性肿瘤之一，近年来发病趋于年轻化，5年总体生存率约在52%左右，其发生发展的过程复杂并伴有多因素的参与。本文利用免疫组化检测技术观察宫颈鳞癌中人表皮生长因子受体2（HER-2）、表皮生长因子受体（EGFR）及 P16基因的表达情况，以探讨其与宫颈癌发生、发展、浸润与转移的关系及其在判断预后和临床治疗方面的价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取本院2010年4月～2012年10月期间宫颈鳞癌住院手术患者30例，年龄40～69岁，平均48.5岁。按照国际妇产科联盟（FIGO）2000年的分期标准：Ⅰ期10例，Ⅱ期8例，Ⅲ期12例；组织学分级：Ⅰ级及Ⅱ级共8例，Ⅲ级22例；有淋巴结转移12例，无淋巴结转移18例；有脉管浸润者16例，无脉管浸润14例；浸润深度≤1/2者10例，＞1/2者20例；另选取正常人15例（年龄31～55岁，平均42.8岁）宫颈组织为对照。患者术前均未进行化疗、放疗、免疫治疗及激素等治疗。

1.2 主要试剂

即用型鼠抗人HER-2、EGFR和P16单克隆抗体及SP试剂盒均购自福州迈新生物技术开发公司。

1.3 方法

上述标本均经中性福尔马林固定、常规石蜡包埋，制成4 μm切片。采用免疫组化S-P法进行染色，按试剂盒说明方法操作。用已知阳性的切片做阳性对照，用磷酸盐缓冲液（PBS）分别代替一抗做阴性对照。

1.4 结果判定

HER-2、EGFR及P16阳性均为浅黄色或棕黄褐色颗粒，其中HER-2定位于细胞膜；EGFR定位于细胞膜和细胞质；P16定位于细胞核。（1）EGFR和HEr-2阳性判断为肿瘤细胞无棕黄色染色或仅少于10%肿瘤细胞呈较弱棕级，>10%肿瘤细胞呈较弱～中等棕黄色染色为2级，>10%肿瘤细胞呈高棕黄色染色为 3级[1]；（2）P16，阳性细胞数<10%为0级，10%～25%为1级，26%～50%为2级，>50%为3级。

1.5 统计学方法

采用SPSS 13.0统计软件进行χ2检验和相关性分析，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 HER-2、EGFR和P16蛋白的表达

本研究中宫颈鳞癌HER-2、EGFR和P16蛋白的阳性表达率分别为66.67%、60.00%和73.33%，而正常宫颈组织中这三者均无表达，两者差异有统计学意义（P＜0.01），见表1。

2.2 HER-2、EGFR及P16的表达与临床病理参数的关系

本研究中显示宫颈鳞癌HER-2的表达与组织学分级和淋巴结转移相关，EGFR的表达与淋巴结转移密切相关，P16表达与组织学分级及浸润深度相关，这三者都与临床分期和脉管浸润无关。具体见表2。

2.3 HER-2、EGFR和P16蛋白之间的相关性

通过Spearman等级相关分析发现HER-2的表达和EGFR 的表达呈正相关（r=0.6000，P=0.0201），而 HER-2和 P16 （r=0.4667，P=0.1709） 以及 EGFR 和 P16 （r=0.0667，P=0.7921）之间无相关性。

3 讨论

宫颈癌的发生、发展、浸润及转移等是比较复杂的过程，除了目前已研究明确的人乳头瘤病毒（HPV）感染是主要的致病因素以外，还有一些癌基因、抑癌基因以及生长因子受体等参与其中。

HER-2基因定位于人染色体17q21，编码具有酪氨酸激酶活性的跨膜糖蛋白，能促进肿瘤形成新生血管，抑制细胞凋亡，增强肿瘤细胞的侵袭破坏作用。HER-2基因在正常组织中表达较低，而在恶性肿瘤中有着程度不同的高表达。在其阳性表达中，盆腔淋巴结转移率高于阴性，故与淋巴结的转移及预后有关[2]。本研究中HER-2在正常宫颈组织中没有表达，而在宫颈鳞癌中的表达率为66.67%，与魏芳等[3]报道的表达率为69%比较接近，本次实验中显示宫颈鳞癌HER-2的表达与组织学分级和淋巴结转移相关，故HER-2阳性表达的肿瘤可能具有更强的增殖活性及侵袭性，可以以此作为预测患者预后的一个指标，过度表达提示预后不良。

表皮生长因子受体（EGFR）广泛存在于上皮细胞的细胞膜及细胞质，是一种跨膜糖蛋白受体。EGFR具有蛋白激酶活性及受体自身磷酸化功能，参与细胞信号的传递，该受体的持续激活可导致细胞不断生长、分裂，可能是导致细胞恶变的因素之一[4]。EGFR在许多肿瘤中呈现高表达，例如食管癌、内膜癌[5-6]，EGFR高表达具有抑制凋亡和促进肿瘤内血管增生的作用，因此能够促进肿瘤发生、转移和侵袭[7]。本实验中正常宫颈组织中无EGFR的表达，而在鳞癌中表达为60%，略低于于晓红等[8]报道的69.53%，且与淋巴结转移密切相关，但与临床分期及组织学分级无关。此结果提示EGFR在宫颈鳞癌的发生发展和转移浸润中发挥一定的作用，测定肿瘤组织中EGFR的表达可以作为判断预后的一个指标。

抑癌基因P16通过控制肿瘤抑制蛋白pRb的活性在细胞周期起到抑制细胞分化的关键作用，使细胞停止于G1期。当P16基因发生突变时，致使细胞异常增生。本次实验结果提示P16在正常宫颈组织中没有表达，而在鳞癌组织中的表达与组织学分级及浸润深度相关，肿瘤组织分化越低，浸润越深，则表达越强。这与有些作者报道P16阳性表达与宫颈肿瘤的细胞分化程度有关，细胞分化好的表达明显低于分化差的结果基本一致[9]。因此推测抑癌基因P16突变在肿瘤的发生发展及浸润过程中具有一定的作用。

HER-2可与EGFR受体形成异源二聚体，从而使得EGFR过度表达[10]，预示HER-2与EGFR之间存在着某些联系。近年来，也有研究显示，在宫颈鳞癌中HER-2与EGFR的联合表达预示患者的预后较差，无瘤生存期及无盆腔扩散生存期将缩短，即便同时辅以放化疗效果也不佳[11]。本研究中HER-2与EGFR的表达呈正相关，与夏红强等[12]报道在乳腺癌中两者表达呈负相关不同，这表明HER-2与EGFR之间具有复杂密切的关系，两者的联合过度表达对宫颈鳞癌的进展可能起到协同作用。

恶性肿瘤的发生、发展是一个多因素、多基因共同参与的过程，探讨HER-2、EGFR及P16在宫颈癌的发生、发展及浸润等方面的作用及相互关系对于肿瘤的诊断、治疗和预后判断具有重要的临床意义，并将为分子靶向药物治疗及放化疗相结合的综合疗法提供参考和帮助。

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[12]夏红强，何建蓉.Ki-67、EGFR、HER-2和p53在乳腺癌中的表达及其相关性[J].临床肿瘤学杂志，2011，16（2）：139-143.