榆黄蘑饮料对小鼠实验性高脂血症的降脂作用
2012-11-15郑超楠金在久施溯筠
郑超楠,金在久,施溯筠
(延边大学,长白山生物资源与功能分子教育部重点实验室,吉林延吉133000)
榆黄蘑饮料对小鼠实验性高脂血症的降脂作用
郑超楠,金在久,施溯筠*
(延边大学,长白山生物资源与功能分子教育部重点实验室,吉林延吉133000)
探讨不同浓度的榆黄蘑饮料的降脂作用(165、330、660g·L-1,0.1mL·10g-1BW-1)。结果显示榆黄蘑饮料能够降低蛋黄乳液所致小鼠单纯性高胆固醇症中血清中TC含量(P<0.01),榆黄蘑饮料能够下调高脂饲料所致小鼠血清TC、TG和LDL-C的含量的升高(P<0.05或0.01),并增加其血清中HDL-C的含量(P<0.05或0.01),增加小鼠食糜性高脂血症中血清 SOD的活性(P<0.05),并降低MDA的含量(P<0.05或0.01)。结果表明榆黄蘑饮料对小鼠实验性高脂血症有较好的防治作用,推测榆黄蘑饮料的降脂作用是部分地通过抗氧化途径起作用的。
榆黄蘑饮料,高血脂症,小鼠,降脂,抗氧化
榆黄蘑(Pleurotus citrinopileatus)又称榆黄菇、玉皇蘑、金顶侧耳等,属于担子菌亚门,层菌纲,伞菌目,侧耳科,侧耳属[1]。榆黄蘑为一种美味食用菌和药用菌,并含有丰富的蛋白质(42%)、氨基酸和维生素等多种营养成分,具有滋补健身、化痰定喘、平肝健胃和抗氧化、抗疲劳、抗肿瘤作用[2-3]。高脂血症是导致动脉粥样硬化的重要因素,血脂异常所引起的动脉粥样硬化是造成冠心病、高血压和脑血管疾病的主要原因,其中胆固醇(TC)增加1%,可使冠心病危险增加约3%,全球每年约有1200万人死于心血管病和脑中风[4],从中药中寻找高效、安全的降脂新药和保健食品成为研究的新热点。本实验用榆黄蘑的新鲜子实体制成不同浓度榆黄蘑饮料,研究其对蛋黄乳液腹腔注射所致小鼠单纯性高胆固醇症和高脂饲料所致小鼠食糜性高脂血症的影响,探讨其防治脂质代谢紊乱的作用及机制。
1 材料与方法
1.1 材料与仪器
昆明种小鼠 体重18~22g,延边大学实验动物科提供,生产许可证号:SCXK(吉)2007-0003,榆黄蘑购自延吉农贸市场。
HH-501超级恒温水浴锅 江苏金坛市恒丰仪器厂;U-1900型紫外分光光度计 上海精密科学仪器有限公司K;A-1000低速台式离心机 上海安亭科学仪器厂;DY-Ⅱ型电动玻璃匀浆机 宁波新芝生物科技股份有限公司;胆固醇(TC)检测试剂盒、甘油三酯(TG)检测试剂盒(批号:20091010)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)检测试剂盒(批号:20090311) 中生北控生物科技股份有限公司;普通饲料和高脂饲料(1%胆固醇、0.2%胆盐、5%猪油和93.8%基础饲料配制而成) 均由延边大学实验动物中心提供;75%蛋黄乳液 由新鲜鸡蛋去蛋清,用消毒生理盐水配制而成。
1.2 实验方法
1.2.1 榆黄蘑饮料的制备 榆黄蘑新鲜子实体于室温在蒸馏水中浸提30min后,脱脂棉过滤,加调味剂和稳定剂(pH3.6~3.8),均质,采用巴氏分段灭菌后制得660g·L-1榆黄蘑饮料,使用时用蒸馏水稀释成330、165g·L-1浓度的榆黄蘑饮料[5]。
1.2.2 对蛋黄乳液致小鼠单纯性高胆固醇症模型的影响 选用18~20g昆明种小鼠60只,雌雄各半,每组10只。小鼠随机分为正常对照组(灌胃蒸馏水);模型组(灌胃蒸馏水);非诺贝特组(灌胃非诺贝特0.15g/kg,第23d开始给药,给药7d)和榆黄蘑饮料低、中、高剂量组(1.65、3.3、6.6g·L-1,0.1mL·10g-1BW-1)[6],连续给药30d。第30d给药后2h,除正常对照组外,其余组腹腔注射75%的蛋黄乳液0.5mL[5],禁食过夜,自由饮水,10h后,各组再给相应药物1次,于末次给药2h后,眼眶取血,分离血清,采用试剂盒检测TC、TG含量。
1.2.3 对高脂饮食致小鼠高脂血模型的影响 选用18~20g昆明种小鼠60只,雌雄各半,分组和给药剂量同1.2.2,连续给药30d。分组后除正常对照组喂普通饲料外,其余各组均喂高脂饲料。第30d,于末次给药2h后,眼眶取血,分离血清,采用试剂盒检测血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C的含量,SOD活性采用羟胺法检测[7],MDA的含量采用硫代巴比妥酸法测定[8]。LDLC含量由Friedwald WT公式计算[9],LDL-C=TC-(1/5TG+ HDL-C)。
1.2.4 统计学方法 数据采用SPSS10.0软件处理,结果以(±s)表示,各实验组分别与模型组和阳性对照组进行比较,采用t检验。
2 结果与分析
2.1 榆黄蘑饮料对蛋黄乳致小鼠单纯性高胆固醇症模型血脂含量的影响
由表1可见,模型组小鼠血清TC比空白组显著升高(P<0.01),表明蛋黄乳所致小鼠高脂血症实验模型成功。非诺贝特组小鼠血清TC的含量比模型组的均有显著下降(P<0.01)。榆黄蘑饮料各给药组与高脂模型组相比,血清中TC含量明显降低(P<0.01),特别是榆黄蘑饮料高剂量组小鼠血清TC含量的下降同非诺贝特组比无显著差异,说明榆黄蘑饮料对蛋黄乳所致小鼠单纯性高胆固醇症有较好的预防作用。
表1 榆黄蘑饮料对蛋黄乳致小鼠高血脂模型中TC含量的影响(±s,n=10)Table 1 Effect of Pleurotus citrinopileatus beverage on TC contents in serum of hyperlipidemia mice which induced by 75% egg yolk solution(±s,n=10)
表1 榆黄蘑饮料对蛋黄乳致小鼠高血脂模型中TC含量的影响(±s,n=10)Table 1 Effect of Pleurotus citrinopileatus beverage on TC contents in serum of hyperlipidemia mice which induced by 75% egg yolk solution(±s,n=10)
注:与模型组比较:**P<0.01;与非诺贝特组比较:△P<0.05;△△P<0.01;表2、表3同。
组别 TC(mmol·L-1)空白对照组 2.31±0.27**△△高血脂模型组 6.01±0.38非诺贝特组 4.35±0.44**榆黄蘑低剂量组 5.05±0.49**△榆黄蘑中剂量组 4.88±0.14**△榆黄蘑高剂量组 4.54±0.31**
2.2 榆黄蘑饮料对高脂饮食致小鼠高血脂模型的影响
由表2可见,模型组小鼠血清TC、TG和LDL-C的含量同空白组相比均有显著升高(P<0.01),而HDLC含量则显著下降(P<0.01),表明高脂饲料所致小鼠高脂血症实验模型成功。非诺贝特组小鼠血清TC、TG和LDL-C的含量与模型组相比均显著下降(P<0.01),而HDL-C含量则显著上升(P<0.01)。榆黄蘑饮料各给药组与高脂模型组相比,血清中TC、TG和LDL-C含量明显降低(P<0.05或0.01),而HDL-C含量则显著升高(P<0.05或0.01),特别是榆黄蘑饮料高剂量组小鼠血清TC和LDL-C的含量的下降及HDL-C含量的上升同非诺贝特组比无显著差异,说明榆黄蘑饮料对高脂饮食致小鼠高脂血症有较好的防治作用。
表2 榆黄蘑饮料对高脂饮食致小鼠高血脂模型中TC、TG、HDL-C和LDL-C含量的影响(±s,n=10)Table 2 Effect of Pleurotus citrinopileatus beverage on TC,TG,HDL-C and LDL-C contents in serum of hyperlipidemia mice which induced by high-fat diet(±s,n=10)
表2 榆黄蘑饮料对高脂饮食致小鼠高血脂模型中TC、TG、HDL-C和LDL-C含量的影响(±s,n=10)Table 2 Effect of Pleurotus citrinopileatus beverage on TC,TG,HDL-C and LDL-C contents in serum of hyperlipidemia mice which induced by high-fat diet(±s,n=10)
组别 TC(mmol·L-1) TG(mmol·L-1) HDL-C(mmol·L-1) LDL-C(mmol·L-1)空白对照组 2.35±0.24**△ 0.80±0.19** 1.70±0.36** 0.49±0.26**△高血脂模型组 4.93±0.39 1.72±0.17 0.84±0.25 3.75±0.27非诺贝特组 2.81±0.23** 0.93±0.27** 1.58±0.30** 1.04±0.47**榆黄蘑低剂量组 3.49±0.36**△ 1.48±0.29*△△ 1.14±0.11*△ 2.05±0.62**△榆黄蘑中剂量组 3.19±0.26**△ 1.26±0.21**△ 1.22±0.14**△ 1.72±0.38**△榆黄蘑高剂量组 3.05±0.13** 1.21±0.25**△ 1.54±0.17** 1.27±0.29**
表3 榆黄蘑饮料对高脂饮食致小鼠高血脂模型中SOD活性和MDA含量的影响(±s,n=10)Table 3 Effect of Pleurotus citrinopileatus beverage on SOD activity and MDA content in serum of hyperlipidemia mice which induced by high-fat diet(±s,n=10)
表3 榆黄蘑饮料对高脂饮食致小鼠高血脂模型中SOD活性和MDA含量的影响(±s,n=10)Table 3 Effect of Pleurotus citrinopileatus beverage on SOD activity and MDA content in serum of hyperlipidemia mice which induced by high-fat diet(±s,n=10)
组别 SOD(UI·mg prot-1)MDA(nmol·mg prot-1)空白对照组 30.96±5.29*△△ 5.11±0.92**高血脂模型组 34.89±6.65 8.27±2.42非诺贝特组 42.39±6.26* 5.09±2.07**榆黄蘑低剂量组 37.06±5.39△ 6.21±2.31*△榆黄蘑中剂量组 40.33±5.36* 5.95±1.75*榆黄蘑高剂量组 46.33±3.43* 5.05±1.98**
由表3可知,榆黄蘑中、高剂量组可以升高高脂血症小鼠的血清中SOD含量(P<0.05),榆黄蘑低、中剂量组可以降低高脂血症小鼠的血清中MDA含量(P<0.05),其高剂量组则显著降低MDA含量(P<0.01)。而榆黄蘑饮料的中、高剂量组升高高脂血症小鼠的血清中SOD含量和降低MDA的含量同非诺贝特组比无显著差异。
3 讨论
高脂血症是临床上常见的脂质代谢紊乱疾病,随着人民生活水平的提高,高脂血症发病率逐年上升,且有低龄化倾向。其主要表现为血清中TC、TG升高,或LDL-C的升高,HDL-C的降低。本实验中,榆黄蘑饮料能够降低蛋黄乳所致小鼠单纯性高胆固醇症中血清中TC含量(P<0.01),说明榆黄蘑饮料对脂质代谢紊乱有较好的预防作用。腹腔注射蛋黄乳形成的急性模型是动物摄入过多外源性TC而形成的血脂升高,但由于腹腔注射蛋黄乳的快速造型方式与人类因饮食造成的高脂血症发病机制存在一定的差异,要阐明其作用机制还需要建立慢性高脂血症模型来加以研究[10]。我们进一步研究了榆黄蘑饮料对高脂饲料所致小鼠食糜性高脂血症的研究,实验结果表明榆黄蘑饮料能够下调高脂饲料所致小鼠血清TC、TG和LDL-C的含量的升高(P<0.05或0.01),并增加其血清中HDL-C的含量(P<0.05或0.01),说明榆黄蘑饮料对高脂饲料所致小鼠食糜性高脂血症有较好的治疗作用。
高脂血症常伴有氧自由基活性增加,它增加血管内皮细胞自由基的释放,导致大量HDL-C等成分被氧化;另一方面,高脂血症又直接损伤动脉壁的抗氧化机能,随着体内血脂升高和粥样硬化斑块的形成,使体内自由基产生与清除失去平衡,生物膜发生脂质过氧化,严重破坏内皮细胞的结构和功能。因而抗氧化亦是辅助治疗高脂血症的一个重要途径,经典的调血脂药物普罗布考即是一个抗氧化剂[10],中药中绿茶、女贞子、大黄的降脂作用都和其抗氧化性相关[11-13]。实验中进一步检测了小鼠血清中SOD的活性和MDA的含量,发现榆黄蘑饮料增加小鼠食糜性高脂血症中血清SOD的活性(P<0.05),并降低MDA的含量(P<0.05或0.01)。MDA为自由基氧化细胞膜上不饱和脂肪酸形成的脂质过氧化物的稳定存在形式,可反映机体内脂质过氧化的程度。SOD是体内清除氧自由基的主要酶,是体内抗氧化酶体系的重要组成部分。因此,MDA与SOD可反映机体的氧化与抗氧化功能状态。在前期的研究中发现,榆黄蘑及其饮料都具有较好的抗氧化性[5-6],推测榆黄蘑饮料的降脂作用是部分地通过抗氧化途径来减少机体组织遭受脂质过氧化的损伤。
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Lowing-lipid effect of Pleurotus citrinopileatus beverage on hyperlipoidemia in mice
ZHENG Chao-nan,JIN Zai-jiu,SHI Su-yun*
(Key Laboratory for Natural Resource of Changbai Mountainamp;Functional Molecules,Ministry of Education,Yanbian University,Yanji 133000,China)
To investigate the lowing-lipid of Pleurotus citrinopileatus beverage on hyperlipoidemia mice.The result showed that Pleurotus citrinopileatus beverage could reduce the content of TC in serum of acute hyperlipidemia mice which induced by 75%egg yolk solution(P<0.01).Pleurotus citrinopileatus could decrease the content of TC,TG and LDL-C in the serum that increased by fed with high fat diet(P<0.05 or 0.01),and increase the content of HDL-C(P<0.05 or 0.01).It also increased the SOD activity and decreased the MDA content in the serum on hyperlipidemia mice by high fat diet(P<0.05 or 0.01).Results suggested that Pleurotus citrinopileatus beverages had preventive and therapeutic effects on hyperlipidemia mice that was partly through antioxidant pathway.
Pleurotus citrinopileatus beverage;hyperlipidemia;mice;lowing-lipid;antioxidant
TS201.4
A
1002-0306(2012)05-0369-03
2011-04-22 *通讯联系人
郑超楠(1987-),女,硕士,研究方向:药物新剂型与新技术。
延边大学“211”工程三期建设项目(YB211-0302)。