DLBCL化疗耐药与细胞因子IL-6、IL-10水平的相关性

王文霞 王 彬 刘新红

1.山东省临朐县人民医院血液肿瘤科，山东临朐 262600；2.山东省临朐县人民医院放疗科，山东临朐 262600

DLBCL化疗耐药与细胞因子IL-6、IL-10水平的相关性

王文霞1王 彬1刘新红2

1.山东省临朐县人民医院血液肿瘤科，山东临朐 262600；2.山东省临朐县人民医院放疗科，山东临朐 262600

目的 通过检测弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）患者治疗前、后血清细胞因子白介素（IL）-6、IL-10的水平变化，探讨IL-6、IL-10的表达水平与DLBCL化疗耐药的相关性。 方法 将40例确诊的DLBCL患者按对化疗的敏感性分为两组（化疗耐药组及化疗敏感组）各20例，选择同期20例健康人作为对照组，用ELISA法测定DLBCL患者各阶段及对照组血清IL-6、IL-10的水平。 结果 化疗耐药组治疗前的血清中IL-6、IL-10表达水平均明显高于化疗敏感组和对照组（均P＜0.05），治疗缓解后明显低于治疗前（P＜0.05）；DLBCL复发耐药时，患者血清中的IL-6、IL-10表达水平又高于缓解时水平 （均P＜0.05）。 结论 血清中细胞因子IL-6、IL-10的表达可预测DLBCL的疗效，可能是DLBCL耐药的相关指标。

弥漫大B细胞淋巴瘤；细胞因子；白细胞介素-6；白细胞介素-10；细胞耐药

弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）是一种具有异质性的恶性肿瘤，是非霍奇金淋巴瘤（NHL）病理类型中为最常见的一种，其异质性表现在临床表现、组织学形态、分子生物学和预后等方面。尽管随着对DLBCL研究的进展及治疗方法的完善，但仍有半数以上的DLBCL病例不能治愈。研究表明多药耐药基因过度表达是其难治的主要原因，但不能完全解释清楚[1-2]。难治性标准参照参考文献[3]。目前对于细胞因子与DLBCL化疗耐药相关性的研究较少，本研究探讨DLBCL患者化疗耐药与血清细胞因子IL-6、IL-10水平的相关性。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取自2010年12月～2011年12月临朐县人民医院血液肿瘤科收治的40例初治的接受正规化疗、依从性好且坚持随访的DLBCL患者为研究对象，均经病理活检、免疫组织化学证实。分为化疗耐药组（化疗耐药患者，n=20）和化疗敏感组（化疗敏感患者，n=20），其中男22例，女18例，年龄20～76岁，中位年龄36岁。入选标准：确诊的DLBCL患者，无明显化疗禁忌症，接受正规化疗并坚持随访。排除标准：心脏疾病、慢性呼吸系统及肝肾疾病，其他疾病继发的恶性肿瘤，影响血清细胞因子IL-6、IL-10指标的其他各种疾病。另选择同期20例健康人作为对照组。两组在年龄、性别等一般资料上比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 检测方法

采用ELISA法检测所有血清中的IL-6、IL-10水平，三组患者在治疗前空腹抽取静脉血5 mL，化疗敏感组及耐药组分别给予标准方案及强化方法治疗4周期，治疗结束均空腹抽静脉血5 mL。离心机离心，于-80℃低温冰箱保存血清标本，分别检测血清中的IL-6、IL-10水平。

1.3 统计学方法

采用统计软件SPSS 15.0对实验数据进行分析，计量资料数据以均数±标准差（±s）表示，采用方差分析，两两比较采用LSD-t检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 所有研究对象治疗前血清IL-6、IL-10表达水平比较

所有研究对象治疗前血清IL-6、IL-10的表达水平示，化疗耐药组明显高于化疗敏感组和对照组（均P＜0.05），化疗敏感组与对照组之间无显著性差异。见表1。

表1 治疗前DLBCL患者和正常对照组IL-6、IL-10水平（±s，pg/mL）

表1 治疗前DLBCL患者和正常对照组IL-6、IL-10水平（±s，pg/mL）

指标F值 P值组别化疗耐药组 化疗敏感组 对照组IL-6 IL-10 13.01±2.36 51.28±5.79 5.49±0.31 27.56±5.78 5.41±1.98 29.98±5.86 13.468 14.683＜0.05＜0.05

2.2 化疗敏感组治疗各阶段及对照组血清IL-6、IL-10表达比较

化疗敏感组治疗前后及对照组血清中IL-6、IL-10水平示：治疗前、缓解后与对照组差异无统计学意义（P＞0.05）。见表2。

表2 化疗敏感组治疗各阶段及对照组血清IL-6、IL-10 水平比较（±s，pg/mL）

表2 化疗敏感组治疗各阶段及对照组血清IL-6、IL-10 水平比较（±s，pg/mL）

指标F值 P值组别对照组 化疗敏感组治疗前 缓解后IL-6 IL-10 5.41±1.98 29.98±5.86 5.49±0.31 27.56±5.78 5.36±0.83 27.48±2.32 3.162 2.167＞0.05＞0.05

2.3 化疗耐药组治疗各阶段血清中IL-6、IL-10表达比较

化疗耐药组DLBCL治疗各阶段血清中的IL-6、IL-10水平，治疗后缓解者明显低于治疗前（P＜0.05）。化疗耐药组发生复发耐药时，患者血清中的IL-6、IL-10水平高于缓解时水平（P＜0.05），且发生复发耐药时IL-6、IL-10水平与治疗前无差异（P ＜ 0.05），见表 3。

表3 化疗耐药组DLBCL治疗各阶段血清IL-6、IL-10水平（±s，pg/mL）

表3 化疗耐药组DLBCL治疗各阶段血清IL-6、IL-10水平（±s，pg/mL）

注：与缓解时比较，*P＜0.05

指标 阶段治疗前 缓解时 复发耐药时IL-6 IL-10 13.01±2.36*51.28±5.79*5.18±2.19 28.23±2.85 12.98±2.16*66.53±0.45*

3 讨论

研究表明，DLBCL的多重耐药现象仅从耐药基因角度无法完全解释。且有研究证实：在DLBCL导致细胞耐药的原因之一是耐药的信号转导通路中被激活[4-5]。近年来研究发现细胞因子IL-6、IL-10在恶性肿瘤发生发展中有重要作用，这些因子可能参与肿瘤细胞的转移及肿瘤微环境的重建（途径是通过免疫逃逸）参而影响其发展和转移[6]。且有研究表明，预后差的DLBCL患者血清IL-6明显升高，提示血清IL-6是DLBCL患者预后不良因素之一。血清中IL-6水平与肿瘤大小或分期呈正相关[7]。同自身抗体一样，IL-6与肿瘤负荷密切相关。IL-6水平显著增高可用于DLBCL患者的早期诊断，预后判断和治疗疗效检测[8]。本研究结果证实：治疗前化疗耐药组血清IL-6水平均高于化疗敏感组及正常对照组水平，差异有统计学意义（P＜0.05）。而对照组与化疗敏感组水平无差异，且治疗后化疗耐药组缓解者血清IL-6水平会有一定程度的下降，治疗无效者及复发耐药者血清IL-6水平与治疗前无明显变化。进一步提示血清IL-6水平的升高与DLBCL细胞耐药相关，血清IL-6水平的升高与复发耐药相关。上述结果表明血清中IL-6水平与化疗耐药性相关。

研究证实，IL-10作为人类重要的免疫调节细胞因子既可促进癌症（通过抑制免疫刺激细胞增殖）又可抑制癌症（主要通过抗血管生成），它由B细胞分泌（正常与异常B细胞）。IL-10能抑制TFN-γ细胞因子或直接拮抗TNF细胞因子的作用而抑制机体的抗病毒免疫。且研究表明，IL-10的基因多态性与DLBCL侵袭性相关[9]。其基因的多态性也代表了DLBCL的异质性。在肿瘤的发生、发展中起重要作用，在一定程度其血清水平代表肿瘤负荷大小，代表肿瘤的恶性程度。本研究结果证实，治疗前化疗耐药组血清IL-10水平均高于化疗敏感组及正常对照组水平，差异有统计学意义（P＜0.05），而对照组与化疗敏感组水平无差异，且治疗后化疗耐药组缓解者血清IL-10水平会有一定程度的下降，治疗无效者及复发耐药者血清IL-10水平与治疗前无明显变化。进一步提示血清IL-10水平的升高与DLBCL细胞耐药相关，血清IL-10水平的升高与复发耐药相关。上述结果表明血清中IL-10水平与化疗耐药性相关。本研究证实，DLBCL患者中血清IL-10高表达者容易发生复发耐药，预后差，提示DLBCL细胞耐药与血清IL-10水平有关。血清中细胞因子IL-6、IL-10的表达可预测DLBCL的疗效，可能参与弥漫大B细胞淋巴瘤细胞的化疗耐药，是DLBCL耐药的相关指标。

[1]Ohsawa M，IkuraY，Fukushima H，et al.Immunohistochemical expression of multidrug resistance proteins as a predictor of poor response to chemotherapy and prognosis in patients with nodal diffuse large B-cell lymphoma[J].Oncology，2005，68（4-6）：422-431.

[2]钱素英，毛联钢，吴宁宁，等.BCRP及MDR1在非霍奇金淋巴瘤的表达及预后分析[J].实用肿瘤杂志，2009，24(3)：266-268.

[3]白血病·淋巴瘤编辑委员会.难治性非霍奇金淋巴瘤的诊断标准[J].白血病·淋巴瘤，2007，16（4）：349.

[4]袁晓露.弥漫大B细胞淋巴瘤信号通路与耐药研究进展[J].白血病·淋巴瘤，2008，18：76-78.

[5]青晓艳，姚文秀，徐义全.弥漫大B细胞淋巴瘤的研究现状及展望[J].中华临床医师杂志：电子版，2012，6（4）：136-138

[6]Lin WW，Karin M.A cytokine-mediated link between innate immunity，inflammation，and Cancer[J].J Clin Invest，2007，l17（5）：1175-1183.

[7]何贵金，杜怀林，夏振龙，等.血清IL-6水平与胆管癌及肿瘤负荷的相关性研究[J].中华普通外科杂志，2000，15（10）：585-586.

[8]李乐，苏丽萍，马莉，等.非霍奇金淋巴瘤多药耐药的实验研究[J].中华肿瘤杂志，2009，31（3）：199-202.

[9]Kube D，Hua TD，Von BF，et al.Effect of interleukin-10 gene polymorphisms on clinical outcome of patients with aggressive non-Hodgkin′s lymphoma：an exploratory study[J].Clin Cancer Res，2009，14：3777-3784.

Correlation between the chemotherapy resistance of diffuse large B-cell lymphoma and cytokines IL-6 and IL-10

WANG Wenxia1WANG Bin1LIU Xinhong2
1.Department of Hematology and Oncology,the People′s Hospital of Linqu County,Shandong Province,Linqu 262600,China;2.Department of Radiation Oncology,the People′s Hospital of Linqu County,Shandong Province,Linqu 262600,China

ObjectiveTo explore the relationship between the expression of serum cytokines IL-6,IL-10 and chemotherapy resistance in patients with diffuse large B-cell lymphoma(DLBCL)by monitoring the level of serum cytokines IL-6,IL-10.Methods40 cases which diagnosed as DLBCL were enrolled,according to the sensitivity to the chemotherapy,they were divided into two groups(chemotherapy resistant group and chemotherapy sensitive group),and 20 cases in each group,another 20 cases of healthy individuals were enrolled as the control group.The levels of serum cytokines IL-6，IL-10 at different stage in DLBCL patients and normal control group were detected by ELISA.ResultsThe levels of serum cytokines IL-6,IL-10 in chemotherapy resistant group before therapy was all higer than chemotherapy sensitive group and control group(all P＜0.05),after the treatment,it was lower than before(P＜0.05);the levels of serum cytokines IL-6,IL-10 after the DLBCL recurrence and drug resistance were higher than the remission.ConclusionThe levels of serum IL-6,IL-10 not only can predict the chemotherapy efficacy of DLBCL but also are the drug resistance factors of DLBCL.

Diffuse large B-cell lymphoma;Cytokines;IL-6;IL-10;Drug resistance

R733

C

1673-7210（2012）08（c）-0154-02

2012-04-06 本文编辑：卫 轲）