小叶丁香抗炎作用的实验研究

2013-01-10何晓燕史金杰宫汝淳苗婷婷

通化师范学院学报 2013年12期

何晓燕，史金杰，宫汝淳，苗婷婷

(通化师范学院生命科学学院，吉林通化134002)

小叶丁香(SyringapubescensTurcz)又名巧玲花、雀舌花、毛丁香，为木樨科(Okaceae)、丁香属(SyringaLinn)的植物，该植物为落叶灌木，有数米高，属于温性树种．中国是丁香属植物的自然分布中心，主要分布在中国西南、西北、华北、东北等地区．小叶丁香分布于河南、河北、陕西、山西、甘肃等地，生长在海拔800～2400m山地、沟内或崖石上，在长白山区也有广泛分布．其各部位均可入药，民间用其花、果实泡茶饮用，有消炎、镇咳、治疗肝炎和肝硬化之疗效，但至今未被药典收录．据报道，小叶丁香叶的水煎剂对常见化脓性感染的金黄色葡萄球菌和白色葡萄球菌，对引起继发感染的变形杆菌和绿脓杆菌，对各种(型)痢疾杆菌、伤寒杆菌和副伤寒杆菌，对引起食物中毒的鼠伤寒杆菌、沙门氏菌等均有明显的抗菌作用．关于小叶丁香的研究主要集中在抗病毒和抑菌作用方面，但未见其抗炎作用的实验研究报道．本实验采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀、甲醛致小鼠足肿胀及冰醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增强的方法来观察小叶丁香茎枝水煎液对致病小鼠的抗炎作用，以期为进一步研究小叶丁香的药理作用、进一步开发利用小叶丁香提供一定的实验依据．

1 实验材料

1.1 实验动物

健康昆明种小鼠，雌性，体重为(20±2)g，长春高新医学实验动物中心提供，合格证号：scxk-(吉)2008-0001．

1.2 实验药品与试剂

小叶丁香茎枝，采于通化县江南山上，由通化师范学院生命科学学院周繇教授鉴定；地塞米松磷酸钠注射液，批号1301201，天津博迪化工股份有限公司；二甲苯，批号20060106，沈阳市新西试剂厂提供；氯化钠，批号20120716，天津博迪化工股份有限公司；冰醋酸，批号20120303，天津市科密欧化学试剂有限公司；甲醛，批号20110809，沈阳市新西试剂厂提供．

1.3 实验仪器

高速万能粉碎机，型号FW100，北京中兴伟业仪器有限公司生产；精密电子天平，型号JA2003 SHP07003，上海恒平科学仪器有限公司；可调控温电热套，型号ZDHW，北京中兴伟业仪器有限公司；台式高速离心机，型号TGL-16G，湖南星科学仪器有限公司；电子天平，型号MB10KPW，上海精密科学仪器有限公司；H723-可见分光光度计，上海第三分析仪器厂生产；电热鼓风烘干箱，型号DGF30，南京实验仪器厂生产．

2 实验方法

2.1 小叶丁香茎枝水煎液的制备

取小叶丁香的茎枝在烘干箱60℃条件下进行烘干．称量烘干的小叶丁香茎枝100g并用粉碎机粉碎成粉末状，把100g小叶丁香粉末加入10倍蒸馏水浸泡约3h，然后放在可控温的电热套中煮沸60min后，倒出煎出液1，向剩余药渣中加入与第一次等量的蒸馏水，继续加热60min，倒出煎出液2将两次煎出液合并在一起，用消毒纱布过滤，去掉药渣，再进行熬制，使煎出液熬成膏状为止．向小叶丁香膏中加入100mL蒸馏水(即每1mL含生药1g)，存冰箱中冷藏备用．

2.2 实验分组

取小鼠50只，随机分为5组，每组10只．即生理盐水组、地塞米松组及小叶丁香茎枝水煎液低、中、高剂量组．

2.3 给药剂量

依据《中药药理研究方法学》计算，地塞米松组(3.6×10-3g/Kg)和小叶丁香茎枝水煎液低、中、高剂量组(2.5g/Kg、5g/Kg、10g/Kg)分别按0.1mL/10g的剂量灌胃给药，生理盐水组给予等体积的生理盐水，每日1次，连续给药7d．

2.4 二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验

实验分组、给药剂量和给药方法同“2.2”、“2.3”.末次给药1h后，右侧耳廓正反面均匀涂抹二甲苯0.1mL，左耳涂抹等量生理盐水为阴性对照，1h后将小鼠颈椎脱臼处死，沿耳廓对称剪下小鼠左右两耳，精密电子天平称量，计算肿胀度(mg)及肿胀抑制率(%)．肿胀度(mg)=右耳片重(mg)-左耳片重(mg)．肿胀抑制率(%)=(对照组平均肿胀度-给药组平均肿胀度)/(对照组平均肿胀度)×100%．

2.5 甲醛致小鼠足肿胀实验

实验分组、给药剂量和给药方法同“2.2”、“2.3”．末次给药1h后，在右足跖处注射50%甲醛30ml，致炎1h后将小鼠颈椎脱臼处死，从踝关节处对称剪下小鼠左右足，精密电子天平称量，计算肿胀度(mg)及肿胀抑制率(%)．肿胀度(mg)=右足重(mg)-左足重(mg)．肿胀抑制率(%)=(对照组平均肿胀度-给药组平均肿胀度)/(对照组平均肿胀度)×100%．

2.6 冰醋酸致小鼠腹腔毛细血管渗出实验

实验分组、给药剂量和给药方法同“2.2”、“2.3”．末次给药后1.5h，尾静脉注射0.5%伊文思蓝生理盐水溶液0.1mL/10g，10min后腹腔注射0.7%冰醋酸0.1mL/10g，20min后脱颈椎处死小鼠，每只腹腔注射生理盐水5mL轻揉腹部3min，从腹腔中收集腹腔洗出液3mL(冲洗液被血液污染，则弃去不用)，1500r/min离心15min，取上清液用H723-可见分光光度计，于λ=590nm处测吸光度值．

2.7 数据统计分析

3 结果与分析

3.1 对小鼠一般特征的影响

各实验组小鼠状态无明显差别，均生活正常，无死亡，低剂量组小鼠在前期精神稍有些萎靡，给药高、中剂量组稍显活泼．饮食量与饮水量较稳定，各组体重增长速度无明显差异．

3.2 小叶丁香茎枝水煎液对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响

实验结果表明：与生理盐水组比较，小叶丁香茎枝水煎液低、中、高剂量组均可以抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀，较地塞米松组弱；其中，小叶丁香茎枝水煎液低剂量组无显著性差异(P>0.05)，小叶丁香茎枝水煎液中剂量组差异显著(P<0.05)，小叶丁香茎枝水煎液高剂量组差异极显著(P<0.01)．结果见表1．

表1 小叶丁香茎枝水煎液对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响

注:与生理盐水组比较*P<0.05，**P<0.01．

3.3 小叶丁香茎枝水煎液对甲醛致小鼠足肿胀的影响

实验结果表明：与生理盐水组比较，小叶丁香茎枝水煎液低、中、高剂量组均可以抑制甲醛所致小鼠足肿胀，较地塞米松组弱；其中，小叶丁香茎枝水煎液中、高剂量组差异极显著(P<0.01)，小叶丁香茎枝水煎液低剂量组与生理盐水组比较无显著性差异(P>0.05).结果见表2.

表2 小叶丁香茎枝水煎液对甲醛致小鼠足肿胀的影响

注:与生理盐水组比较*P<0.05，**P<0.01.

3.4 小叶丁香茎枝水煎液对冰醋酸致小鼠腹腔毛细血管渗出的影响

实验结果表明：与生理盐水组比较，小叶丁香茎枝水煎液低、中、高剂量组均可以抑制冰醋酸所致小鼠腹腔毛细血管渗出，较地塞米松组弱；其中，小叶丁香茎枝水煎液高、中剂量组差异极显著(P<0.01)，小叶丁香茎枝水煎液低剂量组无显著性差异(P>0.05).结果见表3.

表3 小叶丁香茎枝水煎液对冰醋酸所致小鼠腹腔毛细血管

注:与生理盐水组比较*P<0.05，**P<0.01．

4 讨论

炎症是机体活组织对各种损伤因子所发生的以防御为主的反应，是临床常见的病理过程之一，因此抗炎药物研究具有重要的临床意义．组织引起炎症的原因有多种，但其基本病理变化都包括变质、渗出和增生三项．一般来说，炎症早期主要表现是毛细血管扩张、通透性增强、渗出和水肿．

毛细血管是最细的，也是数量最多的一类血管．在我们全身组织内，广泛分布着毛细血管网，以确保每个细胞都有充分的血液供应．皮肤毛细血管通透性实验是抗炎药物筛选的常用方法之一．本实验用二甲苯、甲醛、冰醋酸作为致炎因子，观察了小叶丁香茎枝水煎液对炎症早期实验性渗出、肿胀的影响．研究结果表明，小叶丁香茎枝水煎液对二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀、甲醛引起的小鼠足跖肿胀和冰醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增强均有显著的抑制作用，并有一定的剂量依赖性．

综上所述，小叶丁香茎枝水煎液具有一定的抗炎作用．其作用机理与减少毛细血管通透性、减少渗出有关，尚待进行进一步研究．

参考文献：

[1]崔洪霞,蒋高明,臧淑英.丁香属植物的地理分布及其起源演化[J].植物研究,2004,24(02):141-145.

[2]徐蕊,郑友兰,韩佳宏,等.不同采收期小叶丁香皮中黄酮和多糖含量的比较研究[J].人参研究,2011(03):19.

[3]尹卫平,赵天增,张占旺,等.丁香属河南小叶丁香挥发油成分的研究[J].中草药,1998,29(04):225.

[4]宋光西,马玲云,魏锋,等.丁香属植物的化学成分分类及药理作用研究进展[J].亚太传统医药,2011,7(5):179-181.

[5]李永吉,王艳宏.丁香叶药用研究进展[J].中药研究进展,2003,20(1):22.

[6]朱金段,袁德俊,林新颖.丁香的药理研究现状及临床应用[J].中国药物经济学,2013(1):32-35.

[7]陈天丽,张红,周春英.丁香外用的临床及实验研究概述[J].山东中医杂志,2009,28(2):139-141.

[8]王丹丹,刘盛泉,陈英杰.紫丁香抗菌有效成分的研究[J].药学学报,1982,17(12):35-42.

[9]李锦绣.丁香现代药理研究进展[J].实用中医药杂志,2002,18(6):54.

[10]吴鸣建,赵天增,张海艳,等.小叶丁香化学成分的研究(I)[J].中草药,2003,34(1):7.