兰州百合鳞片培养快速繁殖技术研究简报

李 洁 (长江大学园艺园林学院，湖北 荆州 434025)

谭风云 (湖北城隆市政园林设计有限公司，湖北 荆州 434000)

潘佑找，刘晓玲，彭 斌，胡梦婷 (长江大学园艺园林学院，湖北 荆州 434025)

兰州百合鳞片培养快速繁殖技术研究简报

李 洁 (长江大学园艺园林学院，湖北 荆州 434025)

谭风云 (湖北城隆市政园林设计有限公司，湖北 荆州 434000)

潘佑找，刘晓玲，彭 斌，胡梦婷 (长江大学园艺园林学院，湖北 荆州 434025)

以兰州百合(Liliumdavidiivar.unicolor)鳞片为外植体进行快速繁殖技术研究。结果表明，兰州百合鳞片不同部位均可诱导出芽，其强弱依次为外层、中层、内层；芽诱导最佳培养基是MS + 6-BA 0.2mg/L+ NAA 0.5mg/L，NAA较2,4-D更有利于芽的增殖；NAA诱导生根的效果要好于IAA，生根诱导最佳培养基为1/2MS + NAA 0.5mg/L，而且生根培养对后期的移栽也有影响。

兰州百合(Liliumdavidiivar.unicolor)；鳞片；外植体；组织培养；快速繁殖

兰州百合(Liliumdavidiivar.unicolor)是百合科百合属川百合的变种，是多年生草本植物，有着悠久的栽培历史。兰州百合营养丰富，品质极佳，以“名菜良药”著称，是百合中的佼佼者。百合的常规繁殖方法主要采用常规分球、分珠芽鳞片扦插、鳞片包埋等，但存在繁殖系数低、易感染病毒、栽培面积难以扩大以及多代繁殖后退化等缺陷。由于组织培养具有繁殖速度快、占用空间小、便于种质保存与交换等优势，在百合繁殖中占有主导地位。百合属植物鳞片作为外植体具有容易获得、分化能力强、对培养基要求不严等优点，是目前百合组织培养中普遍采用的外植体[1]。另外，百合叶片[2]、茎段[3]、根[4]、珠芽[5]作为外植体的也有相关研究。本研究以兰州百合鳞片为材料，拟建立较完整的快速繁殖体系，达到降低生产成本目的。

1 材料与方法

1.1 材料

兰州百合于2011年9月采自恩施药用植物研究所，保存于花盆中。

1.2 方法

(1)材料处理 将兰州百合鳞片刷净泥土，流水冲洗10min，75%乙醇消毒35s，10%次氯酸钠溶液消毒10min，无菌水冲洗6次。将兰州百合鳞片分为外层、中层、内层，切成0.5cm×0.5cm的小方块用于接种。

(2)诱导培养 以MS培养基为基本培养基，培养基中6-BA为1.0mg/L，NAA设置0.2、0.5mg/L 2个浓度。培养温度为25℃，光照强度为1000～1500lx，每天光照12h。

(3)继代培养 接种后一个月，进行继代培养，继代培养基为MS + 6-BA 0.2mg/L + NAA(0.05、0.20、0.50mg/L)或2,4-D(0.05、0.2、0.5mg/L)。

(4)生根培养与移栽 将经过继代培养的无根苗接种到生根培养基，生根培养基为1/2MS + IAA(0.2、0.5 mg/L)或NAA(0.2、0.5 mg/L)。试管苗的根长到1～2cm时进行移栽，移栽前进行炼苗。

2 结果与分析

2.1 NAA及鳞片部位对兰州百合芽诱导的影响

接种第11d后兰州鳞片百合开始膨大，20d左右切口处出现黄绿色愈伤组织，少数有气生根出现，30d时形成绿色小芽。在6-BA相同的情况下，NAA 0.5mg/L比0.2mg/L更有利于芽的诱导，且鳞片不同部位分化强弱顺序为外>中>内(表1)。

表1 NAA及鳞片部位对兰州百合芽诱导的影响

2.2 NAA和2,4-D对继代培养的影响

从表2可看出，在6-BA相同的情况下，芽增殖率随NAA和2,4-D浓度的升高而升高，但NAA较2,4-D更有利于芽的增殖，且增殖芽的质量也好。

表2 NAA和2,4-D对兰州百合继代培养的影响

2.3 IAA和NAA对生根培养的影响

由表3可见，所有处理的生根率都是100%，IAA处理的平均生根数较NAA处理的多，综合根数和根的粗细来看，NAA 0.5mg/L对生根更有利。

表3 IAA和NAA生根培养的影响

3 讨 论

百合的鳞片外植体的切取部位除了外、中、内层，其上、中、下部位对组织培养结果也有影响[4,6-7]。这在本研究的兰州百合中也得到了证实。试管苗叶面无角质、蜡质、表皮毛很少或者无，气孔开关能力弱，极易失水，炼苗是非常必要的措施。通过光照和湿度的变化促进茎叶保护组织的发生和气孔功能的恢复[8-9]，以促使其适应环境。移栽成活率随着炼苗的天数而有所提高，但并非炼苗时间越久越好，本研究州鳞片百合百合炼苗3d，加上移栽后给予合适的条件，移栽成活率达100%。

[1]蒋细旺，司怀军．百合的组织培养技术综述[J]．湖北农业科学，2004，(1)：78-82．

[2]潘佑找，柯尊涛，赵宇瑛．不同外植体对兰州百合组织培养的影响[J]．安徽农学通报，2007，13(19)：242-245．

[3]孟 杨，潘佑找，贾珊珊，等．湖北百合组织培养技术研究[J]．安徽农业科学，2006，34(17)：4247-4248．

[4]杨成德，种 康，敬兰花．百合鳞片不同部位的小鳞茎分化与激素调节研究[J]．兰州大学学报(自然科学版)，1998，24(3)：95-99．

[5]赵祥云，程 廉，刑尤美，等．百合珠芽组培及脱毒研究[J]．园艺学报，1993，20(3)：284-288．

[6]潘佑找，林 强，陈香丽，等．鳞片不同放置方式对卷丹快速繁殖的影响[J]．湖北农业科学，2009，48(10)：2499-2501．

[7]Pan Y Z.Study on Tissue Culture and Rapid Propagation of WildLiliumlancifolium[J].Medicinal Plant,2011,5:51-55.

[8]Jeong J H.Invitropropagation of bulb scale section of several Korean native lilies [J].Acta Hortic,1996,41:269-276.

[9]Pan Y Z,Zhao Y Y,Liu X L,et al.Different Explants ofLiliumlancifoliumhave Different Potential to Differentiate and Regenerate in Tissue Culture [J].Agricultural Science & Technology,2011,12:1437-1440.

10.3969/j.issn.1673-1409(S).2012.08.010

Q813.1+2；Q949.71+8.23

A

1673-1409(2012)08-S030-02

2012-07-10

李 洁(1991-)，女，北京人，现从事园艺植物繁殖研究。

潘佑找，E-mail:panyouzhao@163.com。