头孢氨苄缓释片含量测定方法的改进

李传响 刘红 夏勇

头孢氨苄缓释片含量测定方法的改进

李传响 刘红 夏勇

目的建立头孢氨苄缓释片含量测定最佳条件的高效液相色谱方法。方法 色谱柱为Wondasil C18(4.6 mm×250 mm，5μm)分析柱。以磷酸盐缓冲液(pH6.8)-甲醇(80∶20)为流动相，流速1.0 m l/min，检测波长为260 nm。结果头孢氨苄浓度在3.92～58.85μg/ml范围内与峰面积呈现良好关系，平均回收率99.6%，RSD为1.1%(n=5)。结论本法准确度高，专属性强，操作简便，可用于头孢氨苄缓释片的含量测定。

头孢氨苄;缓释片;含量测定

头孢氨苄及其制剂临床应用相当广泛，为半合成的一代口服头孢菌素，由其制成的制剂很多，关于头孢氨苄的定量分析方法有很多［1］。2005年版药典起，头孢氨苄及其大部分制剂含量测定方法都改为高效液相色谱法［2］，而唯独头孢氨苄缓释制剂至今还是沿用1996年版卫生部颁标准中规定的化学滴定方法［3］。滴定法虽然经典，但是操作极为烦琐、费时，针对该制剂测量误差较大，且不适应现代化节奏的需要。为此笔者广泛参阅有关资料［4-8］，不断优化含量测定方法，最终采取本文所述液相色谱法测定其含量，快速，简便，准确度高。

1 仪器与试药

MODEL500型高效液相色谱仪，UV500型紫外检测器，色谱柱：岛津，Wondasil C18(4.6 ×250 mm，5 μm)，Mettler AB265-S型电子天平。头孢氨苄对照品(中国药品生物制品检定所 批号：130408-201002含量为94.2%);头孢氨苄缓释片(市场抽验)，磷酸二氢钾，甲醇均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件与系统性试验 色谱柱，岛津，Wondasil C18(4.6×250 mm，5 μm)，流动相：磷酸盐缓冲液(pH6.8)-甲醇(80∶20);检测波长：260 nm。流速为：1.0 ml/min，柱温为室温，进样量：20μl，理论板数以头孢氨苄峰计算，应不得低于1500。色谱图见图1。

图1

2.2 溶液的制备［4］

2.2.1 对照品溶液制备 精密称取头孢氨苄对照品24.52 mg，置50 ml量瓶中，加磷酸盐缓冲液(pH6.8)10 m l溶解，再加水稀释至刻度，摇匀，作为储备液(0.4904 mg/ml)。精密量取上述储备溶液10m l，置50ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液。

2.2.2 供试品溶液制备 取本品10片，精密称定，研细，精密称取细粉适量(约相当于头孢氨苄50 mg)置100 m l量瓶中，加磷酸盐缓冲液(pH6.8)10 m l溶解，再加水稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液10 ml，置50 ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，滤过，得供试品溶液。

2.3 方法学考察

2.3.1 线性范围 精密量取对照品溶液1、2、3、5、10、15 ml，分别置25 ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。精密量取20μl，注入高效液相色谱仪中，记录色谱图，以浓度为横座标，峰面积为纵坐标，做标准曲线，得回归方程 Y=18350.82X+1690.286，r=0.9999。结果表明，头孢氨苄浓度在3.92～58.85μg/m l的范围内呈现良好的线性关系。

2.3.2 精密度试验 精密量取对照品溶液20μl，注入高效液相色谱仪中，重复进样5次，记录色谱图。结果RSD为0.3%。结果表明精密度良好。

2.3.3 重复性试验 精密称取同一批样品5份，平行测定，含量平均值为96.3%，RSD为0.6%。

2.3.4 重现性试验 以同一批样品，由5位不同人员，按本文所述方法依法测定，测得平均含量为96.0%，RSD为1.2%。结果表明该方法重现性好。

2.3.5 回收率试验 取已知含量的样品，精密加入头孢氨苄对照品适量，按2.3.2项下方法试验，计算回收率，如表1。

3 讨论

3.1 头孢氨苄在水中微溶，在乙醇、三氯甲烷中不溶［2］，本文在反复试验过程中，比较不同的溶剂，不同pH值的缓冲液，以磷酸盐缓冲液(pH6.8)10 ml溶解之后，效果最佳，再以水稀释至刻度，有利于头孢氨苄的溶出。针对缓释制剂因辅料的特殊性［9］，导致头孢氨苄在水中溶解更难，用本文的溶解方法很好地改善头孢氨苄缓释片的溶出行为，而且节约检验成本，避免对环境影响，使含量定量更准确。

3.2 查阅现有文献资料，大多都以254nm作为测定波长，经反复实验头孢氨苄在磷酸盐缓冲液(pH6.8)的溶液中，最大吸收值在260nm。故本文选取260nm波长为测定波长，达到了很好的分离分析效果。

［1］乔明艳.头孢氨苄定量分析方法概述.黑龙江医药，2010，23(4)：535-536.

［2］中国医药科技出版社.中国药典2010年版二部，2010：208.

［3］中华人民共和国卫生部.部标准(试行)WS-086(X-074)-96.

［4］董培.卡托普利缓释片采用HPLC法含量测定结果分析.中国医药科学，2011，1(10)：104.

［5］马越峰，苏春胜，谢元德，等.克拉霉素缓释片含量测定方法研究.中国现代应用药学，2005，22(Z1)：642-643.

［6］梁晓燕.高效液相色谱法测定头孢氨苄缓释片的含量.中国药业，2010，19(17)：24-25.

［7］周希英.高效液相色谱法测定头孢氨苄缓释片的含量.中国药事，2006，20(12)：751，758.

［8］王庆银，蔡艳丽.HPLC测定头孢氨苄缓释片的含量.山东大学学报(医学版)，2006，44(6)：601.

［9］何海燕，曹德善，戈文兰，等.头孢氨苄缓释片的研制.江苏药学与临床研究，2002，10(1)：1-3.

Improvement of determ ination method of Cefalexin in Cefalexin Sustained-Releasts Tablets

LIChuanxiang，LIU Hong，XIAYong.
Anqing Institute for Food and Drug Control Anqing 246001，China

ObjectiveTo establish an HPLCmethod for the determinationmethod of Cefalexin in Cefalexin Sustained-Releasts Tablets.M ethodsThe column：Wondasil C18column(4.6mm×250mm，5μm)was adopted with themobile phase phosphate buffer(pH6.8)-methanol(80∶20).The flow rate was 1.0 ml/min.The detection wavelength was at 260nm.ResultsThe calibration curves were linear between 3.92 and 58.85μg/ml for Cefalexin.The recovery(n=5)wasmore than 99.6% ，RSD was 1.1%.ConclusionThe method is convenientand rapid with good specialization.It can be used for determination of Cefalexin in Cefalexin Sustained-Releasts Tablets.

Cefalexin;Sustained-Releasts Tablets;Determination

246001 安徽省安庆市食品药品检验所

表1 回收率试验测定结果(n=5)

注：*已知含量样品取用量以相应体积与浓度换算而得

已知含量样品取用量(mg) 加入量(mg) 测得量(mg) 回收率(%) 平均值(%) RSD(%)0.190 0.098 0.286 97.96 0.190 0.196 0.388 101.02 0.190 0.294 0.485 100.34 99.6 1.1 0.190 0.490 0.675 98.98 0.190 0.981 1.167 99.59

2.3.6 稳定性试验 取同一供试品溶液，分别于制备后0、1、2、4、8、12，24 h 进样 20 μl进行测定平均含量为 95.3%，RSD为0.7%。结果表明本品在24 h内稳定。

2.3.7 样品含量测定 分别精密量取对照品溶液和供试品溶液各20μl，注入高效液相色谱仪中，记录色谱图，以外标法计算含量，并与现行标准试验结果对照。结果见表2。

表2 样品含量测定结果(%，n=4)

批号 本法测定结果标准方法测定结果110203 96.7 95.3 110415 95.8 94.2 110517 100.2 98.3 120105 97.6 95.9