芳香疗法对大鼠偏头痛疗效的实验研究

第四军医大学基础部教学实验中心 （西安710032）

孙湘桐 蔡国洪 陈健康 于军 张海锋 赵玉峰 铁 茹▲

偏头痛是临床常见多发病，以反复发作的偏侧或双侧头痛为特征，主要是遗传特征和内外因素作用的结果［1］。目前关于偏头痛的发病机制研究尚无定论，针对偏头痛的防治手段也各有利弊，而该病的发病率仍居高不下，国内外患者所付出的物质或精神方面的代价也相当巨大，因此防治偏头痛药物研究成为当今医学研究的一项热点。在研究偏头痛的过程中人们发现，某些嗅觉刺激会诱发偏头痛，一些患者在偏头痛发作的先兆期也会出现嗅幻觉。美国芝加哥市味觉与嗅觉基金会一项研究证明：闻苹果香可以有效缓解偏头痛。专家分析这主要是因为偏头痛与嗅觉会相互影响。基于以上的观点，我们认为通过嗅觉刺激来治疗偏头痛具有广阔的天地。

硝酸甘油型偏头痛模型在国内外均有报道，此模型方法简单经济，机制单一，可在短期内大量复制［2，3］。本实验用SD大鼠进行硝酸甘油偏头痛动物模型制作，用适宜气味刺激，探讨嗅刺激治疗偏头痛临床治疗的可行性，希望对临床偏头痛提供多样的个体化和低副作用的治疗方法。

材料和方法

1 动物及分组 24只SD大鼠，雄性，体重200±20g（由第四军医大学动物实验中心提供），随机分为四组，每组6只，分别为模型对照组、天舒胶囊治疗组、气味治疗组、空白组。

2 实验试剂 天舒胶囊1盒（每粒0.34g，临用前用蒸馏水配成3.74g／100 ml）［4］、硝酸甘油注射液，每支5 mg／ml（由北京益民药业有限公司提供，批准文号：国药准字 H11020289）、小磨芝麻香油1瓶（250 ml）、香叶醇百里香1瓶（5.75 ml）、青苹果气味香水1瓶（DEMETER香水）。

3 实验方法

3.1 SD大鼠偏好气味筛选：将24只SD大鼠随机分为四组，每组6只，编号为A、B、C、D。A组闻香叶醇香精，B组闻青苹果香味香水，C组闻芝麻香油，D组闻烧焦的头发。将香叶醇香精、青苹果味香水、芝麻香油均匀喷涂在脱脂棉球上，放在鼠笼上进行香味刺激，观察记录每只大鼠在10 min内闻气味的次数，通过次数的多少来筛选大鼠偏好的气味。

3.2 建立硝酸甘油偏头痛模型：将上一步使用过的大鼠再随机分为四组，分别为模型对照组、天舒胶囊治疗组、气味治疗组、空白组。天舒胶囊治疗组提前3d灌胃天舒胶囊溶液1次1 ml／100g体质量；空白组皮下注射生理盐水10 mg／kg；模型对照组、天舒胶囊治疗组及气味治疗组大鼠皮下注射硝酸甘油注射剂10 mg／kg，建立硝酸甘油偏头痛模型，前三组出现双耳发红、前肢频繁搔头、爬笼次数增多证明造模成功［5］，第四组不出现任何症状。

3.3 施加气味刺激：在造模30 min后，模型对照组灌胃蒸馏水10 ml／kg，天舒胶囊治疗组灌胃天舒胶囊1次1 ml／100g体质量，气味治疗组给予大鼠喜好的的气味刺激。

3.4 观察方法：造模30 min后观察各组大鼠挠头、爬笼情况。挠头是观察大鼠造模后挠头出现和消失的时间。挠头出现时间以大鼠出现连续挠头次数达5次以上为标志，消失时间以一个时间段中大鼠挠头次数少于5次并出现倦怠、疲乏的表现为标志。从造模后每30 min作为一个时间段，采用持续时间分段计数方法观察大鼠造模后在每一时间段挠头、爬笼的次数。

4 统计学处理 数据采用SPSS 15.0统计软件进行分析。

结 果

1 经过筛选实验 发现大鼠在10 min内闻香叶醇、青苹果香及芝麻油香的次数都明显多于闻烧焦的头发，并且对于前三种气味会反复嗅闻，对于烧焦的头发则没有此种情形。因此确定香叶醇香、青苹果香、芝麻油香作为SD大鼠的喜好气味用于后续实验。

2 爬笼次数 气味治疗组与模型组在0-30 min、60-90 min、90-120 min、120-150 min时段内有统计学意义（P＜0.05），结果见表1。

表1 大鼠不同时间段爬笼次数

3 挠头次数 空白组只在少数几个时间段内有偶发的一两次挠头。而模型组、药物治疗组、气味治疗组在造模后开始出现频繁的挠头。经统计后发现，气味治疗组与模型组只有在150-180时段内具有统计学意义（P＜0.05）。由于气味的刺激，大鼠的挠头现象和爬笼现象并不同步，结果见表2。

表2 大鼠不同时间段挠头次数

4 挠头的出现时间和消失时间 气味治疗组与模型组差异不具有统计学意义，表明气味治疗并不能减短病程，结果见表3。

表3 2组疗效比较

讨 论

由于硝酸甘油在血管壁通过酶或非酶的生物激活途径生成一氧化氮（NO），NO强烈地扩张脑血管，造成无菌性炎症而诱发偏头痛。NO具神经毒性作用，可激发三叉神经-血管反射，引起脑血管扩张，产生偏头痛［6］。通过建立SD大鼠硝酸甘油偏头痛模型，随机分组后给予不同的治疗方法，记录爬笼次数和挠头次数，发现气味治疗组比模型组爬笼次数明显减少，而与药物治疗组效果相当，表明给予大鼠适宜的气味刺激对大鼠的偏头痛症状有所缓解。说明气味刺激对大鼠偏头痛的缓解有一定的功效。这是因为嗅觉与其他行为相互作用，构成嗅觉参与脑功能影响的复杂过程［7］。鼻腔黏膜的嗅上皮含有嗅感觉神经元（OSN），在OSN膜上存在G蛋白耦联嗅觉受体（OR），当气味与特异性的OR结合后，引出嗅觉感受器电位，由嗅感觉神经元的轴突传递至嗅球，嗅球又将信号通过嗅束投射到初级嗅皮质。这样嗅觉感受器、嗅球和大脑嗅觉中枢就三位一体地形成了嗅觉感受和传导路线。这种复杂的途径和通路可能是嗅觉调控和影响许多重要脑功能的基础，这也正是适宜气味刺激缓解偏头痛的基础。

偏头痛与掌管人情绪、记忆等的大脑边缘系统关系密切，适宜气味通过神经传递给边缘系统，良好的体验使边缘系统得以整合患者的情感，减轻患者头痛时的焦虑情绪，并分散注意力，使颈部、头部肌肉由紧张收缩变得松弛，从而起到镇痛作用［8］。实验发现气味刺激对SD大鼠偏头痛模型的爬笼症状有所缓解，但是对挠头及病程并没有明显的缓解作用，说明适宜气味对SD大鼠偏头痛具有一定的缓解效果，但不能缩短病程。

通过不断重复实验巩固强化，可能会建立起一种嗅觉反射，即施加一种适宜的气味刺激可以明显缓解偏头痛，各项检测指标与相同气味第一次刺激时具有显著差异。这种可能性有待进一步研究，希望为临床治疗偏头痛提供一种简便、有效、实惠的方式，

［1］赵永烈，王爱成，陈锦锋等.硝酸甘油型偏头痛模型评述.中国康复理论与实践，2005，6（11）：455-456.

［2］Cristina T，Rosaria G，Wang DC，etal.Nitroglycerin induces hyperalgesia in rats-ati me-course study［J］.Eur J Phar macol，2003，464（2）：159-162.

［3］龙 军，方泰惠.实验性偏头痛动物模型研究进展［J］.中风与神经疾病杂志，2003，20（2）：187-188.

［4］杨德功，刘红权，黄厚才，等.鼻疗法喷剂对偏头痛大鼠模型5-HT、NO、多巴胺含量的影响.中国实用医药，2008，3（24）：81-83.

［5］付先军，宋旭霞，周永红，等.硝酸甘油型实验性偏头痛大鼠模型行为症状学评价［J］.中华神经医学杂志，2005，4（5）：449-451.

［6］周永红，王新陆，胡怀强，等.逍遥滴鼻液对实验性偏头痛模型大鼠行为症状的影响［J］.中国比较医学杂志，2005，15（3）：157-160.

［7］汪 莉，韩春庚，杨爱红，等.薰衣草精油通过嗅觉通路对大鼠血压的影响.安徽医科大学学报，2009，44（2）：221-223.

［8］任永欣，彭 成，姚 于.头风饮对实验性偏头痛动物模型c-f0s、c-jun基因表达的影响［J］.成都中医药大学学报，2000，23（3）：34-36.