PAPP-A在妇产科妊娠期高血压临床的应用价值

段嫦丽 江敏 潘丽

妊娠期高血压疾病是妊娠期常见的并发症，严重威胁母婴健康，妊娠期高血压疾病多发生于妊娠20周以后，临床表现多为高血压、蛋白尿、浮肿，严重时出现抽搐、昏迷，甚至母婴死亡。迄今为止，妊娠期高血压疾病仍为孕产妇及围生儿死亡的重要原因。大量的研究表明，妊娠期高血压疾病发病的中心环节为广泛的血管内皮损伤，而胎盘滋养细胞缺血在妊娠期高血压疾病发病中起重要作用。本研究通过测定、比较妊娠期高血压疾病孕妇与正常孕妇血清妊娠血浆PAPP-A水平，旨在分析PAPP-A与妊娠期高血压疾病发病的关系，探讨其在临床中的应用价值。

1 材料与方法

1.1 一般资料 选择2009年8月至2011年9月在我院分娩的60例妊娠期高血压疾病孕妇为研究对象，其中患有妊娠期高血压的患者共30例，子痫前期患者共20例，子痫患者共10例，平均年龄为(26.5±4.3)岁，平均孕周约为(37.4±2.1)周，60例患者均为初产妇。选择与之同期分娩的60例正常孕妇作为对照组。病例组与对照组年龄、分娩孕周在统计学分析中均无显著性差异，具有可比性。

1.2 操作方法 取空腹时前静脉血5 ml置试管中，以3000 r/min离心15 min，取血清置-20℃冰箱中保存待测。PAPP-A酶联免疫定量试剂盒，购自美国DSL公司。操作步骤:实验开始前，各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。

1.2.1 加样 分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100 μl，余孔分别加标准品或待测样品100 μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120 min。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。

1.2.2 弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液样品稀释液100 μl(在使用前一小时内配制)，酶标板加上覆膜，37℃反应60 min。

1.2.3 温育60 min后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1～2 min，大约400 μl/每孔，甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

1.2.4 每孔加检测溶液样品稀释液100 μl，酶标板加上覆膜37℃反应60 min。

1.2.5 温育60 min后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1～2 min，350 μl/每孔，甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

1.2.6 依序每孔加底物溶液90 μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色(30 min内，此时肉眼可见标准品的前3～4孔有明显的梯度兰色，后3～4孔梯度不明显，即可终止)。

1.2.7 依序每孔加终止溶液50 μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。

1.2.8 用酶联仪在450 nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。

1.3 统计学方法 采用SPSS 1.0软件，输入观察记录的数据，进行统计学处理.绘制表格，数据组间比较采用t检验

2 结果

妊娠期高血压疾病组孕妇血清中PAPP-A含量均高于正常对照组，且随病情的加重，血清中PAPP-A值逐渐增高。见表1。

表1 正常孕妇和妊娠期高血压疾病孕妇血清PAPP-A水平

3 讨论

PAPP-A与妊娠期高血压疾病的关系:PAPP-A是一种与妊娠相关的人分子糖蛋白，1974年由Lin等人从孕妇血清中分离得出，经过试验分析，认证其是一种胎盘组织中的糖类蛋白质，后因经免疫组化证实PAPP-A定位于绒毛细胞的滋养细胞层。因此，血清中PAPP-A的水平可反映滋养细胞的具体功能［1］。而且人们也早已认识到妊娠期高血压这种疾病总是与胎盘相互共存，即使是孕妇所怀的根本无胎儿存在的葡萄胎，也可发病，并且随着妊娠的终止，胎盘祛除，病情可自然缓解，因此，妊娠期高血压疾病亦被称为胎盘性疾病。而对于妊娠期高血压疾病病因，目前比较公认的看法是:滋养细胞生理功能的改变可能是导致妊娠期高血压疾病胎盘生理性血管重铸障碍(浅植入)，最终导致妊娠期高血压疾病发病的重要环节［2］。但这种说法在学术界仍然存在着许多争议，依旧需要探讨和商榷。

同时，有国外学者通过具体研究，发现患有妊娠期高血压一病的孕妇的血清中PAPP-A的浓度会升高，尤其是先兆子痫患者出现任何明显症状前，在其他蛋白质未受影响时就可测出PAPP-A值明显升高，且其增高幅度与病情轻重呈正相关。Bersinger等［3］将妊娠期高血压疾病患者(实验组)与正常孕妇(对照组)的胎盘组织进行检测，发现实验组的PAPPA的浓度明显高于对照组。认为PAPP-A可作为了解妊娠期高血压疾病患者胎盘功能的个指标。Bersinger等［4］的研究表明妊娠期高血压疾病患者血清中的PAPP-A水平与妊娠期高血压疾病的发生存在着相关性同时，根据有关资料显示:PAPP-A主要是由由胎盘和蜕膜产生的大分子糖蛋白，在怀孕期间，PAPP-A由蜕膜大量产生并释放到母血循环中。母血中PAPP-A浓度随着孕期的增加而不断升高直到分娩。但是在DS综合征和18染色体三体患者的母血中PAPP-A浓度却明显降低［5］

本研究发现妊娠期高血压疾病孕妇血清PAPP-A水平明显高于正常孕妇(P＜0.05;P＜0.01和P＜0.001)，且与病情的严重程度呈正相关［6］。PAPP-A升高的原因可能是由于妊娠期高血压疾病时，胎盘浅着床，滋养细胞缺血缺氧而大量增殖，PAPP-A反应性分泌增多，并且是敏感的指标，在妊娠期高血压阶段即升高，进一步证实妊娠期高血压疾病与胎盘滋养细胞功能有关。

综上所述，PAPP-A在妊娠期高血压疾病发病中起重要作用，可用于对妊娠期高血压临床的检测和评估，通过对患者血清中PAPP-A的水平变化，即可分析出患者的病情阶段及其变化情况，PAPP-A在妇产科妊娠期高血压疾病发病中具有极高的临床应用价值。

［1］Bersinger NA，Groome N，Mut Tukrishna S.Pregnancy associated and placental proteins in the placental tissue of normal pregnant women and patients with preeclampsia at term.Eur J Endocrinol，2002，147(6):785-793.

［2］Bersinger NA，Smarason AK，Mut Tukrishna S，et al.Women with preeclampsia have increased serum levels of pregnancy associated plasma protein A(PAPP-A)，inhibin A，activin A and soluble E2 selectin.Hypertens Pregnancy，2006，22(1):45-55.

［3］Wilczynski JR，Glowacka E，Nowak M，et al.Serum concentration of soluble vascular-cellular adhesion molecule-1(VCAM-1)and expression of its receptor VLA-4 on the surface of peripheral blood and decidual lymphocytes of preeclamptic women.Ginekol Pol，2008，74(10):1335-1342.

［4］Hey LW.The role of soluble adhesion molecules in evaluating chdothelial cell activation in preeclampsia.Am J Obstet Gynecol，1999，180(11):68-72.

［5］Stein A.Labor-associated expression of intercellulas adhesion molecule-1 in placental endothelial cells indicates participation of immunological process in parturition.Placenta，1999，20(7):567-573.

［6］林明怀.子痫前期、子痫病因及发病机制的研究进展.中国实用妇 科与产科杂志，2008，20(10):577-579.