HPLC测定阿魏酸含量的研究

秦迎春秦卫红

（1 湖南省张家界市食品药品检验所，湖南 张家界 427000；2 湖南省张家界市人民医院药剂科，湖南 张家界 427000）

HPLC测定阿魏酸含量的研究

秦迎春1秦卫红2

（1 湖南省张家界市食品药品检验所，湖南 张家界 427000；2 湖南省张家界市人民医院药剂科，湖南 张家界 427000）

目的 研究高效液相色谱法在测定阿魏酸含量方面的进展情况。方法 通过对阿魏酸测定和提取等多种不同的方法进行比较研究。结果 高效液相色谱法在测定阿魏酸含量方面具有自己独特的优势。结论 采用高效液相色谱法进行阿魏酸含量的测定研究，具有深远的意义。本文以期为后期的高效液相色谱法在测定阿魏酸含量方面的研究提供依据。

HPLC；阿魏酸；含量研究

高效液相色谱法是目前用于测定物质含量的一种新型的方法。阿魏酸具有多种药学功能，研究表明，其具有一定的抗氧化和抗衰老功能，还具有一定的免疫学价值。随着医学研究的不断深入，开发一种高效的用于治疗心脑血管等疾病的药物具有深远意义。阿魏酸具有来源广泛，毒副作用小，易于提取纯化，且药效价值明显，因此被广泛研究。本文从多个方面分析了阿魏酸的研究价值，对其物理化学性质进行总结，在药学药理上的作用效果进行分析，并对阿魏酸的提取测定方法进行探究[1]。在进行阿魏酸的含量测定时，有多种方法，经比较后得出，高效液相色谱法是一种测定阿魏酸含量的较有效的方法，值得进一步研究。

1 高效液相色谱法概述

高效液相色谱法，英文缩写为HPLC，是一种新型的测定物质含量的方法。该方法在用于物质含量的测定时，具有很多自己的独特的优点。该方法测定时速度快，效果好，操作简单。然而，在进行新的物质鉴定时，涉及到一个实验成本的问题。高效液相色谱仪主要是由色谱柱、进样器、检测器、记录器等部分组成。在工作的时候，需要样品液和标准液，首先要制得标准曲线，然后根据标准曲线制备后，进行测定，通过标准曲线得到物质的含量。其工作原理是根据物质的相似相容原理进行的，在不断的解析和再分配的过程中进行物质的分离和测定[2]。最后经由记录仪显示，转换为液相图谱进行储存和记录。HPLC法在测定的时候，只需要物质能够制备成为溶液即可，不必受物质本身的影响，因此测定范围更加广泛。而目前研究更多的则是液质联用的使用。这样不仅实现了物质的提取分离纯化，还实现了物质结构的鉴定，为更进一步的深入研究提供依据。

2 高效液相色谱法在测定阿魏酸含量方面的应用研究

2.1 阿魏酸研究进展

阿魏酸是目前研究较多的一种芳香酸，其英文名字为ferulic acid，化学学名为4-羟-3-甲氧基肉桂酸或3-（4-羟基-3-甲氧苯基）-2-丙烯酸，研究表明其相对分子质量是194.19。阿魏酸属于肉桂酸的衍生物，具有一定的免疫学活性，能够抑制血小板的集结作用，医学上常被用作止痛药。在一些常见的药品如太太口服液中等，都含有阿魏酸。该物质还被用作抗氧化和抗衰老的美容保健物质。阿魏酸属于木栓质中的一种芳香酸。阿魏属于一种植物，从阿魏中提出出来的一种物质之一，被命名为阿魏酸。阿魏酸的化学式为C10H10O4。

阿魏酸在空间构象上包括顺式构象和反式构象，对于顺式构象，其外形颜色表现为黄色，是一种油状物质，而反式构象则是一种晶体存在。阿魏酸的熔点在174℃，其属于极性物质，可溶于热水，常见的有机溶剂，而在乙醚中为微溶，在苯与石油醚中则为难溶性物质。阿魏酸最常用的功效之一就是阿魏酸具有一定的药效作用，在临床医学上常被应用。阿魏酸多用于治疗一些心脑血管疾病。阿魏酸主要是用于抑制血小板和聚集。在一些动物实验中，已经证实，阿魏酸能够有效的大鼠的血小板聚集。对于三磷酸腺苷和胶原蛋白有一定抑制效果。阿魏酸的钠盐在进行实验的时候，能够抑制由于缺血而造成的中风来改变血液粘度，达到治疗的效果。阿魏酸还能够提高benzoic acid所引起的皮肤不良现象。阿魏酸属于医药原料和中间体，并不能直接入药，需要进行进一步的加工和处理。阿魏酸早起形成于植物的叶子中，在植物的种子中也有发现，阿魏酸在植物中是普遍存在的。含量最多的地方如阿魏、酸枣仁、升麻中等。在一些食品原料里面，也发现有阿魏酸的成分，多见于咖啡、米糠等食物中。

研究表明，阿魏酸具有一定的镇静作用，对治疗心脑血管等疾病有很好的疗效[3]。阿魏酸还具有抗早孕的功效。由于阿魏酸本身具有抗氧化性，其结构显示其抗氧化性效果良好。

2.2 高效液相色谱法测定阿魏酸含量

对于阿魏酸的含量测定，有多种方法。一般常用的方法有微波辅助提取法和超临界二氧化碳萃取法等，采用高效液相色谱法对阿魏酸进行提取和含量测定，能够在短时间内得到准确的结果，而且操作起来比较容易，精密度高，重现性好。研究表明，在进行高效液相色谱法测定阿魏酸的含量时，流动性的选择很重要，多采用酸系统进行。研究资料显示，在测定复方银杏口服液时，流动相选择的是甲醇-冰醋酸[4]。测定阿魏酸还有一些其他的方法，比如薄层扫描法、薄层分光光度法等。高效液相色谱法测定阿魏酸含量的理论依据是在一定条件下，有固定的吸收波长，通过对波长的测定，读取吸光值，得到阿魏酸的含量。进行阿魏酸的测定，要选择合适的色谱柱，调节好柱温，流速，流动相等多个条件，才能够得到准确的结果。

黄罗生等对高效液相色谱法测定阿魏酸的含量进行了探讨。其研究结果表明，在进行阿魏酸含量的测定时，选取紫外检测器，其色谱条件需在实验时根据实际情况进行，选取的色谱条件是Shimpack CLC- ODS（150mm×6mm）色谱柱，流动相为甲醇乙腈磷酸三乙胺水按适当比例进行，检测波长选择324nm，流动相流速为1.0mL/min。经由单因素实验，得到最佳的测定条件。测定阿魏酸的方法虽然很多，而且常用的提取溶剂多为甲醇和乙醇，而实际上，这样的选择是有一定的局限性的。其实验结果表明，将溶解阿魏酸的溶剂进行适当的调整，能够有效的改善阿魏酸的降解情况，使得测定条件稳定，数据可靠。而且在进行该试验的时候，要尽量的做到避光实验和温度适当，不能够见光以及温度不能够过高。该试验结果还显示，对于一些药物的测定，选用的溶剂不合适的话，会造成杂质量加大，破坏色谱柱，影响实验结果，还提高了实验成本。该试验通过多次验证，得到了最佳的配比组合，使得阿魏酸在测定时有一个准确的溶剂配比。其对其他药材也具有一定的参考价值。其还得到了阿魏酸含量最高的当归产地，对其含量进行比较，明确地区对物质中阿魏酸的含量有明显的差异性这一现象。

王卫锋等对妇月康胶囊中的阿魏酸含量采用了高效液相色谱法进行了测定。其色谱条件选取美国进口紫外检测器，TIAN-250C18（4.6mm×250mm，5m）的色谱柱，选择spectra system P4000型泵，采用购买的对照品制备对照品溶液，流动相选取甲醇和1%冰醋酸水溶液按一定比例配制而成，流动相的流速控制在1.0mL/min，色谱柱温度为常温，选取320nm为检测的波长，这个和黄罗生等人的研究检测波长稍有出入。其经过试验验证，得到阿魏酸在该条件下的实验线性关系良好，能够代表阿魏酸的具体含量测定。该试验研究还进行了精密度和重复性、稳定性实验，结果表明实验的精密度在可信度范围内，实验的重复性良好，试验结果稳定，具有可信性和可操作性。

吕海涛等采用高效液相色谱法研究了当归中阿魏酸的稳定性。其色谱条件选取的是Eclipse XDB-C18（4.6mm×150mm）色谱柱，选取甲醇和水为流动相，检测波长为325 nm，流速控制在1.0mL/min范围内。绘制好标准曲线后，选取溶剂和光照为影响因素，研究阿魏酸的稳定性。其实验结果表明，阿魏酸在见光条件下容易分解，其稳定性相对略差，在加热的条件下，阿魏酸也容易分解。由此可见，阿魏酸的保存方法应该是选择在避光阴暗处保存，而且温度不能够太高。

2.3 高效液相色谱法测定阿魏酸方法讨论

高效液相色谱法测定阿魏酸的含量，是一个新型的技术。在采用该方法的时候，需要注意的问题有很多。主要需要注意的问题包括色谱柱的选择，色谱条件的确定，标准曲线的制作，标样的制备，等等。多个因素综合影响了实验的结果。阿魏酸是医学上常用的一种药物，其生理功能有很多。梁娜等研究表明，阿魏酸具有抗氧化性，具有抗血栓的作用，还能够抗血糖，抗血脂，预防动脉粥样硬化，还具有抗菌消炎的功效，还有的研究表明，阿魏酸能够在一定程度上抑制癌细胞的发生，对预防肿瘤等疾病有很好的疗效。

3 结束语

阿魏酸是一种具有多种功能的药学用物质。对于阿魏酸的研究，具有很深远的意义。在提取和测定阿魏酸的时候，有多种方法。随着科技的进步，医学事业的不断的发展，高效液相色谱法逐渐的被应用到医学方面的测定中，对医学的提高和进步是有很大的推动作用的。人们对医学的重视也在逐渐的深化，如何更好的进行阿魏酸含量的测定，是一个值得研究的问题。

[1]赵淑杰.高效液相色谱法测定消痛液药酒中阿魏酸的含量[J].药物分析杂志,1992,12(2): 119.

[2]陈汉平,刘素香,李桂梅,等.高效液相色谱法测定当归及其炮制品中的阿魏酸含量[J].中草药,1988,19(10):15-16.

[3]张娟,金青哲,王兴国,等.阿魏酸及其衍生物合成及药理研究进展[J].粮食与油脂,2007,20(1):43-45.

[4]徐自升,蔡宝昌,张弦,等.中药川芎中阿魏酸稳定性的研究[J].现代中药研究与实践,2004,18(2):25-27.

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：1671-8194（2013）08-0056-02